全自动细胞分选仪对单细胞筛选的优化与应用

以Ec-109、BHK细胞为例,采用AVISO细胞分选仪进行单细胞的分选与优化。首先,将电脑中的细胞筛选软件与显微镜相连接,依据不同的细胞类型,设置合适的挑选参数,并从X、Y与Z轴层面精确校准挑选位置。通过自由设定细胞特征参数,可准确地挑选到目标细胞。最后,检测分析细胞筛选率,均可达到90%以上。该筛选技术对单细胞的挑选可提高到可视化水平,与常规筛选方法相比,样品不需特殊处理,细胞收集方便,节约操作时间,提高了实验效率。     

细胞分离纯化技术研究进展

对细胞进行分离纯化的目的是为了获得较高纯度和活力的细胞以便用于实验研究或临床移植。分离纯化细胞的方法很多,通过对细胞表面标记可以用吸附、荧光活化细胞拣选、磁活化细胞分选等技术分离细胞;也可应用无表面标记的方法,如离心、离心淘洗、自由流细胞电泳等技术来纯化细胞。本文就目前这些分离纯化细胞的方法作一介绍。     

藻细胞计数及死／活分析的流式细胞仪方法

以我国原水典型藻类铜绿微囊藻和椭圆小球藻为例,建立了采用双组分绝对计数微球进行藻细胞计数的流式细胞仪分析方法,以及采用染料SYBR green I和碘化丙啶（PI）双染色判定细胞死／活的流式细胞仪分析方法,运用所建立方法开展了0-200 mJ·cm^-2紫外消毒处理后铜绿微囊藻的细胞计数及死／活分析.研究结果表明,流式细胞方法计数结果与显微计数结果具有较好的线性相关性（R0=0．980）,采用流式细胞仪使单样品操作时间缩短至5min以内．流式细胞方法能灵敏检测细胞死／活状态,测定梯度配比的热处理致死细胞的结果与配比值良好吻合,铜绿微囊藻拟合曲线尺。值达0．999,椭圆小球藻拟合曲线彤值0．995．流式细胞方法用于紫外消毒处理水样中藻细胞计数及死／活分析灵敏有效．     

基于逆流鞘液的微流控芯片设计及流场分析

微流控芯片应用于细胞分析分选、微生物检测时,在流动区域中可能会形成驻点,驻点的存在可能会引起流道拥堵、样品污染、纯度下降等问题。针对该问题,设计了一种微流控芯片,利用逆流鞘液避免细胞在驻点区域接触壁面,从而防止细胞聚集阻塞流道,同时对分选通道和废液通道中样品流再次聚焦,使样品流动更加稳定。利用Fluent软件对这种微流控芯片中的流场进行仿真分析,得到其流动状态,验证了引入逆流鞘液对于避免驻点引起的阻塞问题具有一定作用,对设计应用于细胞分析分选的微流控芯片具有参考价值。     

高精度微库仑仪的设计方法

本文讨论了高精度微库仑仪的设计方法，提出了以测量精度作为判断滴定终点的条件以改变电解电流占空比实现对电解电流的调节及对电解电流和电解时间的测量，理论和实践均表明该方法能大幅度提高微库仑仪的测量精度．     

高精度微库仑仪的设计方法

本文讨论了高精度微库仑仪的设计方法，提出了以测量精度作为判断滴定终点的条件以改变电解电流占空比实现对电解电流的调节及对电解电流和电解时间的测量，理论和实践均表明该方法能大幅度提高微库仑仪的测量精度。     

流式细胞术在实验教学中的开发与应用

流式细胞术是一门新兴技术,广泛应用在细胞生物学相关教学及科研中,流式细胞术实验课通过流式细胞仪工作原理讲解、仪器演示和实验操作,帮助学生消化课堂的教学内容,以便了解、掌握这门新技术。笔者根据农业院校教学特点,开设了流式细胞术实验课,并设计了流式细胞仪的操作演示、EGFP和小鼠脾脏淋巴细胞亚类的检测3个教学内容。流式细胞术实验课教学结果表明,学生加深了对流式细胞仪基础知识的理解和掌握,细胞标本制备、上机检测和结果分析等,提升了学生的动手操作能力、科研分析及解决问题的能力。而且,提高了流式细胞仪的利用率,使学生掌握了流式细胞术和细胞的生物学特性,为学生在未来的科研实验中利用该项技术奠定了基础。     

