叶绿体DNA简介

DNA主要存在于细胞核内，也有少量的DNA存在于线粒体和叶绿体中。核内的DNA能够自我复制，并能通过转录和翻译来控制蛋白质的合成，而叶绿体DNA的情况又怎样呢？本文对叶绿体DNA做一简要介绍。一、叶绿体DNA的发现与证实早在50年代就有人看到叶绿体中有率尔根反应的颗粒存在，推测其中可能是DNA。1962年RIS和PISllt在电镜下观察农藻、玉米等植物叶绿体超薄切片时，发现并用实验证实了叶绿体DNA的存在。随后在1963年Sager和Ishida从衣藻叶绿体、Gibor和Izawa从伞藻叶绿体中都分离出DNA。由此，叶绿体中有DNA存在得到了公认，…     

杨树叶绿体分离及叶绿体DNA提取方法的研究

利用高盐低pH值法对杨树叶绿体及其DNA进行分离与提取，经匀浆一差速离心一裂解一纯化，可获得完整的叶绿体和纯度较高的叶绿体DNA（chloroplast DNA，cpDNA），DNA平均产率0．64ug／g．本方法快速简便、省去传统的蔗糖密度梯度离心和氯化铯密度梯度离心等昂贵、耗时的步骤，对仪器的要求不高，成本低，适用于实验教学和科研活动。     

水稻叶绿体DNA提取纯化的方法研究

本文以温室培养的水稻菌和水田栽培的秧苗为材料,摸索出一套一般实验条件下简便宜行,可获到高纯度叶绿体ctDNA的方法。     

南阳牛血液基因组DNA提取与ANGPTL4基因的PCR扩增

采集20例南阳牛的血液,采用酚/氯仿法分离白细胞提取基因组DNA,并且对ANGPTL4基因部分序列(677～998 bp)PCR扩增条件进行了优化。结果表明,获得的牛基因组DNA经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,主条带清晰,表明获得的南阳牛基因组DNA可以用于后续实验;以所提取的基因组DNA为模板,优化ANGPTL4基因片段扩增的条件,结果表明,最理想的PCR扩增条件是模板量为2μL(50 mg/L),Taq聚合酶(5 u/μL)的量为0.8μL,退火温度为56℃,循环次数为35次。     

氯化钠与叶绿体色素的提取

学生按高中《生物》课本做“叶绿体中色素的提取和分离”实验时，往往难于提取到叶绿体中的色素。笔者于1996年做了一些实验和理论探索。找到了原因：新鲜叶片含有的水分与丙酮互溶，水分子吸引丙酮分子，排斥色素分子使丙酮不能溶解叶绿体中的色素而提取不到色素。解决办法是烘干叶片除去水分或加入能把水与丙酮分开的盐(氯化钠)。     

叶绿体DNA限制性图谱分析在植物系统分类学中的应用

近15年来,叶绿体DNA分析作为一种新的分子水平分类方法已广泛地应用于植物系统分类学中。本文就其在[1]分析某些重要属内部的亲缘关系;[2]证实天然准性杂种;[3]研究多倍体起源;[4]解释雄性不育系的起源等方面的应用作一介绍。     

离子束介导转大豆基因提高小麦蛋白质含量研究

通过应用离子束注入小麦种子和大豆DNA溶液浸泡法将外源DNA导入小麦的研究，获得了蛋白质含量18％以上的优质变异株183个，其中蛋白质含量20％以上的4株，最高22．0％，湿面筋最高为45．09％，蛋白质和湿面筋含量的变异较为突出，分别较对照增加1．5－6．0个百分点和3．0－9．02个百分点。证实了DNA片段的浸泡效果明显优于全长DNA，浸泡时间以48h的效果最好，24h的次之，10h的最差。     

蚕微卫星DNA的体外自我扩增条件初步研究

采用一种类似PCR的基因组自我引发PCR(GSP—PCR)法，初步研究了家蚕、野蚕、天蚕、蓖麻蚕和柞蚕的微卫星DNA的体外基因组自我引发PCR扩增的条件。结果发现。浓度为100ng/μl的基因组DNA在100℃变性15min后，与等量的同浓度的未变性的DNA混合作为模板。在80m扩增体系中[含0．2mM dNTPs、50mM KCl、10mM Tris—HCl(pH9．0)、4mM MgCl2、1．25U Tap plymerase]，加入1μl此混合模板，在92℃，1min→55℃，2min→72℃，2min，30→90次循环的扩增条件下，成功地得到了PCR产物。基因组DNA的适宜浓度为1．25ng/μl反应体系；GSP—PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后的部分片段经回收后，在同样条件下，30—60个循环可得到同样大小范围的产物。GSP—PCR产物经6％的变性测序胶电泳，得到典型的梯状带，表明为微卫星DNA。     

关于"叶绿体色素提取与分离"实验教学的体会

通过“叶绿体色素提取与分离”实验教学的体会,阐述了如何引导学生对实验教学产生兴趣．如何才能使实验顺利获得成功。通过教师引导学生严格操作、细心观察,培养学生科学严谨的学习态度、探究能力和创新意识。     

PCR扩增目的基因相关计算的教学思考

针对PCR扩增目的基因的相关计算,提出有关引物的计算,围绕DNA聚合酶的特点展开;有关PCR过程中DNA分子数目的计算,围绕PCR技术的原理“DNA半保留复制”展开。引导学生从PCR技术的原理入手,实现深度学习。     

