一种自制简易DNA凝胶电泳装置

用生活中简单常用并且成本较低的材料制作凝胶电泳装置,对DNA进行电泳,从而为提取DNA和制作电泳装置相关课题提供参考。     

琼脂糖凝胶电泳装置及方法的改进

对现有的琼脂糖凝胶电泳装置进行了改进.以有机玻璃板等材料,制作出一套成本低廉、结构简便的琼脂糖凝胶电泳装置.经试用,具有操作简便、提高缓冲液的利用率、节约实验经费等优点,能够满足教学与科研的需要.     

高中生物电泳相关知识解题归类

正凝胶电泳技术在亲子签定、公安侦破案件、生物亲缘关系远近、DNA指纹技术等各方面运用已经非常普遍.只要提供血迹、毛发、骨骼碎片、精斑等组织或分泌物,就能通过凝胶电泳技术,用一种探针寻找DNA的不同部位并形成独特的条码进行基因比对,从而达到DNA签定的目的.电泳技术与分子的物理性质有关,如分子量或分子大小、形状、等电点等.高考命题注重能力考查,强调新情境与能力立意相结合,往往起点高,落点低,重在考查学生对情境信息获取和处理,进一步考查     

DNA分子的结构形式

中学生物学教材涉及到DNA分子的两种结构形式，一种是线形双螺旋分子，一种是环形双螺旋分子。DNA作为生物体内的主要遗传物质，是整个遗传学的基石，其有多种结构形式：既有单链的，也有双链的；既有线状的，也有环状的；既有闭合环，也有缺口环；既有超螺旋型，也有松弛型，且各形式之间可以发生一定程度的转化。同一DNA分子的不同结构形式，由于其构象的不同，在利用氯化铯密度梯度离心时，其沉降速率有很大的差异，各自有不同的沉降常数；若利用琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳，同一DNA分子的不同形式，其迁移速率也有快慢之分。下面对常见的DNA分子形式及其转化作一介绍。     

以单细胞凝胶电泳技术检测氟对L-02细胞DNA的损伤作用

目的:探讨氟对人胎肝细胞(L-02细胞)DNA的损伤作用。方法:采用40μg/ml、80μg/ml和160μg/ml氟化钠对培养的L-02细胞进行染毒,24小时后用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测氟化物对L-02细胞的DNA损伤情况。结果:各染氟组人胎肝细胞DNA损伤率明显高于对照组,Ridit值得分别为0.5815、0.8145和0.8923;同时,高剂量氟组与低剂量氟组之间细胞DNA损伤率之间也存在显著性差异(P<0.05)。结论:氟化物可导致L-02细胞DNA损伤,并呈现一定的剂量-反应关系。     

四膜虫细胞凝胶电泳评价环境污染方法的研究

单细胞凝胶电泳被广泛应用于遗传毒理学、DNA损伤与修复的检测、环境污染检测、细胞凋亡机制的研究等诸多领域。四膜虫是一种真核单细胞原生动物，对环境中有毒物质的毒性反应敏感，是环境污染早期预报的理想指示物种。目前已作为标准检测生物被广泛应用于毒性检测、细胞凋亡和水质检测中。本文探讨将四膜虫作为简单的模型细胞，与检测DNA损伤与修复极敏感的单细胞凝胶电泳结合起来，通过改进方法，建立一种更为灵敏、快速、简便、经济的环境污染评价方法。     

高中PCR与凝胶电泳实验教学的探索与改进

PCR及凝胶电泳检测是新课程高中生物学选修模块的实验,两个实验全程都需要很长的时间以致无法在课堂教学时间内完成。充分利用分子生物学实验室的空间布局和相关仪器分布及使用特点,通过预实验对实验程序进行探究和改造,较好解决了这一问题。     

