Enhanced production of thermostable laccases from a native strain of Pycnoporus sanguineus using central composite design

研究目的：优化获得血红密孔菌（P.sanguineus）的最佳培养基组成,提高耐热漆酶的产量。创新要点：获得了目前文献报道的最高水平的漆酶活力。研究方法：通过单因素试验研究了不同培养基（番茄汁、麦麸、麦芽提取物和葡萄糖细菌蛋白胨培养基）和不同组合诱导剂（大豆油、阿魏酸、没食子酸、二甲基苯胺、酸性蓝62和活性蓝19分别与硫酸铜组合诱导剂）对P.sanguineus产耐热漆酶的影响。在此基础上采用中心组合试验设计,进一步研究了番茄汁培养基结合硫酸铜和大豆油组合诱导剂对P.sanguineus产耐热漆酶的影响。利用SAS10.0和响应面分析方法对试验结果进行了统计分析和建立回归模型。重要结论：通过中心组合设计优化得出P.sanguineus产耐热漆酶的最优培养基条件：以36.8%番茄汁为培养基,以3 mmol/L硫酸铜和1%大豆油作为组合诱导剂。该条件下在10 L搅拌槽生物反应器中漆酶活力达到了143 000 IU/L（2,2＇-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）为底物,pH值为3.0）。