荧光光谱研究CBAP与人血清白蛋白的相互作用

在模拟人体生理条件下,用荧光光谱和紫外可见吸收光谱法研究了不同温度下4-(2-羧基苯偶氮)-连苯三酚(CBAP)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用.结果表明,CBAP对HSA的荧光猝灭属静态猝灭.通过288、293、298 K时的荧光猝灭,得出CBAP与HSA的结合常数K分别为1.62×106,3.97×105和3.56×105,结合位点数n=0.92(平均值).据F(o)rster非辐射能量转移理论计算出CBAP与HSA的结合距离r=1.44 nm,由热力学参数焓变和熵变,推断两者反应时氢键和范德华力可能起主要作用.运用同步荧光和三维荧光技术分析了CBAP对HSA构象的影响,表明CBAP的加入改变了HSA中酪氨酸残基和色氨酸残基的构象.     

5种维生素对卡铂与人血清白蛋白作用影响的荧光法研究

用荧光光谱法和同步荧光光谱法研究了卡铂(CBP)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用以及5种维生素对其相互作用的影响.结果表明,在303～315 K的温度范围内,CBP能使HSA的内源荧光发生静态猝灭,并对蛋白质的构象产生影响,二者通过静电作用相互结合形成1:1的复合物;5种维生素的介入进一步加强了卡铂与HSA的荧光静态猝灭作用,同时与药物和蛋白的结合形成竞争,降低了药物与蛋白间的结合常数,从而降低了结合物的稳定性,减少了游离型药物含量,造成药效减弱.     

pH对黄芩苷与牛血清白蛋白相互作用的影响

运用荧光光谱法研究pH对黄芩苷与牛血清白蛋白（BSA）相互作用的影响,结果表明：黄芩苷浓度的增加引起BSA在345am处荧光有规律地猝灭．荧光猝灭光谱及Stem—Volme方程分析发现,在pH为2．5、4．5和7．4体系中均为静态猝灭,且两者猝灭常数随pH增加而增加;Lineweaver—Burk双倒数方程计算pH7．4、温度为290K和310K下,黄芩苷和BSA的结合常数K分别为：K_（290）K=1．2894×10。L·mol^（-1）和K。。：1．0979×10。L·mol^（-2）由热力学参数确定黄芩苷与BSA之间的作用力类型为静电作用力．同步荧光光谱表明,黄芩苷使BSA芳香性氨基酸（Trp,Tyr）残基微环境的变化．     

人血清白蛋白与番红花红T的相互作用研究

研究了人血清白蛋白与番红花红T的结合反应特征。荧光光谱显示番红花红T对人血清白蛋白的荧光有猝灭作用。用Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数函数处理实验数据。得到一定温度下的动态猝灭常数和静态猝灭结合常数、反应的热力学参数和结合位点数。根据Fǒster能量转移原理计算了番红花红T与人血清白蛋白的结合距离r=2.80nm。     

地美硝唑与牛血清白蛋白结合热力学特征的荧光光谱研究

采用荧光光谱和紫外可见吸收光谱法研究了地美硝唑与牛血清蛋白的结合反应,发现地美硝唑对牛血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用,该猝灭过程主要为静态猝灭过程。从荧光光谱数据,由Stern—Volmer方程和Lineweaver—Burk方程分析并处理实验数据得到了23℃时结合反应的结合常数K=1．03×10^4L／mol,结合位点数为0．70,结合反应的标准焓变、标准熵变、和标准吉布斯自由能变分别为～63．48kJ／mol,-96．22J／K,-35．00kJ／mol。     

氢氯噻嗪与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱法研究了氢氯噻嗪(Hydrochlorothiazide,HCT)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。实验结果表明,HCT与BSA作用的猝灭常数随着温度的升高而降低,HCT可以有规律地使BSA内源荧光猝灭,其猝灭机理可认为是HCT与BSA形成复合物的静态猝灭。通过测定和计算不同温度下该结合反应的结合常数和结合位点数,并根据热力学方程求得了结合反应的ΔG、ΔH和ΔS等热力学参数,根据所得结果推断出HCT与BSA间的主要作用力类型是疏水作用力。同时,从分子荧光寿命进一步证明HCT与BSA的荧光猝灭机制为静态猝灭。     

