牛蛙源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定和药敏分析

为了分离和鉴定牛蛙（Rana catesbeiana）养殖环境的致病微生物,并筛选相关的抗菌药物,采用稀释涂布法从牛蛙养殖场的废水中分离获得1株优势菌株W6,并通过革兰氏染色和菌落形态观察、生理生化特性分析、16SrRNA基因序列分析等进行菌株鉴定,随后对该菌进行药敏性分析以及致病性试验．结果显示：该菌株为革兰氏阴性短杆菌,培养特性、生理生化反应与弗氏柠檬酸杆菌基本一致;16SrRNA基因同源性及系统进行分析显示,W6菌株与弗氏柠檬酸杆菌参考菌株同源性大于99%,且为同一进化分支．同时,药敏实验结果表明,该菌株对大多数抗生素具有较强耐药性,仅对呋喃唑酮（痢特灵）、头孢他定高度敏感．中草药水提取物抑菌实验表明,乌梅、五味子、艾叶、黄芩等中草药水提取物对该菌株具有较好的体外抑菌活性．致病性分析表明,该菌对牛蛙具有一定的致病性．     

周口地区鸡源致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

从周口地区鸡场无菌采集临床上疑似大肠杆菌病的116只病死鸡的心、肝、脾、肾,进行病原菌的分离、生化鉴定、动物试验和药敏试验,共分离出76株大肠杆菌,其中有44株能使小白鼠和雏鸡发病死亡,但各菌株之间毒力存在明显差异.经O因子血清型试验,确定56株大肠杆菌分属6个血清型,分别为O1,O2,O20,O45,O78,O1138,其中O1,O2,O45,O78为主要血清型,占定型菌株的73.7%,另有11株未能定型.药敏试验结果表明,所分离的76株大肠杆菌对头孢曲松、庆大霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星较敏感,高敏菌株达78.9%-86.8%.因此在使用药物治疗大肠杆菌病时,应根据药敏试验结果,选择敏感药物,且应注意交替用药,按疗程投药.     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏分析

采用常规细菌分离鉴定方法和分子生物学技术对四川某规模化猪场疑似副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)感染的病猪关节液、心包液、肺脏等病料进行了致病菌的分离与鉴定.经细菌分离培养特性、生化试验以及16S rDNA序列PCR扩增,确定分离菌株为HPS.动物致病性试验结果表明,分离菌株具有较强致病性.药敏试验表明,该HPS菌株对青霉素、链霉素、磺胺甲唑、林可霉素、苄唑西林等多数抗生素耐受,而对新霉素、头孢噻肟等较敏感.     

羔羊大肠杆菌分离鉴定及其致病性、耐药表型和耐药基因检测

目的:对皖北地区羊养殖场中所采集的37份腹泻羔羊粪便样本进行病原菌的分离鉴定,并对其耐药性及耐药基因进行测定。方法:将采集样本进行病原菌分离鉴定并进行同源性分析,通过药敏试验测定分离菌药物敏感性并对其耐药基因进行检测。结果:试验分离细菌37株,经生长特性、生化鉴定及16S rRNA测序对比序列确定分离菌均为大肠杆菌。致病性检测大肠杆菌中有21株为产志贺毒素大肠杆菌,其中Stx-1毒力基因和Stx-Ⅱ毒力基因分别占比8.10%和48.65%,肠毒性大肠埃希杆菌在本次试验中未检出。对分离的大肠杆菌进行耐药基因检测,6组耐药基因中tetA(97.30%)和qnr(83.78%)检出率较高。药敏结果显示分离的大肠杆菌对复方新诺明和林可霉素的耐药率分别达到89.19%和94.59%。结论:皖北地区部分大肠杆菌存在致泻性、携带多种耐药基因、存在多重耐药情况。     

