激光扫描共聚焦显微镜原位检测核酸及蛋白质的实验教学设计

为实现实验教学与科研工作的紧密结合,该教学设计采用激光扫描共聚焦显微镜在细胞原位检测核酸和绿色荧光蛋白,分析融合蛋白的亚细胞定位。通过2个经典的检测方案,使学生更好地理解和掌握激光扫描共聚焦显微镜的检测原理、操作步骤及结果分析方法。     

设计利用现代科学仪器 紧跟科学前沿的细胞生物学实验

简要介绍了透射电子显微镜、激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪等现代科学仪器的特点及其在细胞生物学研究中的应用;讨论了细胞生物学的一些前沿研究领域,如细胞衰老、肿瘤细胞诱导凋亡、干细胞及肿瘤细胞的诱导分化、细胞信号转导、细胞周期调控、小干扰RNA引起的细胞基因沉默等,提出了利用现代科学仪器,针对科学问题设置细胞学实验的构想,为高校创新型人才培养体系中课程建设提供参考。     

利用整体染色与透明技术观察棉花胚囊方法

目的:探索一种观察棉花胚囊的方法。方法:用整体染色与透明技术对棉花胚囊进行处理,利用激光扫描共聚焦显微技术进行观察。首先在解剖镜下将内外珠被剥掉,取出胚囊;然后水解过程需要反复实验得到合适的时间,否则荧光染料很难进入细胞;最后材料在激光扫描共聚焦显微镜上用488nm激光激发观察并摄像。结果:可以清晰地观察到棉花胚囊组织的各组成部分及其细胞结构。结论:利用激光扫描共聚焦显微镜的重组功能构建胚囊的立体结构,有助于了解胚囊各组成细胞的空间结构,为观察棉花及其他较大子房或胚珠提供了一种简单快捷的方法。     

Zeiss LSM710激光扫描共聚焦显微镜的使用和管理

介绍了Zeiss LSM 710激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscopy,LSCM)的配置和技术参数,样品制备要求,图像采集的参数设置原则,日常维护和共享管理等方面。针对LSM 710的主要功能列举了生物医学领域的一些应用实例,如多通道荧光图像采集和自动叠加、荧光共定位分析、Z轴扫描和三维重建,光谱扫描等。LSCM避免了非焦平面杂散光的干扰,其分辨率比普通光学显微镜大大提高,能够进行光学切片和三维重建等,在生物医学领域应用十分广泛。中山医学院的ZeissLSM 710实行开放共享使用,使用率高,已成为学院和各附属医院相关领域常规科研仪器之一。     

透射电镜和光镜联合应用于细胞观察

在光学显微镜下获得细胞的全视野荧光图像及位置信息,并在培养皿进行原位细胞透射电镜样品制备、超薄切片及染色,最后在透射电镜下获得目标细胞的超微结构信息。采用该方法成功获得处于细胞分裂M期细胞的显微结构,既有完整细胞的荧光图像,又有局部的超微结构的高分辨图像。该方法能够用在较高分辨率下分析亚细胞结构分布以及特定结构的动态变化。     

细胞培养与转染技术的实验教学设计和探讨

为优化细胞生物学实验教学内容、让学生及时掌握先进的科研技术、实现研究型与创新型人才培养的目标,设计了一套简便的、适合教学的动物细胞培养和细胞转染实验方法. 即:无菌环境下培养CHO(Chinese Hamster Ovary)细胞,然后将绿色荧光蛋白基因作为报告基因以质粒为载体导入CHO细胞中,实现表达后利用荧光倒置显微镜观察美丽的荧光显微世界.同时,探讨了综合型和研究型两类细胞培养与转染实验课程的具体实施方案.该实验内容和教学方法使学生综合分析与研究问题的能力得到锻炼与提高,为培养适应科研快速发展、具有较强竞争力的创新人才奠定了基础.     

荧光显微镜实验的设计

荧光显微镜技术在光学显微镜领域占有极为重要的地位,但现实中缺少相关的教学实验.介绍了新开发的荧光显微镜实验的设计思想和实现方案,利用落射荧光附件在普通生物显微镜上进行荧光成像实验.学生自制简易标本,以CCD和PC机采集并存储所获图像;尝试跨学科、研究型、开放式实验,教学.     

细胞生物学与显微技术

细胞生物学的建立和发展都离不开显微技术,本文对几种主要光学显微镜、电子显微镜以及扫描隧道显微镜和原子力显微镜的工作原理及其在细胞生物学中的应用作简要阐述。     

Leica DMI6000 B活细胞工作站的配置及应用

通过介绍Leica DMI6000 B活细胞工作站(Live Cell Application,LCA)的配置和技术参数,样品制备要求,图像采集的参数设置原则等,并以实例讲解LCA目前在生物医学领域的应用。DMI6000 B配有细胞孵育系统和图像采集系统,孵育系统对活细胞进行常氧或缺氧培养,图像采集系统实时采集细胞图像。图像采集系统中的焦平面跟踪系统,可防止在延时拍摄中图像变虚;明场与荧光多通道采集,可帮助实现活细胞荧光示踪;多位点采图,可帮助实现多视野动态观察;拼接扫描可采集样本全景图像;z轴扫描可对样本进行立体观察。LCA具有倒置荧光显微镜和细胞培养箱的双重功能,可跟踪观察活细胞的动态变化;DMI6000 B还可在缺氧条件下完成上述功能。     