荧光光谱法研究盐酸青藤碱与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱技术研究了在pH7.40的Tris-HC1缓冲介质中盐酸青藤碱与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.实验发现:盐酸青藤碱对BSA的荧光具有较强的猝灭作用,根据不同温度下盐酸青藤碱猝灭BSA荧光过程的Stem-Volmer方程,得到盐酸青藤碱对BSA的荧光猝灭属于静态猝灭过程:根据Ftirster非辐射能量转移理论计算出盐酸青藤碱与BSA间的结合距离r=2.22 nm:根据结合过程的热力学数据表明二者主要靠氢键和范德华力结合;另外采用同步荧光光谱技术探讨了盐酸青藤碱对BSA构象的影响.     

槲皮素与牛血清白蛋白和β-环糊精的相互作用

用荧光光谱法研究了模拟生理环境pH=7.40的条件下槲皮素与牛血清白蛋白和β-环糊精的相互作用.利用Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk方程对槲皮素猝灭牛血清白蛋白的荧光强度变化进行拟合,确定其荧光猝灭机理.利用修正的Benesi-Hildebrand方程对槲皮素的荧光强度随β-环糊精浓度的变化进行拟合,确定包合物的稳定常数和包合比.研究结果表明:槲皮素对牛血清白蛋白的荧光猝灭为静态猝灭过程.310K时,槲皮素与β-环糊精形成的包合物的稳定常数为66.7L·mol-1,包合比为1∶1.     

离子液体双水相中单宁酸与胰蛋白酶的相互作用研究

运用荧光光谱和紫外光谱,研究在离子液体双水相体系中单宁酸与胰蛋白酶的相互作用.结果表明,TA对TP产生荧光猝灭作用,且属于静态猝灭过程.计算得到在298 K和310 K下的结合常数分别为1.771×105L·mol-1和1.216×105 L·mol-1,结合位点数分别为1.3和1.2.热力学参数表明TA与TP之间的相...     

丹参酮ⅡA-磺酸钠与牛血清蛋白的相互作用

在pH=7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,利用紫外可见吸收光谱法和荧光光谱法研究了中药提取物小分子丹参酮ⅡA-磺酸钠与牛血清蛋白的相互结合作用与机制,考察了温度对二者结合常数的影响。结果表明,在28~5.8、298、310 K时,紫外光谱法得到丹参酮ⅡA-磺酸钠与牛血清蛋白的结合常数分别2.18×10~5、1.7~5×10~5、1.35×10~5L·mol~(-1),荧光光谱法得到二者的结合常数分别为1.71×10~5、1.69×10~5、1.22×10~5L·mol~(-1),可见两种光谱法的结果是一致的,结合常数均随着温度的升高而减小。并计算了丹参酮ⅡA-磺酸钠与牛血清蛋白作用过程的ΔG、ΔH、ΔS,推测丹参酮ⅡA-磺酸钠与牛血清蛋白之间的作用力为静电引力。     

N-十六烷基-羟乙基-二甲基溴化铵与牛血清白蛋白的结合作用

用荧光光谱法研究了298K时Tris-HC l缓冲溶液（pH=7.1）中季铵盐类表面活性剂N-十六烷基-羟乙基-二甲溴化铵（CHDAB）与牛血清白蛋白（BSA）的结合作用.考察了BSA浓度对结合作用的影响,用Stern-Volmer方程探讨了CHDAB在浓度较低区域与BSA的作用机制,用位点结合模型计算了CHDAB与BSA结合反应的结合常数KA和结合位点数n,用同步荧光技术考察了CHDAB对BSA构象的影响.结果表明：CHDAB对BSA的内源荧光有猝灭作用,并导致其最大发射波长蓝移;相同温度下,BSA浓度越小,其Stern-Volmer猝灭常数Ksv越大,CHDAB对BSA的猝灭作用越强,同时其结合常数也越大,结合越强;同步荧光光谱表明CHDAB对BSA构象产生了一定影响.     

