亲和色谱法从融合蛋白GST-IL-6中纯化重组人白细胞介素-6

研究用亲和融合谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)的方法纯化重组人白细胞介素 6(IL 6)的发酵和纯化工艺 ,使用含有质粒pHZl818的E .coliJMl0 9在 2XYT培养基中进行发酵表达 ,IL 6表达为与谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)融合的融合蛋白GST IL 6.融合蛋白存在可溶的活性蛋白和不可溶的包含体两种形式 ,此包含体无活性且无法复性 ,无法用亲和层析回收 ,通过实验优化摇床发酵的诱导温度和转速 ,以增加可溶融合蛋白的表达 .菌体超声破碎液后 ,上清液用作亲和柱层析 ,可将融合蛋白提纯至 80 00 ,每升发酵液可得 10mg融合蛋白 ,用凝血酶裂解处理 6h ,亲和标志物GST被特异性切除 ,裂解得到的IL 6用离子交换柱层析可纯化至 95 00 ,MTT法测得纯化的IL 6生物学活性为 1.0 2× 10 8IU/mg .     

ICA69基因工程融合抗原的制备

基于基因工程技术 ,用PCR法扩增出编码ICA6 9的cDNA片段 ,直接克隆到pSPORT 1质粒上 ,经DNA序列测定 ,插入到GST融合蛋白表达载体 pGEX 2T ,构成重组质粒 p2T ICA6 9,得到的表达产物GST ICA6 9融合蛋白用间接ELISA法检测其免疫原性 .测序结果表明 ,所获PCR产物已正确重组到PGEX 2T表达型质粒中 .重组质粒在原核细胞中表达的融合蛋白具有免疫原性 ,并能应用于Ⅰ型糖尿病病人血清中抗ICA6 9抗体的检测 .所获得的表达产物为重组ICA6 9融合抗原 ,有助于提高Ⅰ型糖尿病的预报率和确诊率 .     

存在轴向扩散时固定床反应器的参数敏感性和飞温现象(英文)

对固定床反应器存在轴向扩散的情况进行了研究,通过临界等扩散曲线得到飞温判据．计算结果表明：当轴向扩散相对较小时,轴向扩散对参数敏感性的影响可以忽略;但是,当轴向扩散相对较大时,轴向扩散对参数敏感性的影响显著,必须考虑．     

连续循环亲和提取过程的分离纯化特性

将前人提出的连续循环亲和提取（ＣＡＲＥ）过程扩展到利用超滤膜的系统，即考虑超滤膜对料液中各组分的截留作用，建立了该过程的数学模型，对该过程的分离纯化性能──浓缩因子（ＣＦ），纯化因子（ＰＦ）和回收率（ＲＥＣ）──进行理论分析。结果表明：随膜截留率的增大，ＣＦ和ＲＥＣ增大，而ＰＦ降低；增大洗脱液和循环液的流速虽可提高回收率，但却使纯化因子降低，表明存在最佳的操作条件使该过程的分离纯化性能最好。     

Solid Phase Peptide Synthesis of Fusukang for AIDS

Acquiredimmunodeficiencysyndrome (AIDS)iscausedbytheinfectionofhumanimmunodeficiencyvirus(HIV ) .Glycoproteingp4 1isfoundtobethekeytoHIV′sinfectiontocellT[1] .Dr.ZhoudesignedapeptidenamedFusukangasanHIVmembranefusioninhibitoraccordingtothestructureofgp 4 1.　　Fusukangconsistsof 36aminoacidresidues,andissynthesizedbythemanualsolidphasepeptidesynthesistechnique[2 ,3] inthisresearch .1　Materialsandmethod1.1　Materials　　 9 fluorenylmethoxycarbonyl(Fmoc)aminoacids ,Wangresin ,dicyclohe…     

Fmoc固相合成胸腺素α_1的工艺研究

本文采用新型保护基Ｆｍｏｃ－保护Ｎα－氨基,ｔＢｕ－保护侧链基团的策略,合成了２８肽胸腺素α１。以Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＷａｎｇＲｉｓｉｎ为多肽合成起点,在羟基树脂上进行逐个延伸的缩合接肽反应,最终合成胸腺素α１的多肽序列,将其用５０％ＴＦＡ酸解脱离树脂得粗产品。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＨＰＬＣ鉴定,证实粗产品中含有胸腺素α１,并且为最大部分。