黄芪成分F_3新制剂的急性毒性研究

[目的]研究黄芪成分F3新制剂的急性毒性和最大耐受量.[方法]采用小鼠急性毒性试验方法和最大耐受量测定方法.[结果]小鼠腹腔注射黄芪成分F3新制剂的半数致死量(LD50)未测出,其最小耐受量为5g/kg体重.[结论]黄芪成分F3新制剂是一种毒性作用较小的、有一定开发应用前景的药物.     

ICP-AES法测定黄芪成分F3新制剂中微量元素

[目的〗测定黄芪成分F3新制剂中Fe、Mn、Cu、Zn、Cr、Se、Sr、Pb、As、Cd等微量元素 [方法]采用高压密封消化罐(PTFE),以(4+1)硝酸 高氯酸为溶样试剂,采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP AES) [结果]方法回收率为94～106%,相对标准差为4.1～7.9% [结论]黄芪成分F3新制剂含有多种重要微量元素,不含有Pb、As、Cd等有害元素     

黄芪成分F_3新制剂抗肿瘤的实验研究

[目的]研究黄芪成分F_3新制剂对荷瘤小鼠生存期及实体瘤生长抑制的影响。[方法]纯系Balb/c小鼠荷瘤后随机分组,连续用药10d,观察腹水荷瘤小鼠的生存时间;观察抑瘤率的小鼠于荷瘤第15d后处死,剥瘤称重。[结果]腹腔注射黄芪成分F_3新制剂能显著延长腹水荷瘤小鼠的生命延长率;对U_(14)、S_(180)实体瘤的抑瘤率分别达71.29％、70.97％。[结论]黄芪成分F_3新制剂对荷瘤小鼠具有显著的抑癌作用。     

As2O3对人体外宫颈癌细胞的影响

采用光镜及荧光显微镜观察、溴化二甲噻唑二苯四氮唑(MTT)还原法、流式细胞仪检测法检测As2O3对人HeLa细胞的影响.HeLa细胞经As2O3作用后,出现凋亡的形态学改变,细胞增殖受到浓度依赖性抑制,流式细胞仪检测结果显示细胞凋亡率呈浓度依赖性增高.As2O3具有诱导HeLa细胞发生凋亡的生物活性.     

As_2O_3诱导K_(562)细胞株凋亡的形态学方法研究

[目的]研究三氧化二砷对人红白血病细胞株K562凋亡作用及凋亡推测办法.[方法]姬姆萨染色,胎盘兰排染法,双苯并咪唑,碘化丙啶排斥法等.[结果]As2O3诱导12h,K562细胞开始出现凋亡.凋亡细胞随药物浓度的增加和作用时间的延长而增加.各种凋亡推测方法利弊存在差异.[结论]建议使用较有效的Hoechst33342法检测凋亡.     

砷剂对K_(562)细胞凋亡作用的基础研究

[目的]研究三氧化二砷对K562细胞凋亡的诱导.[方法]采用人红白血病细胞株K562细胞常规培养,给不同浓度的三氧化二砷,在不同的时间收获细胞,用台盼蓝排染法,DNA荧光染料Hoechst33342荧光染色法,及碘化丙啶(PI)与Hoechst33342共染计数坏死细胞的PI阳性率等方法,检测其对K562细胞的影响.[结果]三氧化二砷能够诱导K562细胞凋亡.并且呈现浓度依赖性和时间依赖性.[结论]三氧化二砷主要以诱导肿瘤细胞凋亡而表现其毒性作用.     

流式细胞仪在航海医学实验教学中的设计与应用

流式细胞仪作为一种先进的细胞定量分析检测仪器,广泛应用于航海医学专业教育与科研研究领域,并起到了关键作用。流式细胞仪实验课程通过流式细胞术原理讲解、仪器演示以及实验操作环节,帮助学员渐进学习和掌握相应内容。根据航海医学专业的教学需求,开设流式细胞仪实验课程,按照流式细胞仪的构造及原理讲解、细胞样本制备、细胞DNA含量和凋亡检测、操作演示等四方面进行教学。通过流式细胞仪实验课程教学的实施,学员整体加深了对流式细胞仪基础知识的理解和掌握,提升了动手操作能力、科研分析及解决问题的能力,为学员在日后的科研实验中利用该项技术奠定了良好的基础。     

He—Ne激光诱导HL-60细胞凋亡

探讨He—Ne激光幅照诱导肿瘤细胞凋亡而抑制肿瘤的生长。采用He—Ne激光处理HL-60细胞,流式细胞仪检测DNA含量及细胞凋亡百分率。发现在57．24J／cm^2的He—Ne激光作用下,HL-60细胞的凋亡百分率为12．83％。同时细胞周期发生改变,G1期减少,S期降低,G2期增加。结果表明在一定剂量He—Ne激光照射下,导致细胞DNA断裂,诱导HL-60细胞凋亡并抑制肿瘤细胞生长。     

EGCG对肝癌细胞株BEL-7402增殖凋亡及Stat3蛋白表达的影响

研究了没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对人肝癌细胞BEL-7402增殖凋亡及对信号转导蛋白和转录激活因子3（Stat3）蛋白及磷酸化Stat3蛋白表达的影响.应用MTT法检测不同浓度EGCG对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,用流式细胞仪分析细胞的凋亡率,用ELISA方法检测EGCG对Stat3蛋白及磷酸化的Stat3蛋白表达的影响.结果表明：EGCG有抑制肝癌细胞增殖促进凋亡的作用,并呈剂量依赖性.ELISA结果显示EGCG能降低磷酸化Stat3蛋白的表达水平.EGCG能抑制肝癌细胞的增殖促进凋亡,其机制可能有与下调磷酸化的Stat3蛋白的表达有关.     

