孟鲁司特对哮喘大鼠骨髓CD34+细胞IL-4mRNA和IL-4蛋白表达的影晌

目的:研究IL-4mRNA和IL-4蛋白在哮喘大鼠CD34+细胞中的转录表达及孟鲁司特(montelukast,MK)对其表达的影响.方法:将SD大鼠随机分为3组:哮喘组、MK组和正常对照组.用卵白蛋白制备大鼠哮喘模型.应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定血浆中IL一4和γ-干扰素(IFN-γ)浓度;用MinjMACS磁珠分选系统分离骨髓CD34+细胞;采用sYBR GREEN I荧光实时定量PcR法测定CD34+细胞中IL-4 mJRNA的相对表达量.采用免疫组化技术测定CD34+细胞中IL-4蛋白的表达量.结果:哮喘组骨髓CD34+细胞中IL-4mR NA和IL-4蛋白的表达量高于其它各组(P＜0.01);哮喘组除了IFN-γ水平低外,IL-4浓度和嗜酸性粒细胞(Eos)绝对值都是三组中最高的(P＜0.01);除哮喘组外,其余组的各项指标相近(P＞0.05).IL-4 mRNA表达量与IL-4浓度、Eos绝对值呈正相关(P＜0.01),与IFN-γ浓度呈负相关(P＜0.01).结论:哮喘大鼠骨髓CD34+细胞中IL-4mRNA的表达增强;孟鲁司特可以下调IL-4mRNA的表达.可能成为其抑制哮喘气道炎症形成的重要机制之一.     

原发性肝癌切除病人术后化疗使用乌司他丁的效果观察

目的探讨原发性肝癌病人术后化疗使用乌司他丁对肝功能及机体免疫功能的影响。方法选择肝癌病人术后化疗患者29例，分为治疗组（n=15）和对照组（n=14），治疗组在化疗时连续使用乌司他丁7天，20万u／bid，检测和分析化疗前、后不同时期肝功能和免疫机能的变化。结果化疗4天后ALT、AST、TBIL明显升高（P〈0．05），乌司他丁治疗组ALT、AST、TBIL明显低于对照组（P〈0．01）；治疗组与对照组比较CD4^＋细胞计数，CD4^＋／CD8^＋比值有显著性差异（P〈0．05），两组患者的CD3^＋、CD4^＋细胞计数及CD4^＋／CD8^＋比值均在化疗4天后明显降低，7天后回升；但乌司他丁治疗组波动幅度较小。结论乌司他丁具有良好的肝功能保护作用，能增强化疗时的免疫功能。     

半相合供者淋巴细胞输注抗中、高危非霍奇金氏淋巴瘤的实验研究

目的阐明半相合供者淋巴细胞输注（DLI）抗中、高危非霍奇金氏淋巴瘤（NHL）的机制。方法通过预实验确定输注最佳时间及最佳浓度,并检测此条件下加入去CD8^＋T细胞和去CD4^＋T细胞半相合DLs培养后细胞的凋亡率及培养液中白细胞介素-2（IL-2）的浓度。培果在最佳输注时间（培养后24小时）、最佳浓度（2．5×10^5／ml）下加入去CD8^＋T细胞半相合DLs进行培养,淋巴瘤细胞凋亡率（17．6±2．5）％与对照组（4．6±1．2）％及加入去CD4^＋T细胞半相合DLs（5．2±1．6）％相比较,有显著性差异,而且加入去CD4^＋T细胞半相合DLs的培养液中IL-2浓度显著高于加入去CD4^＋T细胞者和对照组。结论CD4^＋T细胞在移植物抗淋巴瘤效应中可能起着比CD8^＋T细胞更重要的作用,在临床使用中,选择性去除CD4^＋T细胞,可减少或减轻移植物抗宿主病（CVHD）,并且不影响移植物抗淋巴瘤效应。IL-2在半相合DIs发挥移植物抗淋巴瘤效应过程中可能起着重要的作用。     