荧光光谱法研究黄豆苷原与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱法在pH7.4的PBS中研究了黄豆苷原（Daidzein,Da）与牛血清白蛋白（bovine serum albu-min,BSA）的相互作用.结果表明Da可静态猝灭BSA的内源荧光,温度升高时受动态猝灭的影响变得明显.二者之间的结合位点数约为1.5,315 K、310 K,300 K和290 K时的表观结合常数分别为5.44×104L.mol-1,5.70×104L.mol-1,5.29×104L.mol-1和5.69×104L.mol-1.焓变为0.2969 kJ.mol-1,熵变为91.78为J.mol-1.K-1,各温度下的自由能变均小于零,热力学参数表明二者之间主要靠静电力发生作用,熵变对反应过程具有较大贡献,且反应是自发过程.同步荧光光谱表明Da的加入改变了BSA的构像,使色氨酸残基的微环境亲水性增强.本研究对于阐明Da与蛋白的相互作用机理具有借鉴意义.     

荧光法研究司他夫定与牛血清白蛋白的结合作用

在Tris缓冲溶液（pH7．1）体系中,用荧光光谱技术研究水溶液中司他夫定与牛血清白蛋白的结合作用．结果表明,司他夫定对牛血清白蛋白内源荧光产生较强的荧光猝灭作用,根据不同温度下司他夫定对牛血清白蛋白的荧光猝灭作用,证明其为静态猝灭机制,运用位点模型计算出298K,310K时其结合常数KA（分别为1．01×10^4,4．17×10^4L·mol^-1）和结合位点数n（分别为0．99,0．93）,根据热力学参数确定其作用力以氢键或VanderWall＇s作用为主;蛋白质变性剂尿素的存在导致上述荧光猝灭效率减少;运用FSster偶极-偶极非辐射能量转移原理,计算了司他夫定与牛血清白蛋白的结合距离r为3．79nm．     

荧光光谱法研究间-硝基苯胺与牛血清白蛋白的相互作用

文章采用荧光光谱技术研究了在不同的酸度和温度条件下,间-硝基苯胺与牛血清白蛋白间的相互作用机制.采用荧光猝灭法讨论了不同pH条件下邻硝基苯胺与牛血清白蛋白间的猝灭类型,计算了不同温度和pH条件下的结合常数,并根据热力学参数确定了其主要结合作用力的类型.研究结果表明,间-硝基苯胺对牛血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用,符合静态猝灭机理,二者之间的结合作用力主要是范德华力.     

牛血清白蛋白荧光猝灭法测定药物中的头孢他美酯

[目的]应用牛血清白蛋白荧光猝灭法建立一种测定药物中头孢他美酯含量的新方法。[方法]牛血清白蛋白（BSA）具有很强的内源荧光性,而头孢他美酯溶液本身不产生荧光。当头孢他美酯与BSA结合后,会导致其荧光强度下降。BSA在λex=342nm处的荧光猝灭程度与头孢他美酯的量在一定浓度范围内呈良好的线性关系,据此建立测定药品中头孢他美酯含量的新方法。[结果]该结合物的最大发射波长为λmax=342nm,与头孢他美酯摩尔浓度在2．07×10^-6-2．58×10—5mol·L^-1范围内线性关系良好。其线性回归方程为△F=1．9684×10^7Ccp＋25．6288,相关系数r=0．9958,检出限为1．01×10^-7mol·L^-1,RSD为0．66％,加标回收率为85．0％-100．99／6。[结论]本方法操作简便、快速,用于实际样本的测定,结果满意。     

Cu（Ⅱ）与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

利用荧光光谱技术,从分子水平上研究了模拟生理条件下Cu2＋与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用机理。实验结果表明,Cu2＋使得内部疏水区域的色氨酸（Trp）等芳香环氨基酸逐步暴露出来,在荧光光谱中表现为BSA内源荧光的猝灭,猝灭机理主要为静态猝灭。Cu2＋与BSA的结合常数为8.73×104,结合比为1：1。