垃圾渗滤液对泥鳅红细胞的诱变效应

通过不同浓度垃圾渗滤液对泥鳅红细胞微核、核异常及异形细胞影响的研究,以监测垃圾渗滤液中有害物质的诱变性。结果表明:垃圾渗滤液能诱导泥鳅红细胞产生微核,异常核和异形细胞。在处理浓度范围内,随着处理液浓度的增高,泥鳅红细胞微核率,核异常率和异形细胞率均升高,并且呈现一定的剂量效应关系。用蒸馏水作对照处理,经t检验,差异显著(p<0.05)或极显著,说明垃圾渗滤液对泥鳅红细胞有很强的致畸作用。     

微课辅助教学对细胞生物学扩展知识点学习的作用与意义

本文对微课的发展现状进行了评价,探讨了微课应用于细胞生物学扩展知识上的适应性,并对微课制作的要点进行了分析。     

微课在大学细胞生物学实验中的应用

微课作为以单一知识点讲解总结为特点的教学资源,注重教学资源的浓缩与教学效率的提升,借助简短的视频讲解,综合图文并茂的展示实现学习任务的细致阐述。细胞生物学是当代生命科学的基础学科,也是发展迅猛的前沿学科之一。本文通过分析微课产生的背景、概念和特点,结合细胞生物学实验教学存在的问题,简述了微课资源在细胞生物学实验课程中的应用方法,并在此基础上提出微课在教学上的应用等建议,以期为微课资源的建设和应用提供一些参考和借鉴。     

"细胞分化和细胞全能性"一节的教学

“细胞分化和细胞全能性”是上海高中二年级《生命科学》教材第九章第三节的内容，本节课继于细胞分裂学习的基础上，对细胞在生长发育过程中的一些变化，及相关知识和科技发展，作初步的探讨。在教学过程中，通过组织学生观察、比较、思考、举证，加强对概念的理解；以自主查找资料、分析资料的方法，再在教师引导下，了解生命科学前沿技术对人类社会发展的意义。     

一种新型细胞恒温振荡仪的研制

根据医学细胞分离实验过程的需求,研制一套具有恒温、振荡、通氧、加样、数字显示、定时、报警等功能的细胞恒温振荡仪。仪器采用上下分离式机械结构,易实现振荡功能,操作方便;恒温控制系统采用积分分离的模糊PID控制器,加热快,精度高;并介绍了振荡频率调节原理、硬件电路、软件系统的设计等。最后,给出了恒温实验效果及其分析。实践结果表明:研制的新型细胞恒温振荡仪结构简单,操作方便,实用性强,可为细胞分离提供良好的实验环境。     

螺旋上升式任务驱动模式在大学程序设计类课程中的教学研究

本文提出一种螺旋上升式任务驱动模式,并将其应用于大学程序设计类课程的教学,分析了该模式与传统的任务驱动法的区别。为配合该教学法的具体实施,以C语言为例,对程序设计类课程的教学内容作了详细分析,给出了在设计递进式任务时所遵循的若干原则,并要求做到理论教学与实践教学的一体化,同时,对任课教师需要具备的理论素养和实践技能作了分析。     

基于Kolb学习风格的微课内容风格化设计

大规模开放式在线教育（MOOC）对微课程内容设计提出了更高的要求。不断提高微课制作水平，满足学生个性化学习需求，是微课内容设计的关键。根据Kolb学习风格理论，从相关理念、设计过程、实施方案等方面研究了微课的内容设计，提出了微课内容风格化设计策略，以提高微课的使用价值。     

冠心病患者树突状细胞功能状态分析

通过分离CHD患者及健康体检者外周血单个核细胞(PBMC),在含粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素4(IL-4)的培养条件下制备树突状细胞(DC),并应用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子CD86(B7-2)的表达、混合淋巴细胞反应(MLR),检测DC对同种异体淋巴细胞的刺激能力,分析评价冠心病(CHD)患者DC的功能状态,结果表明,CHD患者DC处于激活状态,此可能是CHD发病机制之一.     

