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相似文献
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1.
超嗜热菌Aquifexaeolicus亮氨酰-tRNA合成酶(αβ-LeuRS)是已知的唯一的双肽链LeuRS.通过αβ-LeuRS和大肠杆菌LeuRS相应肽段的重组和重组酶性质的研究发现,αβ-LeuRS的α亚基C末端36个氨基酸对于αβ-LeuRS的氨基酰化活力至关重要.αβ-LeuRS的两个亚基人为融合得到的单亚基酶SLeuRS-αβ,具有完全的野生型双亚基酶活力,其热稳定性显著增强.同时,通过亚基重组揭示了LeuRS对于不同种属的tRNALeu的识别元件位于α亚基内,而其中的CP1结构域不仅是LeuRS行使编校功能的结构基础,对于LeuRS识别不同种属来源的tRNALeu也是十分重要的.通过不同来源的LeuRS一级结构比较,克隆了单独的CP1结构域组成的肽(CP1),发现唯有A.aeolicusαβ-LeuRS的CP1对错误的氨基酰化产物具有体外编校功能.它与其他3种来源于细菌LeuRS的CP1都能够编校误氨基酰化的古老形式的亮氨酸小螺旋(minihelixLeu).通过同源序列比较发现,在αβ-LeuRS的CP1内存在一个由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它对CP1发挥体外编校功能必不可少,引入原本不具有体外编校功能的E.coli的CP1后则可使其获得编校功能,但是该模体不影响全酶的编校功能.αβ-LeuRS中与tRNA结合有关的亚基——β亚基也可以赋予E.coliCP1编校功能.这些研究结果充分表明,来源于古老的超嗜热菌A.aeolicus的αβ-LeuRS保留了进化的遗迹——具有编校活力的CP1和与其编校功能密切相关的由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它们在进化过程中随着其他结构域招募进合成酶中而逐渐失去了对全酶编校功能的作用.这一发现有力地支持了aaRS通过纳入新的结构域以加速进化过程的理论,并且也从不同角度为aaRS/tRNA共进化理论提供了可靠的依据.  相似文献   

2.
第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1 和tRNALeu2 ,研究tRNA与亮氨酰 tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高 1 0倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入 40个氨基酸残基的变种LeuRS A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA Leu1 和tRNA Leu2 接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS A识别的关键.  第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因 1 0倍以上.研究了它的α 亚基的N 端变化(LAEP →MGIP )对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N 端亲和水解的酰化酶  相似文献   

3.
第一部分为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1和tRNALeu2,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA Leu1和tRNALeu2接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶.  相似文献   

4.
氨基酰-tRNA合成酶及其与相关tRNA的相互作用研究   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
氨基酰tRNA合成酶是生物体蛋白质合成过程中的一类关键酶 ,对它的研究具有重要的生物学意义和应用前景。该项目系统研究了大肠杆菌亮氨酰 和精氨酰 tRNA合成酶及其与相关tR NA的相互作用。用酶和tRNA的基因克隆和高表达 ,tRNA体外转录 ,基因定点突变 ,酶片段的体外重组等手段研究了酶与tRNA的相互作用的结构基础 ,得到一系列重要结果。  相似文献   

5.
《中国科学院院刊》2010,(2):222-222
上海生科院生化与细胞所下恩多研究组继2000年和2009年证明了亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)具有转移后和不依赖tRNA转移前的编校功能后,最近该研究组的谭敏、朱斌和周小龙.利用点突变和新开发的LeuRS的小分子抑制剂AN2690,  相似文献   

6.
刘艳彬  袁平 《科研管理》2012,33(8):25-34
随着企业与顾客之间互动的不断增强,以顾客为中心的时代正在来临,互动导向将成为企业在互动环境下获取持续竞争优势的重要战略选择。本文将市场环境和战略类型两个重要变量引入到互动导向的理论架构中,并以酒店服务业为例,实证检验了互动导向、市场环境、战略类型与企业绩效之间的关系。研究结果表明:互动导向对企业绩效具有显著的正向影响;市场环境对互动导向与企业绩效之间的关系具有部分调节作用;战略类型对互动导向与企业盈利绩效之间的关系具有显著调节作用。研究结论不仅进一步完善了互动导向理论,同时也为服务业互动导向的实施提供了重要的理论依据。  相似文献   