鞣花酸对前列腺癌PC-3细胞生长和凋亡的影响

目的观察鞣花酸对前列腺癌PC-3细胞株的影响。方法：体外培养人前列腺癌PC-3细胞,加入0μg/ml、2．5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的鞣花酸作用于PC-3细胞,分别作用12小时、24小时和48小时后,应用MTr法测定各浓度组鞣花酸对PC-3细胞的生长抑制作用。应用流式细胞仪检测鞣花酸作用48小时后,PC-3细胞的周期时相变化及凋亡情况。应用免疫细胞化学检测10μg/ml鞣花酸作用24小时后,实验组与对照组细胞Caspase-3蛋白表达情况。结果：鞣花酸明显抑制PC-3细胞的生长,抑制效应呈时间依赖型和浓度依赖型,与对照组比较均有统计学意义（P〈0．05）。应用流式细胞仪检测结果显示,鞣花酸可将PC-3细胞阻滞于G1／S期,并诱导PC-3细胞凋亡。免疫细胞化学结果显示实验组Ctmpase-3蛋白表达明显升高。结论：鞣花酸对前列腺癌PC-3细胞株有明显的生长抑制和诱导凋亡作用。     

川芎嗪对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药性的逆转及P-糖蛋白表达的影响

[目的]探讨川芎嗪(TMP)对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞的耐药逆转及其对该细胞P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.[方法]MTT法测定细胞的药敏性和抗药性逆转,流式细胞术检测耐药细胞P-糖蛋白的表达.[结果]非细胞毒性剂量(320μg/m l)和低毒剂量(1 250μg/m l)的川芎嗪均能显著降低MCF-7/ADM细胞的IC50(P<0.01),逆转倍数分别为2.14和2.80倍;并使该细胞P-gp的表达率由(90.60±0.40)%分别降低至(69.10±1.65)%和(60.30±1.25)%.[结论]川芎嗪可部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性,其逆转机制与抑制该细胞P-gp的表达有关.     

MTT法测定八种中草药体外抗肺癌细胞SPC-A1活性

[目的]建立一套高效、快速的体外中草药抗肺癌活性物质筛选模型。[方法]采用MTT法,对芸香草、地榆、甘草、柴胡、莪术、蜜蒙花、半边莲和旱芹等8种中草药体外抗肺癌细胞SPC-A1的活性进行检测。分析肿瘤细胞生长曲线,观察倒置显微镜下肺癌细胞在不同阶段的生长状况。[结果]在中草药活性物质作用下细胞尽管仍然贴壁,但出现萎缩及边缘清晰化,与生长状况良好的细胞形态区别明显。浓度为1.5mg/ml的莪术乙醇浸提液（ESCC）和甘草乙醇浸提液（ESCG）对体外培养的肺癌细胞SPC-A1有较强的抑制增殖作用,抑制率分别为：52.9%和51.6%,且抑制作用随着浓度的加大而加强。[结论]MTT法筛选可作为8种中草药抗肺癌细胞的一个基本筛选模型。     

黄芪水提物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制及其降血糖作用

应用黄芪水提物与不同浓度的α-葡萄糖苷酶,不同浓度的底物PNP-glucoside进行反应,研究中药黄芪中α-葡萄糖苷酶抑制剂的抑制活性及其对正常小鼠血糖和糖耐量的影响.通过绘制酶量-反应速度曲线和双倒数曲线,确定其抑制剂类型,并对正常小鼠以40～160 mg.kg-1剂量灌胃后,观察其对血糖值和糖耐量的影响.结果表明,黄芪中α-葡萄糖苷酶抑制剂为可逆、非竞争性抑制;可降低正常小鼠血糖值,并且以80 mg.kg-1的剂量时血糖值最低,还可显著提高小鼠糖耐量.黄芪水提物中含有α-葡萄糖苷酶抑制剂成分,可用于糖尿病治疗.     