1株山羊节杆菌的分离鉴定、药敏试验及耐药基因检测

目的:对送检的局部皮下出现包块的病山羊进行病原菌的分离鉴定,并对该致病菌的耐药情况及机制进行初步研究。方法:采集病山羊皮下包块内的组织液进行病原菌分离培养、革兰染色、镜检、生化试验和药物敏感试验以及分子水平鉴定,并检测耐药基因。结果:成功分离到1株革兰阳性、排列不规则的球菌,同源性分析显示为节杆菌。该菌对克林霉素、头孢噻吩、氧氟沙星等不敏感;对链霉素、麦迪霉素、头孢曲松中度敏感;对红霉素、青霉素、头孢呋辛等敏感。该菌含有磺胺类耐药基因sul1与卡那霉素耐药基因aadA1。结论:该分离菌具有较强的耐药性,携带有耐药基因sul1与aadA1。     

豫北地区猪源致病性大肠杆菌分离与鉴定

从豫北地区发病猪场采得144份仔猪黄、白痢检样，共分离出大肠杆菌63株，经血清学试验鉴定为O2 8株、O139 8株、O101 7株、O138 7株、O20 6株、O60 6株、O95株、O45 3株、O63 3株、O141 2株、O149 2株、O147 1株、O8 1株，另有4株未能定型，以O2，O139，O101，O138，O20，O60，O9等株血清型占优势。对不同分离株进行了药敏试验。本研究结果为豫北地区致病性猪大肠杆菌药物敏感性试验和多价灭活苗的制作提供了基础，对指导规模化养猪场大肠杆菌病综合防治模式的制定，对预防猪大肠杆菌病具有重要意义。     

猪链球菌分离株的分群鉴定及药敏试验

2001至2003年,从安阳、邯郸等6个地区采取180份猪的病料,从中分离到50株链球菌,对其中20株典型分离株进行了生化分群鉴定、兰氏分群A—G诊断试剂鉴定和药敏试验。结果表明,6个地区发生的猪链球菌病主要由C群(6/20),D群(4/20),E群(5/20)和G群(2/20)链球菌引起,其分布无明显地域性。药敏试验结果表明,对环丙沙星、强力霉素等高度敏感,敏感菌株达95%以上,可作为防治猪链球菌病的首选药物。     

鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

目的:从疑似禽霍乱的4只病死鸭的病料中分离并鉴定多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm),并通过药敏试验筛选敏感药物用于治疗。方法:无菌采集肝脏组织病料,接种至普通营养琼脂、麦康凯及血琼脂培养基上进行病原菌的培养、分离纯化;对纯化后的分离菌进行革兰染色、镜检,提取其核酸作为模板,进行16S rRNA基因的PCR鉴定;圆纸片扩散试验测定分离菌株对18种抗菌药物的敏感程度。结果:在血琼脂培养基上分离菌株表现为稍微隆起、表面光滑、湿润、灰白色、露珠样、半透明的圆形菌落,但在普通营养琼脂和麦康凯培养基上不生长。革兰染色镜检显示分离菌为一种革兰染色阴性、菌体两端着色深、中间着色较浅的球状短小杆菌。PCR扩增16S rRNA出现1 500 bp的目的条带,其序列分析与Pm菌株Q的16S rRNA基因的相似性为99.86%;药敏试验表明,分离菌株对米诺环素敏感性最高,抑菌圈直径达19 mm,对四环素、强力霉素、庆大霉素、氨苄西林、头孢哌酮表现中度敏感,其他药物均为耐药。结论:本研究从一例疑似禽霍乱的病死鸭中分离鉴定出1株多杀性巴氏杆菌,分离菌株对米诺环素较为敏感,建议用于临...     

