重组质粒pRSET DNA纯化方法的比较

分别采用柱式小量质粒抽提纯化试剂盒和聚乙二醇沉淀法纯化重组质粒pRSET DNA,琼脂糖凝胶电泳和DU800核酸蛋白分析仪鉴定已纯化的重组质粒pRSET DNA的纯度.结果显示,采用聚乙二醇沉淀法纯化重组质粒pRSET DNA:A260/280=1.83,试剂盒所得结果:A260/280=1.91.与试剂盒相比,聚乙二醇沉淀法获得纯化质粒的纯度没有显著性差异,常规质粒纯化实验中可用此法代替昂贵的试剂盒.     

重组质粒pRSET DNA提取方法的探究

通过两种从大肠杆菌中提取重组质粒pRSETDNA不同方法的比较,寻找提取重组质粒pRSET DNA的切实可行的方法.将含有目的质粒的菌株分别采用SDS碱裂解法和煮沸法进行质粒DNA小量提取,采用DU800核酸蛋白分析仪测定质粒DNA的产量及纯度.结果SDS碱裂解法获得质粒DNA产量为5.61 μg/ml菌液,A260/280=1.95;煮沸法获得质粒DNA产量为4.36μg/ml菌液,A260/280=1.78.与煮沸法相比,SDS碱裂解法获得质粒产量更多,纯度更高,更适合分子生物学常规实验的要求.     

质粒DNA提取方法的比较

以含有原核表达载体pet21a和真核表达载体EGFP的DH5α系列菌株为材料,分别采用碱裂解法和试剂盒提取法提取质粒DNA,通过凝胶电泳分析,对两种质粒提取方法的各自特点进行了比较与分析。认为碱裂解法和试剂盒提取法提取质粒DNA均可进行后续试验,但试剂盒提取法具有省时、简洁、高效的优势。同时根据在实验过程中所遇到的问题,说明了在进行质粒DNA提取过程中应当注意的问题。     

小量提取质粒DNA的简易方法

碱裂解法是目前最为广泛应用的质粒DNA的提取方法,本人利用0.9%NaC l溶液代替常规方法中的溶液Ⅰ,并缩短了一些步骤的反应时间,既达到了快速、简便提取质粒DNA的目的,又可以满足分子生物学后续实验的要求.     

质粒DNA提取及电泳检测实验改革

为进一步增强学科间的交叉与渗透,提高学生灵活运用多学科知识与方法的能力,对质粒DNA提取及电泳检测实验进行改革。在改进经典碱裂解法提取质粒DNA、琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA的基础上,新增试剂盒方法提取质粒DNA、超微量分光光度计检测质粒DNA以及快速单酶切鉴定质粒DNA等实验内容。改革后的实验不仅促进经典与现代技术、方法的有机结合,而且增强学科间的相互融合,取得了良好的教学效果。     

优化的密度梯度离心法提取质粒 DNA

质粒常被用做基因的载体．纯化质粒DNA的方法可以分为3种：碱裂解法、煮沸裂解法和SDS碱裂解法．这些方法可以纯化共价闭合环结构质粒DNA,而大量获得高纯度的闭环结构质粒DNA最经典方法是氯化铯．溴化乙锭密度梯度离心法．该方法经过我们的实践与优化,减少了质粒中蛋白质和基因组DNA的污染,提高了质粒的纯度和得率,所得到的质粒用于拟南芥原生质体转化,效率高达60％～70％,明显高于普通的质粒小量抽提试剂盒所提取的质粒DNA．     

质粒DNA快速提取法在基础课实验中的应用

本文对质粒DNA及其结构、形态和功能进行了综述，介绍了快速提取质粒DNA的基本步骤，并对其提取过程中的注意事项进行了剖析，分析了该方法的优点。     

紫外照射对大肠埃希氏菌质粒DNA影响的研究

本研究对大肠杆菌进行紫外照射诱变后,获得了通过其内部的SOS修复系统产生的突变菌株,采用异丙醇沉淀法对各组菌种进行质粒DNA提取.通过测定各组OD值,经过比较与分析得出了经紫外处理10min后的大肠杆菌质粒DNA浓度最高,为215ug/ml,其次为正常组的190ug/ml.经紫外照射30min后的大肠杆菌质粒DNA浓度最低,仅为65ug/ml.紫外处理时间与质粒DNA浓度整体呈现下降趋势.初步推测是由于大肠杆菌SOS修复系统的RecA蛋白促进了不完全同源的DNA序列之间的重组,产生大量的错配碱基,从而引起突变,进而影响到其质粒DNA的浓度.     