NO探针应用于细胞生物学实验的探索

为了将信号分子NO的检测探针应用于细胞生物学实验,使用NO荧光探针DAF-FM双乙酸盐和小鼠腹腔巨噬细胞,设计了"荧光探针检测巨噬细胞中NO含量"的实验项目,并在本科生细胞生物学实验课中实施。得到一定浓度脂多糖和食用菌多糖处理可显著增强巨噬细胞内NO荧光探针平均光密度值(P <0.05)的实验结果。实验表明,NO荧光探针能直观显示细胞中NO合成量的变化,可作为一种简便和可视化的信号分子检测方法,应用于细胞生物学实验教学。     

前沿地带

高科技头盔微型生物显微镜观察细胞等微小物体的显微镜通常都是比较大的设备。但加州大学伯克利分校的生物工程学家LukeLee发明的显微镜却不是这样。在他的显微镜中，样本细胞被滴入到一个刻在芯片中的充满液体的管道中，在这个管道中细胞被荧光染料作上标记，然后用激光照亮。这个激光光束促使染料以特定的波长发光，从而产生清晰的细胞图像。激光所使用的透镜是一滴液态聚合物，其直径仅为人头发丝的２０分之一，在其中通入电流使其曲率改变，从而实现聚焦。这种显微镜使用廉价的元件，可以用与微芯片相同的工艺进行制造，每个的成本只有…     

2003年全国中学生生物学联赛暨江苏省第十一届生物奥林匹克竞赛预赛试卷

一、选择题(下列各题,在每小题给出的四个选项中, 只有一个正确的答案。每小题l分,本大题共70 分。)1.最早一架复式显微镜的创制者是()。 A .T.Scll、叭斑ImB.A.van玩eli讹汕能k C .Z.J跳en D.R.IL洲〕ke2.细胞质中合成的叶绿体蛋白在N端含有一个额外 的氨基酸序列,称为()o A.信号肤B.导肤C.转运肤D·寡肤3·在细胞生物学的研究仪器中,有3种显微镜的设 计或发明获得了诺贝尔奖,它们分别是() A.相差显微镜、透射电子显微镜、扫描隧道电子 显微镜 B.电子显微镜、激光共焦点扫描显微镜、荧光显 微镜 C.暗场显微镜,电子显微镜、相差显…     

青铜器及其陶范考古中常用的分析方法研究

各种化学分析仪器在考古学中的应用使考古学取得了很大的进展,本文主要从各种成分分析方法如扫描电子显微镜、X射线衍射、X射线荧光分析、金相显微镜等在青铜器及其陶范考古中的应用入手,分析了各种分析仪器在考古学中的重要作用。     

青铜器及其陶范考古中常用的分析方法研究

各种化学分析仪器在考古学中的应用使考古学取得了很大的进展,本文主要从各种成分分析方法如扫描电子显微镜、X射线衍射、X射线荧光分析、金相显微镜等在青铜器及其陶范考古中的应用入手,分析了各种分析仪器在考古学中的重要作用。     

有序建构,低熵增效——“显微镜”教学思考

<正>显微镜是中学生物学实验中最重要、最常用的仪器,熟练使用显微镜是初高中学生必须掌握的一项基本技能。《义务教育生物学课程标准(2011年版)》中要求学生要能正确使用显微镜等生物学实验中常用的仪器和用具,具备一定的实验操作能力。本地区初中生物学科结业会考对"认识和学习使用显微镜"要求如下:知识要求是B(理解水平),技能要求是E(独     

激光扫描共聚焦显微镜

阐述了激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)的原理和构造,分析了LSCM的优点和缺点,如获得清晰的图像,可光学切片、三维重建,实时多通道荧光,ZOOM放大,局部光操作,检测过程快、效果更灵敏、定位更准确。探讨了LSCM扫描方式及应用,如研究多种荧光定位分析,需选择XY扫描;研究标本空间实际位置信息,样品三维图像信息,需选择XYZ扫描;用于研究活体标本随时间的变化,或在不同时间采取不同的处理方法观察标本的荧光变化研究,得选择XYT扫描。并针对目前管理该仪器设备上存在的问题提出一些建议,以期对高校实验室的开放共享提供有益参考。     

用电镜半薄切片技术制备光镜连续观察样品的实验

原生动物是一类单细胞真核生物。在中学生物学实验中,观察原生动物的细胞结构对进一步了解真核细胞中各种细胞器的形态及其细胞结构的复杂性具有重要作用。目前对原生动物细胞结构的观察中,光学显微镜和电子显微镜是必不可少的工具,其中光镜观察显示的结构图像仅是一个层面,其结构信息十分有限;电镜观察可显示细胞的超微结构,     

全内反射荧光显微术原理及其应用

全内反射荧光显微术,利用全内反射时产生的隐失波照明样本,仅激发样本表面薄层范围内的荧光基团,与传统的荧光显微镜相比,使显微成像在z轴上的空间分辨率得到了显著改善,大大提高了图像的信噪。比和对比度。近年来,该技术已被生物学家们广泛地应用于单分子荧光成像中。本文介绍了全内反射荧光显微术的原理及其在生物学研究中的应用,并对其未来发展前景作了展望。     

教学“细胞”一节的几点体会

高中生物学“细胞”一节,教学时,因细胞必须在显微镜下才能观察得到,尤其是细微部分结构,在光学显微镜下还不一定观察得清楚。因此,这节教材不易     

蔡司LSM 7DUO NLO激光共聚焦显微镜的应用和管理

介绍了蔡司LSM7DUO NLO激光扫描共聚焦显微镜三个组成部分单光子、双光子和快速扫描的硬件配置和软件功能以及成像和图像分析的应用,例如单、双光子图像叠加,多视野拼接拍摄、三维重构等功能在生命科学研究中的应用。介绍管理该仪器的一些方法和心得,保障仪器为教学和科研工作提供更好的服务。