豫北致病性猪大肠杆菌分离鉴定

从豫北56个发病场采得92份仔猪黄、白痢检样,通过鉴别培养基培养和生化试验,共分离出致病性大肠杆菌61株,经大肠杆菌O抗原鉴定,其血清型为O10115株、O6013株、O1418株、O1397株、O1385株、O93株,另有10株未能定型,优势血清型为O101,O60,O141,O139,占定型菌株的84.3%。本实验结果为豫北地区致病性猪大肠杆菌药物敏感性试验和多价灭活苗的制作提供了基础,对指导规模化养猪场大肠杆菌病综合防止模式的制定及预防猪大肠杆菌病具有重要意义。     

乳酸菌的分离、鉴定和驯化

我们用自己设计、筛选的培养基和菌种分离培养方法从南京、淮南、合肥和蚌埠等地生产的酸乳中筛选出优良酸乳生产菌株 ,并按伯杰氏细菌学鉴定手册和乳酸菌特有生理生化指标对其进行鉴定。在确认菌株菌名为嗜热链球菌和保加利亚杆菌情况下 ,按照生产南瓜酸乳需要 ,对菌种分别进行驯化。     

常见物质的分离、提纯、鉴别和鉴定

化学家要研究一种物质．首先考虑的是怎样从混合物中把这种物质分离出来，怎样提纯这种物质，然后进行定性和定量分析、检测，研究它的结构、组成和性质等。所以分离、提纯、鉴别和鉴定作为研究物质的重要实验疗法．一直是历年高考化学试题考察的重点和热点。     

七株鹅肠道沙门氏菌的分离鉴定、药敏试验及毒力基因、耐药基因的检测

目的:对2018-2019年7个批次送检的病死雏鹅的肝脏组织进行病原菌的分离鉴定、药敏试验、毒力基因,以及药物抗性基因的PCR扩增,为畜禽相关疾病治疗提供用药指导,并对其致病机理和耐药机制进行初步探讨.方法:用病死鹅的肝组织进行病原菌分离培养、形态观察、生化试验、药物敏感试验,并提取分离菌DNA模板、16S rRNA基因序列测定并进行同源性对比,并对其相关的毒力基因和耐药基因进行PC R扩增.结果:从上述试验中分离到7株肠道沙门氏菌.7株分离菌均表现多重耐药性.2株扩增出blaterm-1基因,3株扩增出baCMY-2基因,6株扩增出卡那霉素耐药基因aasA1,7株均扩增出磺胺类耐药基因sul1,均未扩增出喹诺酮耐药基因qnr,与药敏试验结果一致.毒力基因检测结果显示:4株扩增出肠毒素基因stn和菌毛素基因inv J,3株扩增出菌毛素基因sip A,均未扩增出毒力岛基因misL和毒力岛基因ss aB.结论:7次送检鹅死亡原因是肠道沙门氏菌感染引起的.7株分离菌均含有多种毒力基因及多重耐药基因.     

鹅副粘病毒的分离与鉴定

采用鸡胚接种法从安徽凤阳某患病鹅群中分离到一株病毒。经HA与HI试验、血清中和接种鸡胚试验、病毒回归试验确认为鹅副粘病毒，并命名为WF00G株，参照新城疫病毒毒力的判定的标准及其方法，测定该分离株的鸡胚最小致死量平均死亡时间（MDT）、1日龄鸡脑接种致病指数（ICPI）和6周龄鸡静脉内接种致病指数（IVPI）分别为44.8h、1.81和2.32，结果表明该分离株具有与新城疫病毒（NDV）速发型相类似的毒力，属强毒力毒株。     

鹅副粘病毒的分离与鉴定

采用鸡胚接种法从安徽凤阳某患病鹅群中分离到一株病毒。经HA与HI试验、血清中和接种鸡胚试验、病毒回归试验确认为鹅副粘病毒 ,并命名为WF0 0 G株。参照新城疫病毒毒力判定的标准及其方法 ,测定该分离株的鸡胚最小致死量平均死亡时间 (MDT)、1日龄鸡脑接种致病指数 (ICPI)和 6周龄鸡静脉内接种致病指数 (IVPI)分别为 4 4 8h、1 81和 2 32 ,结果表明该分离株具有与新城疫病毒 (NDV)速发型相类似的毒力 ,属强毒力毒株。     