四君子汤对衰老大鼠胃黏膜CD4+T细胞的影响

目的：探讨四君子汤对D-半乳糖致衰大鼠胃黏膜内CD4＋T细胞的数量变化,为四君子汤对衰老大鼠胃黏膜免疫功能的恢复提供形态学依据。方法：雄性wistar大鼠30只,随机分对照组、模型组和实验组,实验组和模型组用D-半乳糖颈部皮下注射,实验组同时灌服四君子汤,对照组、模型组给予等量的生理盐水灌胃,持续42天,取胃窦,用免疫组化SP法显示黏膜内CD4^＋T细胞,在生物显微镜下计数。结果：对照组CD4^＋T细胞数为128±9.5,模型组CD4^＋T细胞数为38±6.4,与对照组相比,明显减少,两者比较有显著差异（P〈0.001）;实验组CD4^＋T细胞数为121±10.4,与对照组比较差异不明显（P〉0.05）,与模型组比较有明显差异（P〈0.001）。结论：四君子汤可以提高衰老大鼠胃黏膜内CD4＋T细胞数,具有延缓胃黏膜免疫衰老作用。     

贲门癌患者外周血Th1/Th2细胞因子检测的临床意义

检测贲门癌患者外周血CD3^＋T细胞分泌细胞因子的水平变化，分析Th1和Th2细胞的细胞因子免疫活动，为肿瘤的免疫治疗提供实验依据,采用刺激物刺激细胞，增加细胞内细胞因子的表达，再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体，特异性抗原抗体结合，最后应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平．用酶联免疫吸附法（ELISA）检测相应的细胞因子的方法进行研究．结果：贲门癌患者Th1型细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL2）、白细胞介素-12（IL-12）表达水平较正常对照组显著降低，Th2型细胞因子白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-10（IL-10）表达水平较正常对照组升高，差异有统计学意义．肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达水平较正常对照组升高，差异有显著性．贲门癌患者体内Th2型细胞因子模式占优势状态，上述结果可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸，从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一．     

急慢性乙醇中毒对大鼠心脏的影响

目的：探讨急慢性乙醇中毒对大鼠心脏的影响机制．方法：雄性健康SD大鼠,随机分为急性和慢性对照组、急性和慢性乙醇中毒组,每组8只．酶法和比色法检测血清和心肌组织谷草转氨酶（AST）、肌酸磷酸激酶（CPK）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、Ca^2＋-Mg^2＋-ATPase和Na^2＋-K^＋-ATPase的含量,观察心肌微细结构的改变．结果：与对照组相比：急、慢性乙醇中毒＋组心肌MDA、AST、CPK和血清AST、CPK含量升高（P〈0．05,P〈0．01）,SOD含量减少（P〈0．05,P〈0．01）,Na^2＋-K^＋-ATPase和Ca^2＋-Mg^＋-ATPase活性降低（P〈0．05,P〈0．01）．心肌组织HE染色显示,乙醇中毒组大鼠心肌细胞肿胀、细胞界限模糊不清,慢性组尤为明显．结论：急慢性乙醇中毒通过对大鼠心肌酶和氧自由基的影响而对心脏产生抑制作用．     

空间学习记忆训练对大鼠海马 Caveolin-1 蛋白表达的影响

探讨空间学习记忆训练后大鼠海马Caveolin-1（Cav-1）蛋白表达的变化。采用Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习记忆能力,WesternBlot方法检测大鼠海马Cav-1蛋白表达的变化。结果显示：水迷宫实验中,与青年训练组比,老年训练组大鼠的逃避潜伏期明显延长（P〈0．05,P〈0．01）,穿台次数明显减少（P〈0．05）,在原平台象限的停留时间明显缩短沪〈0．05）。WesternBlot检测表明,与青年和老年对照组比,青年和老年水迷宫训练组大鼠海马Cav-1蛋白表达显著增加（P〈0．05）;与青年对照组比,老年对照组大鼠海马Cav-1蛋白表达显著升高（P〈0．01）;与青年训练组比,老年训练组大鼠海马Cav-1蛋白表达显著升高（P〈0．01）。结果提示Cav-1蛋白可能参与了空间学习记忆过程。     

MCM4在宫颈癌中的表达及其意义

目的探讨微染色体维持蛋白4（MCM4）在子宫颈癌中的表达及与临床病理因素之间的关系．方法采用免疫组织化学法检测50例宫颈癌组织,20例宫颈内皮瘤病变组织CINⅠ、20例CINⅡ-Ⅲ、20例正常宫颈组织的表达．结果正常宫颈,宫颈内皮瘤病变组织CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ及宫颈癌中MCM4阳性表达率差异有显著性（χ^2=45．588,P〈0．05）．正常宫颈、宫颈内皮瘤病变组织CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ及宫颈鳞癌组织四组间MCM4的阳性表达程度差异有显著性（Hc=36．655,P〈0．05）,在不同分化程度的宫颈癌中,MCM4的表达强度的差异有显著性（χ^2=10．359,P〈0．05）;在不同临床分期的宫颈癌中,在淋巴结有转移与无转移组之间,MCM4的表达强度差异有显著性（χ^2=5．748,P〈0．01）;MCM4的阳性表达率与年龄分组和临床分期进展无关（χ^2=1．666,P〉0．05;χ^2=0．076,P〉0．05）．结论①MCM4的表达与宫颈癌的发生发展有关;②检测MCM4可作为判定宫颈癌恶性程度、评估其侵袭性及转移性的分子生物学指标,其对早期宫颈癌的诊断及宫颈癌的预后判定可能具有重要的参考价值．     

