相关序列扩增多态性标记技术（SRAP）及其在植物中的应用

相关序列扩增多态性（Sequence-Related Amplified Polymorphism,SRAP）是最近发展起来的新型分子标记,具有简便、可靠、易于测序等优点。主要介绍了相关序列扩增多态性标记技术的概念、原理、特点及该技术在植物中的应用。     

安徽野生香菇ISSR和PAPD分析的比较

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)和简单序列重复区间扩增多态性(Inter-simple sequence repeat,ISSR)技术,利用12条RAPD引物和10条ISSR引物对10个安徽香菇菌株进行了DNA标记比较分析.结果表明,ISSR-PCR较RAPD-PCR稳定,更具可操作性;供试菌株存在比较显著的遗传变异,具有较丰富的遗传多样性.     

复合STR扩增银染检测中的问题及对策

短串联重复序列(STR)是人类基因组中具有高度多态性的遗传性标志,PCR-STR DNA分型技术被应用于法医学鉴定后,取得了令人瞩目的成绩;而其检测方法又以复合位点扩增检测最受广大实验技术人员的欢迎,其设备简单,使用检材少,方法易行,可在较短的时间内获得更多的多态性信息.笔者在一年多来使用STR复合扩增检测技术用于实践办案中遇到许多实际问题,为保证检测结论的正确性,注意影响因素及容易出现的问题并且采取相应的对策是十分重要的.     

RAPD技术在人类肿瘤研究及畜牧业生产中的应用

随机扩增多态性ＤＮＡ (Ｒａｎｄｏｍａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡＲＡＰＤ )技术是 1 990年由Ｗｉｌｌｉａｍｓ和Ｗｅｌｓｈ等人建立起来的。它是以聚合酶链反应 (ＰｏｌｙｍｅｒｏｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ)为基础 ,随机的寡核苷酸为引物和ＤＮＡ为模板 ,检测经特异扩增后的片段的多态性。ＲＡＰＤ是在ＰＣＲ中采用短引物对ＤＮＡ序列进行随机扩增 ,其扩增产物经电泳分离出各种片段直接以溴化乙锭染色后即可被检测出来。ＲＡＰＤ技术由于省时、低成本 ,因此它一出现便在遗传多样性、遗传关系、遗传定位、…     

DNA芯片技术及其应用

DNA芯片技术是近年发展起来的DNA分析技术，它采用高速打印或光刻合成技术可在硅片、玻璃或尼龙膜上制造DNA微阵列.样品DNA通过PCR扩增、体外转录等技术掺入荧光标记分子，与微阵列杂交后，通过荧光扫描仪扫描及计算机分析即可获得样品中大量基因序列及表达信息.该技术可应用于DNA序列测定、基因表达水平检测、基因及多态性检测、发现新基因等多个研究领域.     

草地藏系绵羊cyp19基因第9内含子和启动子2多态性分析

利用PCR-RFLP技术对30只草地藏系绵羊的cyp19基因第9内含子和启动子2进行多态性分析,结果表明:对第9内含子-547-773这一区域扩增获得的目标片段,经限制性内切酶HaeⅢ酶切后出现两种基因型:CC和CG,基因型频率分别为0.533、0.467,处于Hardy-wei 平衡状态;而对启动子2序列-683-1199这一区域扩增所获的目标片段,经限制性内切酶DraI酶切后未出现多态.     

红松SRAP-PCR反应体系的建立及优化

相关序列扩增多态性(Sequence-Related Amplified Polymorphism,SRAP)是对ORFs(OpenReading Frames)进行扩增的一种新型的基于PCR的标记方法。以CTAB法提取的红松针叶DNA为模板,应用单因子试验及L16(45)正交试验系统分析了DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶浓度等对SRAP-PCR扩增结果的影响。确定了PCR的最佳反应体系为:20μL体系中,1×PCRbuffer 2μL、DNA模板40~100 ng,Mg2+2.5mmol/L,dNTPs 0.15 mmol/L,引物0.15μmol/L,Taq酶1.5 U。PCR最优的扩增程序为:进行35个循环,前5个循环中94℃变性1 min,35℃复性1 min,延伸30 s;后30个循环中94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min;最后72℃延伸7 min,4℃保存。在此反应体系下,所扩增谱带清晰、稳定、多态性高,为进行红松不同种源间遗传分化以及构建遗传图谱等内容的研究奠定基础。     

例析未知序列的PCR扩增

本文例析并介绍了未知序列的PCR扩增方法.要对已知序列两侧的未知序列进行测序分析,可将其连成环状,利用已知序列设计引物,进行反向PCR.为减少随机片段的含量,可再进行巢式PCR.未知序列也可用热不对称交错PCR来扩增.     

分子生物学技术在苔藓植物系统分类研究中的应用

经典苔藓植物系统分类研究在科属划分、系统位置等方面存在较大争议,分子生物学技术应用于苔藓植物系统分类研究是对经典分类研究的重要补充。应用在苔藓系统分类研究中的分子生物学技术主要包括DNA序列分析技术随机扩增多态性DNA（RAPD）、限翩性片段长度多态性（RFLP）技术和同工酶分析技术等。基于分子生物学技术的苔藓分子系统学与经典分类学相结合,将为苔藓植物系统演化、科属地位划分、物种鉴定等研究提供更多的可靠证据。     

张家口地区汉族人群3个STR基因座的多态性调查

目的:调查D16S539、D7S820及D13S317三个STR基因座在张家口地区汉族人群的等位基因分布,获得相关群体遗传学参数.方法:用SilverⅢ Multipiex试剂盒复合扩增,聚丙烯凝胶电泳分型,银染显带.结果:108例汉族群体在3个基因座上均各检出7个等位基因,多态性分别为0.7314、0.7371、0.7635;个人识别率依次为0.8912、0.8948、0.9223,累计0.9986.结论:3个STR基因座在本地有较高的遗传多态性,在法医学及人类遗传学方面有较好的应用价值.