一种简易提取细菌质粒DNA的方法

对常规碱裂解法小量提取细菌质粒DNA的方法进行了改进,用生理盐水代替溶液Ⅰ重悬菌体,简化了试剂配制的过程,既经济又省力.利用该方法获得的质粒DNA的量及纯度与常规碱裂解法获得的质粒DNA基本一致,完全可以满足基因工程基础实验的要求.此实验是比较适合中学实验室的学生实验,有利于基因工程实验在中学教学中的普及.     

重组质粒在洋葱表皮细胞的转化

采用基因枪法,将SCaM4-Citrine、PepA-mRFP和ECBP21-mRFP 3种融合蛋白基因转化到洋葱内表皮细胞.同时,将SCaM4-Citrine、PepA-mRFP基因以及SCaM4-Citrine、ECBP21-mRFP基因分别等量混合,共转化入洋葱内表皮细胞,23℃光照培养18~22 h,利用激光共聚焦显微镜可观察到大量融合蛋白的表达,基因枪转化技术获得成功.并发现,对于洋葱表皮细胞来说,幼嫩部分的细胞转化率比老的高,并且枪击压力为7 580 kPa或9 300 kPa时为最适压力.     

植物病毒抗血清的制备及IgG纯化与酶标技术研究

以烟草花叶病毒（TMv）为例研究了制备植物病毒抗血清的一般方法．以家兔和小白鼠为免疫动物，运用饱和硫酸接沉淀法制备出高效价的兔和瓦抗TMV血清，并运用先进的ELISA方法测定了抗血清中抗体IgG的效价；用醋酸纤维凝胶电泳技术分析了抗血清中抗体的lgG纯度，应用免疫双扩散法检测了提纯的IgG的生物活性．同时还运用成二醛一步法制出高结合率的IgG与过氧化氢酶（HRP）标记的抗体，形成了一整套制备抗血清、纯化IgG并对IgG进行酶标的技术，为植物病毒检测提供了快速简便的方法．     

质体醌的合成研究

异成烯醇在KHSO_4的作用下,与苯醌发生作用,合成了含有异戊烯基的质体醌。其结构由紫外光谱,红外光谱,核磁共振谱得到证实。     

凤眼莲铜锌超氧化物歧化酶的纯化及几种化合物对其活性的影响

通过氯仿-乙醇处理、第一次丙酮沉淀、热处理、第二次丙酮沉淀和DEAE-纤维素层析将凤眼莲Cu.Zn-SOD纯化到均一程度。同时研究了脲、NaF、As^3 等溶液对酶活性的影响,结果表明：Cu.Zn-SOD对脲、NaF、As^3 等不敏感。     

水的净化与磁化方法综述

本文提出了水的净化处理对人们生活和生产的重要性,对水的净化或代化处理的多种方法作了综述性介绍,对本地区农村家庭水柜的净化处理的做法提出了建议,并就其它一些有关水的处理方法及其应用的问题提出了看法。     

浅析债务重组的原因和方法

企业债务重组是目前企业改革的一项措施，如何正确理解债务重组的含义、掌握其特点和方法，是做好会计实务，保证企业改革顺利进行的关键。     

论人治、息讼和宗族意识对法治观念形成的消极影响

法治的建立受多方面因素的影响,其中,法治观念的形成尤为重要,是建立法治的民众基础。笔者试图通过对封建传统文化中对法治的建立起制约作用的人治、息讼和宗族意识的分析,以引起民众的普遍关注,从而自觉抵制封建残余思想,加快法治的进程。     

论毛泽东调查研究的特点

毛泽东的调查研究具有四个显著特点：一是长期不懈地深入实际调查研究达50年之久；二是在广泛的调查研究中尤其注重对农村的调查研究；三是在调查研究中多采用典型调查和开调查会的方法；四是社会调查与文章写作紧密结合。这些特点贯穿于毛泽东调查研究活动的三个主要时期，与毛泽东一生的事业密不可分。     

对在体育科研中应用数学方法的几个问题的思考

指出了体育科学研究应用数学方法所面临的困难；对应用中存在的5个方面的问题：（1）体育科学的方法论基础较弱；（2）体育理论抽象化程度不高；（3）数学方法应用仍处于数理统计水平；（4）对体育本质的认识还存在不确定性；（5）数学基础理论教育还未跟上，进行了分析。最后，展望了在体育科学研究中应用数学方法的前景。     

激光对DNA分子的非线性作用效应的混沌行为分析

本文对第一作者提出的激光－ＤＮＡ相互作用方程的非线性混沌行为进行了解析分析和数值分析，将有助于对激光的生物遗传诱变效应的解释．