瑞香狼毒提取物作用于人肺癌细胞NCI-H446[H446]后端粒酶的定量表达

目的:通过端粒酶的数量变化来探讨瑞香狼毒提取物对肺癌细胞NCI-H446[H446]的抗肿瘤作用。方法:体外培养肺癌细胞NCI-H446[H446]细胞株,以不同浓度的瑞香狼毒提取物作用24h后,用荧光标记的方法定量检测端粒酶。结果:瑞香狼毒提取物作用人肺癌细胞提取物NCI-H446[H446]后,端粒酶的数量明显减少并呈现与剂量的正相关性。结论:瑞香狼毒提取物对肺癌细胞NCI-H446[H446]具有明显的抗肿瘤作用。     

Effects of different concentrations of antisense oligodeoxynucleotides (ASODN) on human pancreatic cancer cell line PaTu8988s

Objective: To study the effects of different concentrations of antisense oligodeoxynucleotides (ASODN) on human pancreatic cancer cell line PaTu8988s. Method: Human pancreatic cancer cell line PaTu8988s in exponential growth stage was used to study the effect of different drug concentrations on the cell line in the presence of different concentrations (0 μg/ml, 5 μg/ml, 25 μg/ml, 50 μg/ml, 10 μg/m, 200 μg/ml) of ASODN and sense oligodeoxynucleotides (SODN). Cell counts and 3-[4,5-dimethylthiazolzyl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assays were carried out. Results: The inhibitory rate on the cell line PaTu8988s was 98.73%, 95.76%, 69.49%, 33.05% and 0 for ASODM concentrations of 200 μg/ml, 100 μg/ml, 50 μg/ml, 25 μg/ml and 5 μg/ml at 48 hours. Conclusions: K-ras complementary ASODN can inhibit the growth of human pancreatic cancer cell line PaTu8988s by 30.05% to 98.73%. This is likely to contribute to the specificity of the K-ras mRNA complementary capped ASODN sequential codon. Non-specific effect and side effect of ASOND were observed for instance, the greater the concentration is, the earlier the peak of inhibitory rate is reached. In concentration, of 25 μg/ml to 100 μg/ml ASODN showed a dose-effect correlation.     

胃癌细胞SGC7901体外生长条件的优化研究

以胃癌细胞SGC7901为研究对象,用流式细胞仪和细胞总DNA分析技术讨论了不同培养基和不同保存条件对胃癌细胞体外生长的影响。     

刺五加注射液对 Hela 细胞抑制作用的实验研究

目的:探讨刺五加注射液对人宫颈癌细胞株Hela体外增殖的抑制作用。方法:采用MTT法测定了不同浓度的刺五加注射液对人宫颈癌细胞株Hela的体外抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态变化。结果:刺五加注射液浓度越高对Hela细胞抑制作用越好,作用时间越长抑制效果越强,量效关系和时效关系良好;形态学观察到细胞凋亡。结论:刺五加注射液对人宫颈癌细胞株Hela的细胞增殖有较强的抑制作用。     

穴状型和Keggin型聚氧钨酸盐结构特征和抗HIV-1、抗癌活性

目的综述无机穴状化合物(NH4)18[NaSb9W21O86]18-,和Keggin型聚氧钨酸盐作为抗人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)和抗癌药物的研究进展。方法根据构效关系对HPA-23和Keggin型聚氧钨酸盐进行体内体外研究。结果标题化合物穿透细胞膜进入细胞中,对HIV-1反转录酶或人体肿瘤有抑制活性。结论:直接揭示其可做为抗癌抗病毒药物。     

Berbamine induces apoptosis in human hepatoma cell line SMMC7721 by loss in mitochondrial transmembrane potential and caspase activation

Objective： To investigate the effect ofberbamine on human hepatoma cell line SMMC7721. Methods： The effects of 24 h and 48 h incubation with different concentrations （0-64 μg/ml） of the berbamine on SMMC7721 cells were evaluated using 3-4,5-dimethylthiazol-2-yl-2,5-diphenyltetrazolium bromide （MTT） assay. Hoechst 33258 staining was conducted to distinguish the apoptotic cell, and the appearance of sub-G1 stage was determined by PI （propidium iodide） staining, the percentage of apoptotic cell was determined by flow cytometry following annexin V/PI staining. Flow cytometry was performed to analyze the cell cycle distribution and the mitochondrial membrane potential （△ψm）, the expression of activated caspase3 and caspase9 was analyzed by Western-blot. Results： The proliferation of SMMC7721 was decreased after treatment with berbamine in a dose- and time-dependent manner. Berbamine could induce apoptosis in SMMC7721 cells and could cause cell cycle arrest in G0/G1 phase, to induce loss of mitochondrial membrane potential （AVm） and activate caspase3 and caspase9. Berbamine-induced apoptosis could be blocked by the broad caspase inhibitor z-VAD-fmk. Conclusion： Berbamine exerts antiproliferative effects on human hepatocellular carcinoma SMMC7721 cells. The anticancer activity of berbamine could be attributed partly to its inhibition of cell proliferation and induction of apoptosis in cancer cells through loss in mitochondrial transmembrane potential and caspase activation.     

Combination of small interfering RNAs mediates greater inhibition of human hepatitis B virus replication and antigen expression

INTRODUCTION Chronic infection by hepatitis B virus (HBV) isassociated with a high risk of liver cirrhosis and pri-mary hepatocellular carcinoma (HCC). It remains animportant global health problem with over 350 mil-lion chronic HBV carriers worldwide. Among thesechronic carriers, about one million people die ofHBV-associated liver failure or HCC annually (Kaoand Chen, 2002). Although chronically infected pa-tients have been treated with interferons and nucleo-side analogs, th…