肺内细菌感染患者血清及肺泡灌洗液白介素-8、白介素-6、肿瘤坏死因子α检测及意义

探讨肺内细菌感染患者血清及肺泡灌洗液（BALF）中白介素-8（IL-8）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNFα）与炎症的相关性及在炎症反应中的作用及意义．血清及BALF中的IL-8及IL6用ELISA法检测、TNFα用RIA法检测，计算BALF中的中性粒细胞（PMN）及肺泡巨噬细胞（AMs）数量．结果：感染组治疗前血清及BALF中IL-8、IL-6、TNFα，BALF中的细胞总数、PMN，AMs比感染组治疗后、哮喘组及对照组明显增高（P〈0．01）．革兰阴性菌（G菌）感染者BALF中IL-8、IL-6，TBFα比革兰阳性菌（G＋菌）感染者高（P〈0．01）．感染组BALF中的IL-8含量与PMN、AMs呈显著正相关（r=0．8671，r=0．6894，P〈0．01）．感染组BALF中的IL-6、TNFα含量与AMs呈显著正相关（r=0．8194，r=0．7891，P〈0．01）．结论：体内的IL-8、IL—6、TNFα参与肺内细菌感染的炎症反应，检测血清及BALF中的IL-8、IL-6、TNFα对评价肺内细菌感染的病情、病因诊断、估计预后有一定意义．     

原发性痛经患者外周血细胞因子和PGF2α相关性研究

目的：通过原发性痛经病人外周血细胞因子和PGF2α改变,探讨其发病机制。方法：临床随机病例对照研究。选取原发性痛经患者64例,平均年龄22．3±7．1岁,正常对照组健康女性60例,平均年龄21．5±5．4岁,用酶联免疫吸附实验（EUSA）法测定经期外周血PGF2α浓度和白细胞介素-4（IL-4）,IL-10,和INF-γ水平。结果：二组经前和经中PGF2α水平均显著增高（正常对照组经前45．46±11．48pg／ml,痛经组经前51．31±15．88pg／ml）,但原发性痛经组病人经期PGF2α（182．66±68．67pg／ml）显著高于正常对照组（117．59±38．55pg／ml）（P〈0．01）;痛经组IL10经中显著低于正常对照组（8．53±1．33与13．14±1．41pg／ml）（P〈0．01）;病经组IFN-γ IL10经中显著增高（16．49±4．63与9．12±1．55pg／ml）（P〈0．01）。结论：原发性痛经发病机制与免疫功能、PGF。分泌量有关。     

大鼠哮喘模型中嗜酸性粒细胞上前列腺素D2受体改变研究

目的：研究大鼠哮喘模型中外周血嗜酸性粒细胞（EOS）上前列腺素D2（PGD2）受体改变,了解其对EOS的调控作用。方法：动物模型复制：20只雄性SD清洁级大鼠,随机分2组（A组：卵白蛋白（OVA）激发组,B组：应用生理盐水雾化吸入组,为正常对照组）,雾化诱喘。测定外周血和肺泡灌洗液（BALF）的EOS,并用放射配体分析其外周血EOS上的PGD2受体。结果：B组外周血和BALF的EOS计数较正常组显著增加,（外周血0.48±0.01和0.12±0.03（×10^9/L）,BALF：1.21±0.47和0.39±0.24（×10^7/L））;外周血EOS上CRTH2受体结合容量和总结合比正常对照组和增加（fmol/10^6细胞）（CRTH 2分别为：313.58±86.17和121.32±69.88;DP总结合分别为449.19±121.49和298.85±79.64）（P〈0.01）,DP1无显著性差异（A组180.72±47.44和B组198.68±87.22）（P〉0.05）。结论：在大鼠哮喘模型中外周血和BALF中EOS绝对值增高,其表面DP总结合显著增加,主要与CRTH2受体（DP2）显著增加有关,DP1受体结合容量无显著改变,CRTH2结合容量增加可能与哮喘发病机制有关。     