利用表面力仪研究单链DNA在云母表面的吸附与解吸附特性（英文）

利用表面力仪(SFA)研究了单链DNA分子在云母表面的吸附与解吸附特性,获得了在特定缓冲液环境中,云母表面吸附的单链DNA分子层的精确厚度、几何结构及力学特性.首先,通过改变单链DNA的浓度,研究了不同浓度条件下云母表面吸附的单链DNA分子层的几何结构.此外,通过比较不同缓冲液中测得的力-距离曲线,研究了单链DNA分子的解吸附行为.结果表明:当单链DNA浓度为100 ng/μL时,其在云母表面吸附形成单分子层,该单分子层的厚度约为1.04 nm;而当10 mmol/L的单价阳离子(Na~+)加入到缓冲液中时,原本吸附在云母表面的单链DNA分子发生了解吸附现象,进一步分析表明,单价阳离子与高价阳离子之间的竞争效应是引起单链DNA分子解吸附的根本原因.本研究为进一步研究单链DNA分子在无机基底表面的吸附机理提供了实用方法.     

小黑麦种子醇溶蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究

在国际种子检验协会(ISTA)颁布的小麦种子醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定品种的标准程序的基础上,对溶剂、凝胶溶液、电极缓冲液、电泳方式等影响电泳效果的主要因素进行了研究和改良,使该技术适用于小黑麦的种子醇溶蛋白分析,并且具有操作简单,剥胶容易,分辨率较高等优点.     

细胞DNA单链断裂检测技术

从检测的原理、局限性和影响因素等方面对几种主要的DNA单链断裂的检测技术包括快速沉降技术、碱性解旋、碱性洗脱和单细胞凝胶电泳进行了综述，重点介绍了单细胞凝胶电泳的产生和发展、检测范围和影响因素，为检测DNA损伤程度提供了依据。     

不同保存条件下培养细胞中DNA完整性分析

比较不同方法保存培养的人胃癌SGC7901细胞,用QIAGEN DNA提取试剂盒提取DNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA提取效果,找到一种简便、经济的保存方法.结果显示,0.85%NaCl和细胞保存液保存5 d的效果好,而0.85%NaCl更经济实用.     

玻璃珠法提取堆肥微生物总DNA及其DGGE分析

采用玻璃珠法从高温堆肥样品中进行了微生物总DNA的提取,以细菌16S rRNA基因 V3区通用引物进行了PCR扩增,随后用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对其微生物多样性进行评估.结果表明,玻璃珠法能够快速、有效地获得高质量的堆肥微生物总DNA,所得的DNA分子片段在15kb以上,使用细菌16S rRNA 基因通用引物(27F和1492R)对总DNA进行PCR扩增,获得了近全长的16S rDNA序列(约1.5kb);DGGE分析结果表明,用该方法提取到的DNA种类较为丰富,多样性较好,能够进一步应用于群落结构分析.因此,玻璃珠法提取的DNA可以用于堆肥微生物的分子生态学研究及微生物群落结构分析.     

乙草胺对四膜虫DNA损伤研究

以原生动物嗜热四膜虫（Tetrahymena thermophila）为靶生物,不同浓度乙草胺溶液处理,绘制生长曲线和进行单细胞凝胶电泳实验.结果表明1.0 mg/L的乙草胺对嗜热四膜虫的生长影响不明显（微促进）;而在3.0mg/L与5.0mg/L的乙草胺处理下,嗜热四膜虫生长受到明显抑制,随着乙草胺浓度的上升,抑制作用增强.采用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）,研究不同浓度的乙草胺溶液对嗜热四膜虫核DNA的损伤作用.结果表明,随着乙草胺浓度的升高,尾长、TM和OTM均呈上升趋势,说明乙草胺对嗜热四膜虫核DNA损伤具有明显的浓度效应.采用嗜热四膜虫来监测农药乙草胺对低等水生动物的生长的影响具有一定的可行性.     