7.
《Research Policy》2019,48(9):103799
Interdisciplinary research (IDR) has raised increasing expectations among scholars and policymakers about its potential to produce ground-breaking scientific contributions and satisfy societal demands. While existing research highlights that novel connections across fields is beneficial for scientific contributions with high academic impact, comparatively less is known about whether IDR is positively associated to scientists’ engagement with non-academic actors. To investigate this, we examine whether there is a systematic relationship between scientists’ IDR-orientation and their interactions with industry. We conceptually distinguish four stylized modes of interaction (firm creation, technology transfer, co-production and response modes) and employ three distinct indicators of IDR. We use data on 1,170 scientists affiliated to public research organizations in Spain, bibliometric dataset of scientists’ publications, and details of scientists’ past involvement in interactions with industry. Our results show that IDR has a transversal influence on all four modes. However, IDR-oriented scientists are more strongly associated to transactional (market-mediated) compared to relational (personal-based) interaction mechanisms; while we find no evidence of a significant difference between IDR-oriented scientists and their propensity to engage in different modes of U-I interaction according to the degree of goal specificity.  相似文献   

8.
陈钰芬  叶伟巍 《科学学研究》2013,(2):266-275,285
利用外部知识实现创新已经成为我国企业创新实践的常用策略。究竟内部R&D和外部知识搜寻之间存在怎样的关系,过多的外部知识搜寻是否会削弱企业内部R&D的战略性地位?本文基于209家中国创新型企业的问卷调查数据,对企业内部R&D活动和外部知识搜寻之间的关系进行了实证分析。研究结果表明外部知识搜寻对提升企业创新绩效有重要影响,但是不同类型的外部合作对象对创新绩效的重要性存在差异。研究发现,企业在创新实践中,内部R&D和纵向合作企业与横向合作企业知识搜寻之间存在互补协同的关系,但没有充分的证据表明内部R&D和大学/研究机构知识搜寻之间存在互补性。内部R&D和外部知识搜寻之间存在互补抑或替代的关系,主要受企业对外部知识吸收能力的影响。  相似文献   

9.
以溶解或循环形式存在于机体血清及其它体液中的可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)的重要生物学功能是,与膜型ICAM-1竞争性地结合白细胞膜表面的LFA-1、Mac-1等分子,参与机体的免疫调节,从而与肿瘤的发生、发展和转归密切相关。本文综述了sICAM-1的来源、结构、功能及其与肺癌的相互关系。  相似文献   

10.
A number of different uniquenessclaims have been made about computer ethics inorder to justify characterizing it as adistinct subdiscipline of applied ethics. Iconsider several different interpretations ofthese claims and argue, first, that none areplausible and, second, that none provideadequate justification for characterizingcomputer ethics as a distinct subdiscipline ofapplied ethics. Even so, I argue that computerethics shares certain important characteristicswith medical ethics that justifies treatingboth as separate subdisciplines of appliedethics.  相似文献   

11.
目的为了研究冠心病发病的机制. 方法测定了16例正常人血清胰岛素样生长因子1(IGF1)水平和40例冠心病患者血清IGF1水平,且把冠心病患者血清IGF1水平与冠脉造影的血管病变支数进行了比较分析. 结果冠心病患者外周血IGF1水平显著低于正常人(分别为27.23±15.48 μg/L和48.02±33.43 μg/L,P<0.01);且在冠脉造影血管病变支数增加时其血清IGF1水平下降变得更加明显. 结论 IGF1可能参与了冠心病的病理生理过程.  相似文献   

12.
Literature on innovation policy reveals little of how relations between government agencies as policymakers evolve. Taking the policy network approach, this paper investigates three mechanisms underlining the evolution of inter-government agency relations in emerging economies – policy agenda, power concentration and heterogeneity dependence, and applies them to the analysis of the evolution of innovation policymaking in China. Operationally, the paper proposes a social network analysis (SNA)-based method to quantitatively study China’s innovation policy network, which consists of 463 innovation policy documents formulated by its central government ministries between 1980 and 2011. The findings show that the formal policy network for innovation has been not only sustained through the intervention of policy agendas but also self-organized because of policy network’s nature of power concentration and heterogeneity dependence. The presence of such mixed mechanisms in China’s innovation policy network’s evolution differs from the findings from industrialized countries where self-organization plays a central role. This work advances our theoretical understanding of the evolution of innovation policy network and has implications for innovation policymaking in emerging economies.  相似文献   

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