对酵母细胞固定化实验的几点思考

"酵母细胞的固定化"实验的教学目标是让学生动手对酵母细胞进行固定化,并围绕固定好的酵母细胞(凝胶珠)的形态和颜色来理解固定化过程的操作要领。该实验看似简单,但如何在短短45min内顺利完成此实验并达到最终目的,并非轻而易举之事。需要对该实验进行一些改进。1实验目标的定位上服务于本专题大目标酵母细胞的固定化实验只是要求固定化酵母细胞,但是为什么要求固定化酵母细胞,结合专题四"酶的研究与应用",可认为制备固定化酵母细胞的目的就     

与酶有关的三个实验分析

正一、验证酶的专一性(1)方案1:用同种酶催化两种不同物质实验组:反应物+相应酶溶液→反应物被分解;对照组:另一反应物+等量相同酶溶液→反应物不被分解。(2)方案2:用两种不同酶催化同一物质实验组:反应物+相应酶溶液→反应物被分解;对照组:相同反应物+等量另一种酶溶液→反应物不被分解。具体的实验方案如下:     

酸雨及几种常见离子对叶生红酵母生长的影响

针对酸雨及Cl1- 、SO32 - 、Ba2 +、Pb2 +、Mn2 +等离子分别对叶生红酵母 (Pinkyeasts)生长的影响。利用含不同浓度各溶液对红酵母的生长进行干扰培养 ,观察其生长情况。结果显示 :酸雨及各不同离子对红酵母的生长有不同程度的影响 ,酸雨酸性越强 (pH越小 )对红酵母生长影响越显著 ,重金属离子对红酵母生长比较显著 ,而Cl1- 、SO32 - 影响较弱一些     

一株高生物量酵母菌株的鉴定

从土壤中分离到一株高生物量酵母菌株,经形态特征及12项生理生化特性的检测。以N．J．W．Kreger-van Rij和J．A．Barnett等的酵母分类系统为依据进行了分类鉴定,初步鉴定为丝孢酵母属（Trichosporon）个种。     

猪肺脏巨噬细胞的分离培养

提取分离猪肺泡巨噬细胞(PAM)、猪肺血管巨噬细胞(PIM)、猪肺间质巨噬细胞(IM)三种细胞并进行体外培养,采用免疫组化和流式细胞术进行细胞的异质性研究。无菌条件下通过支气管肺泡灌洗获取PAM,右心室插管经心脏行肺血管原位灌注的方法分离得到PIM,肺组织机械处理结合酶消化法(胶原酶IA)分离IM。显微镜下观察三种细胞的形态上的不同;免疫组化和流式细胞术检测细胞表型。三种巨噬细胞形态有明显的不同,PAM较大,表面粗糙,PIM和IM较小,并且细胞光滑;PAM细胞大多为CD163阳性,IM和PIM则CD86阳性较多。PAM、PIM、IM在形态和表型上存在异质性。     

不同组织来源的凡纳滨对虾NAGase的性质比较

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-Acetyl-β-D-glucosaminidase,简称NAGase,EC.3.2.1.52)与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的周期性蜕壳生长密切相关.以成虾外壳膜与肝胰腺为提酶材料,研究比较不同组织来源的NAGase活力与基本性质的异同.结果表明:不同组织来源的酶活力有差异,外壳膜NAGase活力为72 U/mg蛋白,肝胰腺的酶为60 U/mg蛋白;两种组织来源的NAGase酶促反应最适pH均为5.5,最适温度分别为30℃与37℃.并进一步比较不同部位来源酶的动力学参数(Km、Vm)、酶促反应活化能(Ea)及对Cu2 、Zn2 和Hg2 的敏感性等,阐明外壳膜与肝胰腺的NAGase酶学差异.     

酶法水解动物蛋白工艺研究

用三种不同蛋白酶(胰蛋白酶和酸性蛋白酶)对猪肉在不同条件下进行酶解，利用甲醛滴定法对水解效果进行了对比。采用L18(37)确定两种蛋白酶水解猪肉的最佳工艺参数。     

海藻酸钠寡糖抗氧化活性的研究

海藻酸钠是一种来源广泛、具有多种生物活性的海洋多糖。本实验通过酸解法制备海藻酸钠寡糖(AOS),在检测其体外自由基清除能力与抗氧化能力的基础上,建立海藻酸钠寡糖预保护与过氧化氢氧化损伤细胞模型,进而从细胞形态与活性、胞内活性氧(ROS)清除率、关键氧化还原酶酶活等不同水平进行检测,结果表明海藻酸钠寡糖对小胶质细胞有保护作用,能够有效的清除胞内活性氧水平,维持细胞正常形态,提高超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的酶活,一定程度缓解了过氧化氢对细胞的氧化损伤。这为进一步研究海藻酸钠寡糖在由小胶质细胞应激引起的神经退行性疾病中的应用提供了参考。     