山西省沙棘品种AFLP的初步分析

沙棘体内酚类物质和蛋白质含量较高,影响了基因组DNA提取的产量。采用改良CTAB法对观光木基因组DNA进行提取,经过紫外吸收、琼脂糖凝胶电泳、双酶切和AFLP标记检测,结果表明:改良CTAB法提取的基因组DNA吸光值OD260/OD280为1.7～1.9,DNA无降解现象和杂质污染;基因组DNA双酶切彻底,并且APLP扩增的条带较多而且清晰。从而建立了适合沙棘AFLP分子标记的反应体系,为利用AFLP标记对沙棘进行分子生物学研究及分子育种奠定了基础。     

癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析非变性蛋白质分子量的适用性鉴定

目的:鉴定癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDecS-PAGE)是否适于分析非变性蛋白质的分子量。方法:以不同SDecS-PAGE凝胶、电泳缓冲液分析5种非变性标准分子量蛋白质,观察蛋白质亚基解离情况,测定分子量对数值(log Mr)与迁移率x之间的相关性。结果:5种标准分子量蛋白质的四级结构完整,log Mr与x线性相关性较低;但其中的α-牛乳白蛋白、鸡蛋清白蛋白、牛血清白蛋白的log Mr与x线性相关性较好,相关系数平方值(R2)>0.94。结论:SDecS-PAGE可用于测定有限种类的非变性蛋白质的分子量。     

桑叶及桑白皮对老龄小鼠脾细胞DNA氧化损伤的影响

目的:研究桑叶及桑白皮提取对老龄小鼠脾细胞DNA损伤的影响,为桑叶及桑白皮的保健抗氧化功能提供实验依据.方法:采用自然衰老小鼠模型,用单细胞凝胶电泳法测定小鼠脾组织细胞DNA氧化损伤的程度.结果:一定剂量的桑叶及桑白皮提取物可以清除DPPH自由基,抑制小鼠心肌匀浆中MDA的生成,并呈现出一定剂量——效应关系。结论:桑叶及桑白皮提取物能够减轻老龄小鼠脾细胞DNA的损伤程度,从而达到延缓衰老的目的.     

“重组DNA分子模拟操作”的创新改造及教学建议

为了解决学生的疑惑,并提升学生自主探究的能力,将人教版选修3教材中"重组DNA分子的模拟操作"实验进行了创新改造并提出了相关教学建议。改造后的实验具有材料优化、模拟深化、对比强化等优点,并对后续教学具有更强的影响力。     

最小支撑树的DNA凝胶电泳算法

DNA计算是解决困难问题的一种很重要的方法。应用DNA计算解决图论中的最小支撑树问题。利用DNA的热力学特性,根据边的权长不同,给它们设计不同溶解温度的DNA链。根据温度的不同,电泳时DNA分子的形状不同,电泳的速度也不同,从而根据电泳速度分离出最小支撑树的所有边。在这里给出了5个顶点的赋权图为例来求它的最小支撑树,说明了该方法的简便性。     

影响聚式酶链式反应实验效果的基本因素

研究聚式酶链式反应(PCR)实验中影响其扩增效果的多种因素,寻求反应体系中理想的各因素浓度配比。选取含5+10优质亚基的小麦品种为材料,以特异扩增1DX5基因PCR实验为例,从模板DNA、引物终浓度、Taq酶、二价镁离子、4dNTPs混合液、缓冲液浓度几方面入手,通过设计梯度实验,研究不同因素对PCR扩增效果的影响。结果表明,反应体系6个基本因素,缺少任何1个都扩增不出产物。在反应总体积25μL的PCR反应体系中,模板DNA选用32 ng/μL,Mg2+终浓度2 mmol/L,Taq酶1.2 U/25μL,引物0.8μmol/μL,4dNTPs0.3 mmol/L,缓冲液1×buffer最为合适,能扩增出理想的结果。     

“DNA的复制”教学中常见的3个误区

<正>在高中生物学教学体系中,DNA的复制属微观研究范畴,具有较强的抽象性和复杂性。在教学过程中,笔者发现,人教版高中《生物·必修2·遗传与进化》教材对DNA复制的介绍较为简单,只是简单地描述了DNA分子复制、转录、翻译的整体过程,而没有详细的分析及研究DNA分子复制过程中原料、能量