稻叶中质体醌的分离鉴定和活性研究

从水稻叶片中分离出一种天然质体醌 :2 ,3-二甲基 - 5- (3′ ,7′ ,11′ -三甲基 - 2′,6′ ,10′ -十二碳三烯基 )苯醌 .并以波谱方法确定了结构     

致仔猪水肿病大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

从疑似仔猪水肿病病料中通过细菌分离、生理生化试验、动物试验和PCR试验,分离到了10株致仔猪水肿病的大肠杆菌.利用药物敏感性试验,对分离的10株大肠杆菌进行了耐药性检测,结果表明：10株大肠杆菌对2种抗生素都耐药,且许多菌株有多重耐药现象.     

土壤微生物分离纯化和分子鉴定实验研究

通过微生物学实验项目“微生物分离纯化和分子鉴定”的实施,在生物技术专业本科生中开展了土壤细菌的分离、纯化和鉴定实验。学生在老师的带领下从太行山采集了土壤样品,利用平板法进行了土壤中细菌、真菌和放线菌的分离、纯化,对分离纯化的细菌进行了16SrDNA序列分析,结果表明：该细菌为假单孢杆菌。学生通过野外采集土样,实验室分离纯化的实验过程,既锻炼了学生的实验动手能力,又培养了学生的学习兴趣,激发了学生的学习热情,加深了学生对微生物理论知识的理解,提高了学生的创新能力。     

常见微生物的分离与鉴定

在发酵工程中，首先要选育优良菌种，但由于微生物在自然条件下都是杂居混生的，因此要选育良种，就必须对其中的纯种微生物进行分离或鉴定。根据各类微生物的形态结构和新陈代谢类型，利用选择性培养基和鉴别性培养基，结合显微镜的镜检以及菌落的特征，可以把混杂在一起的微生物分离或鉴定出来。假若某一样品中含有大肠杆菌、硝化细菌、酵母菌、光合细菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌、乳酸菌微生物，你如何根据上述原理或方法，从理论上一一将其中的纯种微生物分离出来呢?     

实验室间比对病原菌分离鉴定质控考核分析

目的通过参加实验室间比对病原菌分离鉴定质控考核,提高实验室检测水平和对突发公共卫生事件处置的技术应对能力,保证检测结果准确、可靠。方法依据WS271-2007《感染性腹泻诊断标准》及GB/T 4789-2008《食品卫生微生物学检验》对模拟肛拭样品进行病原菌分离鉴定。结果检出小肠结肠炎耶尔森氏菌0：3型和福氏志贺氏菌2b亚型,考核结果为符合要求。结论实验室间比对质控考核病原菌菌株的鉴定应结合革兰氏染色镜检、生化试验和血清学分型综合判断结果。     

毒死蜱降解菌株的分离、鉴定及降解条件优化

目的：分离筛选出高效降解毒死蜱菌株,明确其生物学分类地位,并优化其降解条件.方法：采取平板划线和摇瓶复筛法从农药厂土壤样品中分离得到高效降解毒死蜱菌株,并通过16S rRNA序列测定和同源性分析对其进行鉴定;运用HPLC法检测降解菌株对毒死蜱的降解效果,研究其在不同培养基、接种量、温度及pH条件下的降解能力.结果：从农药厂土壤样品中筛选得到一株能够以毒死蜱为唯一碳源生长的高效降解菌株OP7,经16S rRNA基因序列聚类分析,将其初步鉴定为粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis).进一步的降解条件优化结果显示,菌株OP7降解毒死蜱的最佳培养基是10%LB、最适接种量为3%(v/v)、最适温度为35℃、最适初始pH为9.0.结论：本研究结果表明菌株OP7有望成为新的菌种资源并应用于环境中毒死蜱污染物的生物修复.