提取西藏油菜总DNA的一种方法

以西藏栽培的油菜为材料,采用不同的药品、不同的配方、不同的水浴时间、不同的离心速度等关键的操作程序,筛选出一种提取油菜总DNA效果较佳的方法。此方法提取的DNA纯化后经电泳、紫外吸收光谱检测证明为高分子量、高纯度的DNA,可用于一般的生物化学和分子遗传学的研究。     

SDS法提取青稞叶片总DNA的改进方法

二十一世纪是生物技术的世纪。在西藏自治区内建立的第一个分子生物学实验室内，在前人研究的基础上。针对高原环境的特殊性，在现有条件下，改进操作程序，积极探索了青稞总DNA的提取方法，其纯化后的DNA经电泳，紫外吸收光谱仪检测，证明为高分子量、高纯度的DNA，可用于分子遗传学研究。     

使用KingFisher Flex建数据库的探索

KingFisher Flex血液DNA提取试剂盒和KingFisher磁珠提取仪联合合作,可以从新鲜、冷冻血液和白细腻层中纯化基因组DNA(gDNA)提供高效解决方法,可最大限度节约人工的操作时间。但是在操作中,由于所采集生物样本存在不规范性或有不确定性,无法一次性获得完整数据,因此,数据库的建设就显得极为必要。本文就是在这样的背景下,探究了利用Thermo Scientific KingFisher Flex这台仪器,对一次未检出的口腔采集卡,进行复检,找到数据库的建立方法。     

微量脱落细胞DNA提取纯化方法比较

本文比较了实验室常用的kingfisher flex工作站纯化方案及kingfisher FL纯化方案的检验效果。日常案件检材的检验结果表明运用kingfisher flex方案对微量脱落细胞DNA进行纯化的检测结果优于kingfisher FL方案。实验检材检验结果也提示在微量范围内,kingfisher flex方案优于kingfisher FL方案,在检材DNA含量较多时,两种纯化方案效果相当。     

黄酮类化合物的提取-分离-纯化研究进展

本文对黄酮类化合物的提取、分离、纯化研究进展进行综述。本文介绍了黄酮类化合物的提取、分离、纯化的最新方法。     

一种通用的基因组DNA提取方法

高质量的基因组DNA是进行分子生物学实验的前提。为此,本研究通过从动植物组织和细胞中分别提取DNA,探索了一种通用的基因组DNA的提取方法。本方法所提取到的DNA纯度高、适合后续PCR扩增。     

甘草多糖提取纯化工艺研究

对甘草多糖提取纯化工艺进行了研究,通过单因素实验测定甘草多糖提取的影响,并进行正交实验优化,确定最佳提取纯化工艺条件。实验结果表明,甘草多糖最佳提取工艺：提取温度90℃、料液比30倍、提取时间0．5h,提取次数2次。     

苗药观音草总皂苷水提取工艺的研究

本文对观音草总皂苷提取工艺进行研究。观音草总皂苷最佳提取工艺为80摄氏度分别提取2次,第一次分别加入12倍量纯化水提取80分钟,第二次分别加入10倍量纯化水提取60分钟。     

黄酮类化合物的提取_分离_纯化研究进展

黄酮类化合物主要提取方法主要有有机溶剂提取法(乙醇提取法和甲醇提取法)、超声提取法、超临界萃取法、微波法、酶法提取法、碱性水提法。黄酮类化合物分离、纯化方法主要有重结晶法、树脂法、溶剂萃取法。本文对黄酮类化合物的提取、分离、纯化研究进展进行综述。     

芦苇床中芦苇内生菌群总DNA提取方法研究

本文对污泥干化芦苇床中芦苇内生菌总DNA的提取方法进行了研究,实验经过摸索后采用Soil DNA Kit提取基因组DNA对不同来源的芦苇内生菌群总DNA进行提取。利用PCR技术对不同来源的总DNA的提取方法进行了对比分析。以期应用分子生物学技术研究和评价芦苇共生菌群改变,从而为改善芦苇床工艺设计提供生物学证据。     

重组链球菌溶血素(SLO)的原核表达、纯化

目的构建SLO原核表达质粒,重组蛋白的诱导表达并纯化。方法提取链霉菌溶血素O模板DNA,PCR法扩增slo基因。构建融合表达重组质粒p GEX-6p-1-slo和pet32a-tev-slo,将正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21和大肠杆菌BL21-DE3,使用异丙基硫代βD半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组融合蛋白。采用亲和层析纯化重组蛋白,切除标签后,再通过亲和层析纯化,获取SLO重组蛋白。结果 PCR扩增出slo基因,基因片段(1700 bp)与理论一致。经SDSPAGE,蛋白质印迹显示重组蛋白相对分子质量为55 k Da,与数据库中的相对分子质量结果相符。结论成功构建了slo原核表达质粒,表达并纯化了SLO重组蛋白。     