DNA甲基化与基因活性的调控

DNA甲基化作为基因组表观遗传调控的代表性机制,了解DNA甲基化现象的实质和其对基因活性调控的本质对于理解表观遗传具有重要作用,介绍了DNA的甲基化和去甲基化过程、DNA甲基化抑制基因转录的机制2方面内容。     

三种全血基因组DNA提取方法的比较

目的 :比较三种不同的DNA提取方法提取人全血基因组DNA对DNA提取效率、纯度以及PCR扩增的效果影响。方法 :分别应用中山医科大学达安公司DNA提取液 ,珠海黑马医学仪器有限公司DNA提取液 ,胍盐酸法三种不同的方法提取人全血基因组DNA。结果 :三种方法提取的DNA纯度平均分别为 :1.4 8,1.5 1,1.5 6 ,各组间差异无显著性。 2 0 0 μL全血中所提取DNA总量平均分别为 1.6 μg ,2 .3μg ,4 .1μg。用 0 .8%琼脂糖凝胶电泳鉴定胍盐酸法制备的DNA效果较其它两种方法好 ,PCR扩增效果差异不明显。结论 :胍盐酸法提取的DNA总量明显高于其它两种方法 ,提取效率高 ,为三种全血基因组DNA提取方法中之首选。     

诠释叶绿体和线粒体的半自主性

在日常的教学活动中,我们经常接触到线粒体和叶绿体这2种细胞器,知道它们内部存在少量的DNA和RNA,并且知道它们是一种半自主性细胞器,那么如何理解这种半自主性呢?下面就来谈谈这个问题。线粒体DNA较小也较为简单,存在于线粒体内的基质中,有时和线粒体内膜结合在一起。在哺乳动物的细胞中,线粒体DNA一般是一裸露、闭合、环状的DNA分子。一般来说,植物细胞线粒体中的DNA较动物细胞线粒体中的DNA大许多倍;一个线粒体     

PCR 是如何扩增特定 DNA 片段的

1提出问题在PCR过程中,有时需要扩增DNA中特定的片段(图1),如目的基因的扩增等。那么,如何控制扩增特定的DNA片段呢?人教版高中《生物》选修1教材中指出:"DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列,使这段固定长度的序列呈指数扩增。"对这句话,该如何理解?     

3种土壤微生物基因组DNA提取方法的比较

该实验通过SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法提取土壤微生物基因组DNA,用DNA Nanophotometer仪测定样本DNA的纯度和浓度,以确定最佳提取方法.结果表明,用SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法和土壤微生物基因组DNA的浓度分别为41.45 ng/μl、96.48 ng/μl和58.40 ng/μl,纯度（OD260/OD280）分别1.45、1.57和1.82.由结果可知,改良法提取DNA的浓度最高,而Soil gDNA Kit法的纯度最高,但其成本较高,因此,SDS高盐法（改良法）是节省成本且适合提取大批量土壤微生物基因组DNA的方法,今后在提取DNA过程中进一步优化,以提高其纯度.     

植物组织DNA的提取及纯化方法的研究

以小麦的幼芽和子房为材料,采用高等植物ＤＮＡ简易快速提取法,对小麦组织ＤＮＡ提取及纯化中的若干问题做了探讨。研究表明,小麦幼芽是提取ＤＮＡ的较为理想的材料,粗提ＤＮＡ用ＲＮＡ酶法进行纯化,纯化效果较好;纯化的幼芽ＤＮＡ稀释８倍即符合导入要求。     

应用PCR技术扩增SRY基因检测性别

本文介绍了一种从基因水平快速、简捷地鉴定性别的方法及该方法的实际应用价值.PCR(polymerase chain reaction)技术是目前最常用的体外扩增DNA片段的技术,SRY(sex determining regionof the Y)基因是男性特有的基因,位于Y染色体上.在SRY基因区域设计特异的引物,利用PCR技术,以管家基因GAPDH为内参照,若能扩增出SRY基因片段,即可判断为男性,否则为女性.该法可对一滴血、一根毛发、多年的尸块、胎儿、有争议的性别进行性别鉴定.广泛应用于法医鉴定、无创孕期胎儿性别鉴定以预防X连锁隐性遗传病患儿的出生以及对有性别争议的运动员体检等.目前赤峰市的各大医院还未开展此技术,值得推广.     

植物叶绿体转化的基因枪法研究进展

叶绿体基因组转化由于具有独特的优越性,逐渐成为植物基因工程研究的热点,而基因枪转化法是目前较为成熟的叶绿体基因转化技术。本文简述了基因枪转化的原理、方法及优缺点,并重点阐述了叶绿体转化的优点及实践应用的研究进展。     

单只大型溞DNA的提取及其COI基因部分序列测定分析

利用基因组DNA纯化试剂盒稳定、快捷地提取单只大型溞（Daphnia magna）基因组DNA.以提取出的DNA为模板,利用线粒体DNA细胞色素氧化酶I亚基基因（COI）特异性引物,通过降落PCR技术扩增大型溞COI部分基因的序列.序列分析表明,此基因确为大型溞COI部分基因片段,从而证明本研究所提取的线粒体DNA能够...