壳聚糖微球制备及其固定化β-甘露聚糖酶研究

以脱乙酰度91%的壳聚糖为材料,采用两种不同的方法制备壳聚糖微球,利用扫描电子显微镜观察了壳聚糖微球形态与结构,筛选出具有较好形态及表面结构的壳聚糖微球固定化β-甘露聚糖酶,以酶活回收率为参考指标确定了固定化该酶的最佳条件。结果表明:当采用透平油为分散介质,壳聚糖浓度2.5%、戊二醛浓度为0.42%时,固定化酶的酶活回收率最高,达到63%。     

酵母产物对断奶仔猪肠道形态、屏障功能、细胞因子表达和抗氧化系统的影响（英文）

目的:验证添加酵母混合物(酵母培养物、酵母细胞壁水解物和酵母提取物)对断奶仔猪生长性能、腹泻发生率、肠道形态、屏障功能、免疫反应和抗氧化系统的影响。创新点:考察酵母培养物、酵母细胞壁水解物和酵母提取物混合物对断奶仔猪的协同作用。方法:90头21日龄断奶仔猪随机分为3组,分别饲喂基础日粮(对照组),含1.2 g/kg的酵母混合物(YP组)及含20 mg/kg硫酸粘杆菌素日粮(CSE组)14天,比较三组间各项指标差异。结论:结果表明,三组之间平均日采食量、平均日增重和料肉比无显著差异。YP组腹泻发生率显著高于其它两组。对照组十二指肠和空肠的绒毛高度以及十二指肠的隐窝深度显著高于YP组和CSE组。相对于对照组或CSE组,YP组十二指肠和空肠绒毛淋巴细胞数目显著增加,而回肠绒毛内淋巴细胞数目显著降低。相对于对照组,YP组空肠和回肠内白介素-10(IL-10)的分泌增加,YP和CSE也显著影响了仔猪肠道和血清中抗氧化因子;YP和CSE组血清D-乳酸浓度和二胺氧化酶活性都增强;YP组或CSE组肠道occludin和ZO-1 mR NA表达降低。综上所述,酵母混合物添加会增加断奶仔猪腹泻发生率,并对断奶仔猪肠道形态学和屏障功能具有副作用。     

两种酵母对重金属Cu2+吸附性能的比较研究

目的:探究酿酒和产朊假丝两种酵母对Cu~(2+)吸附效率的差异及其原因。方法:在最优条件下,让酿酒和产朊假丝两种酵母菌分别与同浓度的Cu~(2+)作用,作用相同时间,检测两种酵母菌吸附的Cu~(2+)浓度,最后进行数据比较、分析。结果:产阮假丝酵母较酿酒酵母对重金属Cu~(2+)具有更高的吸附效率,其原因是由于产阮假丝酵母存在更多的Cu~(2+)结合位点,以及吸附空间的互相协同作用。结论:产朊假丝酵母可作为一种潜在的吸附金属离子的生物材料。     

不同基质酵母浸膏对cAMP合成菌生长的影响

选取7种不同基质酵母浸膏配制种子培养基,设定8、10、12 g/L三个质量浓度,摇床培养cAMP合成菌,对菌落密度、种子液p H、菌体浓度(OD值)和葡萄糖比消耗率等参数进行综合分析,研究不同基质酵母浸膏种子培养基对cAMP合成菌生长的影响.结果表明:cAMP合成菌的种子培养基中酵母膏最佳质量浓度为8 g/L,以使用啤酒废酵母浸膏和蔗糖糖蜜酵母浸膏更为适宜.     

接种重组酵母乙型肝炎疫苗效果观察——滁州学院2011级学生接种乙肝疫苗的临床观察

[目的]了解大学生接种重组酵母乙肝疫苗的免疫效果,为乙型肝炎预防提供资料。[方法]以滁州学院2011级新生于入学体检时抽取静脉血,用免疫酶联方法检测乙肝表面抗原,表面抗体,中心抗原,中心抗体及核心抗体,根据结果采用卫生部北京生物制品研究所提供的重组酵母乙型肝炎疫苗,按照0、1、6程序接种共三针,于接种后12个月及毕业前抽取静脉血检测乙肝表面抗原,表面抗体,中心抗原,中心抗体及核心抗体。[结果]接种酵母乙肝疫苗后,检测乙肝表面抗体阳性率较入学前检测明显增加(χ²=2151.7,P<0.001),两者比较有显著意义。[结论]重组酵母乙肝疫苗能够提高乙型肝炎的感染预防,增加远期免疫效果,值得推广。     