人内脂素的原核表达和分离纯化

目的:构建Visfatin原核表达质粒,诱导表达并纯化重组人内脂素(Visfatin)。方法:从人LO2细胞中提取总RNA后,经RT-PCR法得到人Visfatin的c DNA序列,用以构建带HIS标签的Visfatin重组质粒。然后将重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni柱亲和层析纯化融合蛋白。结果:PCR扩增出的目的基因片段为1600 bp左右,与理论大小一致。SDS-PAGE、Western blot、质谱分析数据证明了蛋白是Visfatin融合蛋白。结论:成功的表达并纯化得到带HIS标签的Visfatin融合蛋白。     

基因敲除小鼠不同部位提取DNA方法的比较

目的:建立简便、快捷、稳定可靠的鉴定小鼠基因型方法,维护动物伦理福利。方法:基因敲除小鼠后代鉴定时,分别从鼠尾,鼠耳,趾甲三个部位提取DNA,通过优化DNA提取技术,经分光光度计检测,PCR扩增等技术,比较分析DNA纯度、提取时间,及基因型鉴定结果。结果:取组织提取DNA,经分光光度计检测,发现DNA浓度尾尖最高,耳尖次之,趾甲浓度最低,但是纯度最好。经PCR扩增技术发现不同基因型的不同部位提取DNA鉴定结果一致。结论:剪趾甲提取DNA操作方法相对于其他常规方法,操作简单,耗时最短,基因型鉴定结果可靠,对小鼠本身伤害更小,可用于规模化的小鼠基因型鉴定实验中。     

猕猴桃中DNA的粗提取

通过查阅相关资料、请教老师,了解了DNA提取有关原理,并通过实验提取了猕猴桃的DNA。     

第一个中国古人类基因组成功测序

<正>数万年前古人类的基因组也可以从化石中提取出来,也可以测序?国际上最新的古DNA技术,让数万年甚至几十万年前古人类的DNA从人类化石甚至土壤中获得,成为一种可能。据10月13日的新闻报道,北京房山的田园洞曾出土一具四万年前男性的骨骼化石。中国科学院古脊椎动物与古人类研究所的研究人员使用和德国合作团队一同开发的一种特殊的捕获技术,从     

SDS法和CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA用于SSR分析

选用8个西藏黄籽油菜干种子作材料,分别采用SDS和CTAB的微量法提取基因组DNA,取适量的该DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用uv1100型紫外分光光度计测定所提取的DNA在260nm、280nm的光密度值及比值,并进行SSR标记。结果表明,2种方法均能从西藏黄籽油菜干种子中提取出一定量的比较完整且纯度较高的DNA,用琼脂糖凝胶检测时,表现带型清亮,每个样品带型较一致,利用SDS法CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA,均适用于SSR分析。但用CTAB法提取的干种子DNA的纯度更高、量多、质量更好,更适于制备SSR分子标记的模板DNA。     

正交试验法优选黄芩的提取纯化工艺

目的:探讨黄芩提取工艺的科学性,并优选出黄芩提取的最佳工艺参数。方法:选用L9(34)正交试验设计,并以提取物中黄芩苷的含量为指标,考察加水量、提取时间、提取次数对提取效果的影响以及通过酸沉温度、保温时间、静置时间对黄芩提取物进行纯化处理确定最终黄芩的提取纯化工艺。结果:黄芩采用饮用水提取的最佳提取工艺条件为提取3次,加水量分别为10倍、8倍、6倍,每次1.5小时;酸沉为60℃保温60分钟后静置16小时。结论:采用正交试验法筛选出的提取纯化方法较好,操作简单,重现性好,有效活性成分含量高,为生产提供可靠的科学依据。     

凝胶色谱法分离纯化积雪草中1,5-二氧咖啡酰奎宁酸

用乙醇提取法对积雪草进行回流提取,应用凝胶色谱法分离纯化积雪草粗提物,利用质谱和核磁共振碳谱、氢谱鉴定产物结构。分离纯化得到1,5-二氧咖啡酰奎宁酸,纯度为100%。此法对积雪草中化合物的提取与鉴定具有准确和高效性。     

四种从蒙古马全血中提取基因组DNA方法的比较研究

本实验分别采用酚———氯仿抽提法、快速抽提法、胍盐酸提取法和天为时代试剂盒法对蒙古马血样进行基因组DNA的提取,再利用琼脂糖凝胶电泳技术、紫外分光光度计和PCR扩增技术,对提取得到的DNA纯度、浓度及实用性进行检测,从而选择一种高效、快速、经济的从蒙古马血液中提取基因组DNA的方法。     

镉和菲复合污染对土壤微生物DNA序列多样性的影响

在室内培养条件下,采用RAPD(随机扩增多态)分子标记技术研究了重金属镉和多环芳烃菲复合污染对土壤中微生物群落DNA序列多样性的影响。结果表明,培养15d和30d,镉-菲单一和复合污染均导致土壤微生物群落DNA序列的丰富度、均匀度和多样性指数增加。实验证明,污染早期,镉和菲会引起土壤微生物DNA序列本身发生变化,其中镉-菲复合污染对土壤微生物DNA序列多样性的影响最大,与单一污染相比具有明显差异。