RNA干扰T细胞mTOR表达后诱导T细胞分化对小肠移植耐受的影响

目的:探讨RNA干扰T细胞mTOR表达后诱导T细胞分化对小肠移植免疫耐受的影响。方法:通过shRNA干扰T细胞mTOR表达后,诱导T细胞向Foxp3+Tregs细胞分化。对60只雄性SD大鼠施行30次异位节段小肠移植,随机分为A组(mTOR-shRNA转染组)、B组(mTOR抑制剂RAD001干预)和C组(移植对照组、注射生理盐水)。观察小肠移植后受体大鼠的体重变化、生存时间及移植小肠病理切片评估排斥反应程度。结果:构建的mTOR-shRNA质粒表达载体在体外能有效地抑制大鼠骨髓细胞mTOR基因mRNA和蛋白的表达。RNA干扰大鼠T细胞mTOR基因可调节T细胞的定向分化,Tregs细胞增多,而Th17细胞分化减少。抑制mTOR基因可诱导大鼠异位小肠移植的免疫耐受,减轻受体抗移植物的排斥反应,显著延长移植物的存活时间。结论:RNA干扰T细胞mTOR表达后诱导T细胞分化对小肠移植耐受的研究为mTOR抑制剂(RAD001)在移植后的临床应用提供理论和实验依据。     

不同方法剥除卵巢良性畸胎瘤对免疫功能的影响

目的：探讨腹腔镜与开腹手术治疗卵巢良性畸胎瘤患者对其机体免疫功能造成的影响。方法：研究组卵巢良性畸胎瘤患者给予腹腔镜手术剥除治疗;对照组卵巢良性畸胎瘤患者给予传统开腹手术剥除治疗。观察并记录两组患者治疗前后机体中IL-6（白细胞介素）与T淋巴细胞亚群（CD4／CD8）的含量,并进行统计学分析。结果：研究组与对照组患者治疗前IL-6、CD4／CD8检测结果无明显差异,且P〉0．05,两组患者对比结果无统计学意义;研究组与对照组患者手术后1d与手术后4d IL-6、CD4／CD8检测结果有明显差异,且研究组患者术后4d基本恢复术前水平,P〈0．05,两组患者对比结果有统计学意义。结论：使用腹腔镜治疗卵巢良性畸胎瘤对患者造成的机体免疫功能影响较传统开腹手术小,有利于患者术后恢复机体健康以及预防各类并发症,值得临床推广应用。     

Smad4基因在大肠癌中的表达及意义

目的：探讨Smad4基因在大肠癌中的表达及其与肿瘤分化程度或远处转移的关系。方法：利用免疫组织化学S～P法检测52例大肠癌组织、19例相应的癌旁正常组织中Smad4的表达。结果：Smad4在大肠癌原发灶中的阳性表达率为63．5％（33／52）,与癌旁正常组织中的阳性表达率89．5％（17／19）相比,Smad4阳性表达水平显著降低,差别有显著性（P〈0．05）;Smad4与肿瘤细胞分化程度无关（P〉0．05）,但与淋巴结转移显著相关（P〈0．05）。结论：Smad4的低表达可能是大肠癌发生过程的晚期事件,并可能通过直接或间接的作用促进大肠癌的淋巴结转移。     

Rock抑制剂-Fasudil对EAE外周免疫的调节作用

目的探讨Rock抑制剂Fasudil对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）发病起始环节的外周免疫调节机制。方法将雌性C57BL/6小鼠分为CFA组、EAE组和Fasudil组。Fasudil组动物免疫后第7 d腹腔给予Fasudi（l50mg/kg.d）,连续给药14 d。免疫后隔天观察各组小鼠临床评分和体质量变化。在免疫后28 d处死动物,取脊髓进行HE染色和髓鞘染色,制备脾脏单个核淋巴细胞（MNC）,测定细胞增殖和细胞因子IL-4,IL-10,IL-1β,IFN-γ的含量,流式细胞术观察CD4,CD25调节性T细胞的比例,部分脾脏组织和MNC涂片行免疫组化荧光染色观察Rock的表达。结果Fasudil在EAE外周免疫组织和细胞通过下调Rock的表达,抑制Rock的激活,明显改善EAE的临床症状评分（P〈0.05）;减轻EAE外周炎性细胞向中枢的浸润,缓解神经髓鞘的脱失;经Fasudil干预可以下调EAE外周特异性MOG35-55反应性T淋巴细胞增殖能力,下调炎性细胞因子IFN-γ和IL-1β水平,升高保护性细胞因子IL-10水平,促进CD4,CD25调节性T细胞比例增加。结论 Rho/Rock信号通路的激活在EAE的发病中起着重要作用,应用Rock抑制剂--Fasudil抑制EAE免疫病理过程中外周免疫细胞激活这一起始重要环节,减少炎性细胞的中枢浸润,缓解EAE的临床症状。     