模拟酸雨对朱砂叶螨几种酶的影响

为探讨朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)适应酸雨胁迫的生理生化机理，本研究运用昆虫(螨)生理生化学等学科知识，借助统计分析和生理生化分析技术等研究手段，比较了在酸雨酸度及胁迫期二因素作用下朱砂叶螨T．cinnabarmus体内几种重要的保护酶和水解酶的活性。同时，对酯酶同工酶和过氧化物同工酶进行了分析。结果表明，酸度对除羧酸酯酶(CreE)外的保护酶和磷酸酯酶都有显著影响；胁迫期对超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及碱性磷酸酯酶(AIJP)有显著性影响。二因素互作则对三种保护酶和ALP活性有显著影响。经过酶活性分析比较发现，除CarE、AIJP外，其它几种酶在朱砂叶螨T．cinnabarinus抗酸雨机制中起着重要作用。通过对酯酶同工酶和过氧化物同工酶电泳图谱和酶谱密度扫描比较发现，各个酸度处理间酯酶酶谱内都有3条谱带；而过氧化物酶谱内，除pH4．0的2条谱带极强而遮蔽另1条谱带外，其余处理间谱带均达到明显的3条。两个同工酶酶谱内的差异都主要表现在整个酶系中各个酶的相对含量不同。     

实验案例——对高中实验的思考和创新

对人教版选修1中专题4"酶的研究与利用"课题3"酵母细胞的固定化"的实验制作教学思考和设计如下: (1)提出实验目的的思路:知识要承上启下,温故而知新,所以笔者通过对直接使用酶存在哪些问题引出实验的目的. 设计实验目的:提问为什么要将酶和细胞进行固化,让学生说出直接使用酶制剂存在的缺陷,明确动手实验制作固定化酵母的原因所在,体会固定化细胞的制作和固定化酶的作用.     

用于制备固定化酵母细胞的装置

“酵母细胞的固定化”是人教版高中生物学选修教材《生物技术实践》专题4“酶的研究与应用”中的课题。该课题实验流程清晰,实验仪器、材料、药品等课前容易准备,可操作性强,但是如何才能制备大小几乎一致的固定化酵母细胞呢？教材中在制备固定化酵母细胞时要求“以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl 2溶液中”。在实际操作中,学生对“恒定的速度”很难把握,结果导致固定化酵母细胞形态大小不一。笔者利用废弃材料设计出用“输液法”制备酵母细胞的固定化实验操作装置（图1）。     

2，4-二羟基苯乙酮合水杨酰肼化合物的生物活性及对抗氧化酶活性的影响

用2,4-二羟基苯乙酮合水杨酰肼配体系列化合物来处理水稻幼苗,分析它们对细胞活性的影响及对抗氧化酶系的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性的影响.生物活性测试的结果表明,部分化合物在浓度为0.1～100 ppm时能促进细胞的活性;SOD酶和POD酶活力测试的结果表明,部分化合物在浓度为0.1～100 ppm时对两种氧化酶的活性有不同程度的促进作用.这说明化合物对水稻幼苗生长的影响可能是通过对水稻幼苗SOD酶和POD酶的活力影响的结果.     

酵母酶解液抗氧化性的初步研究

为筛选天然抗氧化剂,以酵母抽提物为原料,用中性蛋白酶水解酵母蛋白,以DPPH自由基清除率为指标考察酶解液的抗氧化性,得到酶解的最佳条件为:酵母添加量2.0%,酶添加量4%,温度55℃,pH值6.5,此时DPPH自由基清除率达到84.7%,表现出较强的抗氧化性.此外,将酶解液应用于食用油保鲜,一周后测油脂过氧化值和酸价,结果表明:酵母酶解液能延缓油脂的氧化酸败作用,效果与抗坏血酸相当.     

对高中《生物》教材的一点商榷

人教版高中《生物)教科书《试验修订本·必修》第一册第50页,图3-3酶的活性受温度影响的示意图,值得商榷。 温度对于酶的作用有两种不同的影响。 (1)和一般化学反应相同,酶反应在一定的温度范围内,其速度随温度升高而加快。根据一般经验,温度每升高10℃,反应速度约增加1倍。 (2)绝大多数酶是蛋白质,遇热易变性失去活性,绝大多数酶在60℃以上即失去活性。     

细胞质DNA

自从 2 0世纪 6 0年代在衣藻的叶绿体中发现有DNA ,在鸡胚肝细胞线粒体中也发现有DNA以后 ,又陆续从各种生物细胞的叶绿体、线粒体和质粒中分离出DNA ,并发现其具有遗传物质的功能 ,人们称其为细胞质DNA。1　细胞质DNA的形态除在某些低等真核生物中有少量线粒体DNA是线状外 ,其它线粒体DNA (mtDNA)和叶绿体DNA(ctDNA)均呈双链环状。细胞质DNA的大小随生物种类不同而不同。动物细胞线粒体基因组比较小 ,而酵母线粒体DNA约是动物DNA的 5倍长 ,植物线粒体DNA的大小又约是酵母线粒体DNA的 5倍长。与核DNA相比 ,线粒体DNA所…