激光微束的高斯能量分布与细胞损伤直径之间的关系

本文论述激光微束照射细胞的损伤点直径和聚焦光斑上能量密度的测试方法。用JWS-l型激光微光束仪在100倍和40倍显微物镜下,对人体红血球细胞进行照射,其最小穿孔直径分别等于0.8微米和1.5微米。分析和讨论了细胞的损伤点直径、穿孔直径和激光微束束腰直径之间的高斯几何学关系。认为用中性滤光片衰减激光能量的方法,激光微束直径并不改变,但可得到:细胞穿孔直径~细胞损伤直径~激光微束束腰直径。     

问题解决导向的心理健康教育微课设计——基于浙江省首届中小学心理微课设计大赛经验

问题是通向理解之门的钥匙.来源于学生切身的问题,能够激发学生思考的欲望;对这些问题运用心理学的理论进行分析,能够引发有质量的关注.问题解决导向的心理健康微课正是以此为主线,通过对学生关注的问题进行聚焦、分析、解决,进而达成教学目标.内容设计要求短小精悍,焦点明确,解读合理.问题解决导向微课要求具有问题聚焦贴合学情、问题分析理论科学、问题解决具体可操作的特征.其核心是以问题为引导,以解决问题为目标,通过对问题的解析、假设、验证等一系列活动过程,达成解决问题的目标.为此,本文试图从问题解决导向的心理健康微课的界定入手,结合具体微课案例,同时结合自己微课比赛设计过程中的几点经验和思考,详细阐述问题解决导向的心理健康微课的特征、设计流程等,以供同行老师交流与参考.     

基于学习进阶的初高中生物学教学衔接——以“细胞的结构和功能”为例

对比分析义务教育生物学新课标和高中生物学新课标的课程目标,以“细胞是生物体结构和功能的基本单位”概念为例,梳理义务教育生物学和高中生物学新课标中的内容要求、学业要求等相关表述,指出学段间有效衔接、循序渐进和延续拓展的关系。结合SOLO分层理论构建围绕核心概念理解层级的学习进阶路径,以“细胞的结构和功能”为进阶维度,开展初高中衔接的进阶设计,从学习进阶的角度为初高中衔接提出教学建议。     

人胎盘AC133+造血干/祖细胞的集落形成能力

探究了人体胎盘组织AC133+造血干/祖细胞(HSPC)的集落形成能力.选用新鲜的人胎盘组织制成单个细胞(有核细胞)悬液,经流式细胞术(FCM)分析其AC133+造血干/祖细胞的纯度,采用免疫磁性分选法(MACS)分选AC133+和AC133HSPC,分别进行粒-单集落形成单位(CFU-GM)、红系集落形成单位(CFU-E)、混合集落形成单位(CFU-Mix)培养,以评价其增殖分化能力.结果显示胎盘组织AC133+细胞百分率为4.11％,其细胞亚群集落培养形成CFU-GM的集落数为(37±3)/1×103;形成CFU-Mix的集落数为(34±5)/1×103;形成CFU-E集落数为(33±4)/1×103.胎盘AC133细胞未见集落形成.结论:人胎盘组织含HSPC,AC133+细胞具有分化为CFU-GM、CFU-Mix、CFU-E的能力;AC133膜抗原可作为胎盘HSPC的分选标志.     

“免疫调节”疑难问题解读

对人教版和浙科版高中生物学新教材“免疫调节”教学过程中产生的疑问进行梳理与分析,探讨了炎症反应与第三道防线的关系,吞噬细胞与B细胞能否激活初始细胞毒性T细胞以及抗体对吞噬细胞的调理作用3个问题,并尝试以流程图的形式总结呈现探讨成果。