刺五加对甲醛致运动大鼠心肌氧化损伤的保护作用实验研究

目的：通过实验观察甲醛对运动大鼠心肌组织抗氧化系统的影响及服用刺五加后的作用,探讨甲醛对运动大鼠的心肌组织毒性及刺五加的保护作用。方法：采用人为模拟不同程度甲醛染毒环境进行动式染毒,甲醛剂量分别为0.8 mg/m3,2.4 mg/m3。每天染毒30 min,每周6次,连续4周,刺五加的灌胃剂量为104.17 mg/kg,测定运动大鼠心肌组织的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）的活力和丙二醛（MDA）的含量。结果：染毒组与对照组相比,2.4 mg/m3剂量染毒运动组大鼠心肌组织 CAT、GSH-PX、SOD活性明显低于对照组（P〈0.01）,MDA含量明显高于对照组（P〈0.01）。服药染毒运动组与染毒运动组相比,0.8mg/m3剂量染毒服药组大鼠心肌组织CAT、GSH-PX、SOD活性明显高于染毒运动组（P〈0.01）,MDA含量明显低于染毒运动组（P〈0.01）。结论：甲醛可以降低染毒大鼠心肌组织抗氧化酶的活性,造成心肌组织氧化性损伤,而灌服中药刺五加可以有效缓解其毒性。     

益肾活血平喘合剂对哮喘大鼠气道TGFβ1表达的影响

目的：探讨益肾活血平喘合剂对哮喘大鼠气道TGFβ1表达的影响。方法：健康雌性SD大鼠60只。随机分为4组,即正常组、模型组、地塞米松阳性对照组、益肾活血平喘合剂组,每组15只大鼠。除正常组外,其余3组均利用哮喘模型。各组于造模后14d开始每天给药及雾化吸入。造模后28d处死动物,取同一部位肺叶,包埋,切片,HE染色及免疫组化检测气道TGFβ1的表达。结果：益肾活血平喘合剂组气道TGFβ1的表达明显少于模型组（P〈0．01）及阳性对照组（P〈0．05）。结论：益肾活血平喘合剂通过抑制气道TGFβ1的表达,减轻哮喘气道炎症及重塑的发生。     

血清IL-6和NT-proBNP在慢性心衰患者中的临床意义分析

目的 探讨血清IL-6和NT-proBNP在慢性心力衰竭患者中的临床诊断价值.方法 选择80例慢性心力衰竭患者为CHF组,60例健康人群作为对照组.采用双抗体夹心免疫法检测两组人群的血清IL-6和NT-proBNP浓度,并对检测结果进行统计学分析.结果 CHF组患者的血清IL-6和NT-proBNP浓度均明显高于对照组,且随心衰严重程度的加重而增高,两组间差异有统计学意义（P＜0.01）.冠心病组IL-6浓度明显高于其他原发病因组,组间差异有统计学意义（P＜0.01）,CHF患者不同原发病因组NT-proBNP浓度差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 IL-6和NT-proBNP参数均与CHF的发生及严重程度密切相关,联合检测可用于对CHF的早期诊断.     

氟伐他汀对不稳定型心绞痛患者血清白介素-18和肿瘤坏死因子α干预的研究

目的研究氟伐他汀对不稳定型心绞痛患者血清白介素-18（IL-18）和肿瘤坏死因子α（TNFα）的影响。方法选择2006年9月至2007年7月79例不稳定型心绞痛患者,入院后随机分为2组：氟伐他汀干预组42例：常规药物治疗基础上加用氟伐他汀40mg／d;对照组37例：常规药物治疗。分别于药物治疗前、药物治疗后2周采集静脉血,测定血清IL-18和TNFα的浓度。结果药物治疗后,对照组（P〈0．05）及氟伐他汀干预组（P〈0．01）血清IL-18和TNF＆浓度均明显降低;氟伐他汀干预组血清IL-18（P〈0．01）和TNFα（P〈0．01）浓度明显低于同期对照组。结论氟伐他汀可明显降低不稳定型心绞痛患者血清IL-18和TNFα浓度。