农杆菌介导ThNHX1基因转化烟草的研究

实验中,试图以烟草叶片为转化受体,采用根癌农杆菌介导法,将盐芥Na+/H+逆向转运蛋白基因(ThNHX1)转入烟草,获得去除卡那霉素抗性基因,仅含有转ThNHX1耐盐基因的烟草苗,并对影响遗传转化的一些关键因素进行了研究。结果表明,对6株转基因植株进行了PCR分子检测,从凝胶照片中可以看到,转基因烟草株系中有一棵烟草苗的卡那霉素抗性基因条带已不存在,但ThNHX1耐盐基因仍然存在,结果表明该苗即为仅含有转移ThNHX1耐盐基因的烟草苗。     

GUS基因和NPTⅡ基因表达的相关性及其在转基因棉花检测研究中的应用

利用农杆菌介导转化法,将含有35s启动子驱动NPTⅡ基因和Gus基因以及棉纤维特异表达启动子E6驱动目的基因FB的植物表达载体转入到常规棉花R15中．重点分析了Gus基因和NPTⅡ基因在愈伤诱导阶段．T0代及T1代转基因棉花中的表达情况综合两个基因的表达来进行转基因棉花的阳性鉴定．可以为转基因棉花后代的纯合选育提供双重保障7个转基因株系选育到T3代共获得株行51个．卡那霉素检测多数株行阳性率在90％以上．其中21个株行阳性率达100％.