黑曲霉Aspergillus nigerS菌株所产β-葡糖苷酶 的纯化和酶学性质

利用黑曲霉Aspergillus niger S菌株, 通过液体发酵的方法, 得到了一种可同时高效水解大豆异黄酮糖苷成大豆异黄酮,水解白藜芦醇苷成白藜芦醇的糖基水解酶.该酶经硫酸铵分级沉淀、离子交换层析及分子排阻色谱纯化得单一条带, 经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该酶的表观分子量约为165ku 1u=1.660540×10^-27kg。 ,比通常所报道的传统β-葡糖苷酶都大,该酶的最适反应温度为50℃; 最适pH值为5~10.     

谷氨酸菌体蛋白酶解酶的筛选

为了给企业选用蛋白酶酶解谷氨酸菌体蛋白提供参考,对木瓜蛋白酶、β-葡聚糖酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶等8种酶在最适酶用量、水解时间、水解温度、PH值条件下,分别研究其对谷氨酸菌体蛋白的水解效果并进行感官评价.结果表明:(1)风味蛋白酶的水解效果最好,水解度为21.26％,水解后的氨基氮含量最高,115.4mg/100mL;(2)风味蛋白酶的水解液感官评价分值最高,为17.2.     

人血凝块DNA三种提取方法的比较

采用高盐法、硅珠法、改进的经典酚抽提法三种方法提取人血凝块DNA,通过紫外分光光度仪及琼脂糖凝胶电泳测定DNA的纯度和含量.实验结果表明,硅珠法提取时间快,所提取的DNA含量高;经典酚抽提法操作过程简单,但用有机溶剂提取,污染比较严重;高盐法提取要用大量的血凝块,且提取的DNA含量很不稳定.因此,硅珠法是提取人血凝块DNA的一种比较好的方法.     

采用新萃取方法的PP-b-PE的研究

采用独特的二次溶解和沉淀的萃取方法,将PP-b-PE中的不可溶物与可溶物分离,并通过¹³C-NMR,DSC,FT-IR进行结构与性能的研究.     

猪血浆中凝血酶、免疫球蛋白等功能蛋白的联合提取

实验对猪血浆中白蛋白、免疫球蛋白、纤维蛋白原及凝血酶等功能蛋白进行了联合提取。通过对各步骤中蛋白的检测确立了一套有效的联合提取方法：将柠檬酸钠抗凝的血浆经冻融处理,离心得到纤维蛋白原沉淀,上清通过吸附法提取凝血酶后再经盐析法分离提取白蛋白及免疫球蛋白。1L血浆可同时提得白蛋白31.41g、免疫球蛋白13.86g、凝血酶粗品0.22g（比活力为38.5U/mg）、纤维蛋白原为2.67g。     

大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNALeu的相互作用 头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组

第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNA^Leu₁和tRNA^Leu₂,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNA^Leu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNA^Leu₂种等受体的识别,证明了tRNA^Leu₁和tRNA^Leu₂接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶.     

高强度间歇训练对不同类型肌纤维代谢与分布的调节*

目的：探讨急性（1次）和长期（8周）高强度间歇训练（HIT）对SD大鼠不同类型骨骼肌纤维代谢与分布的影响。方法：30只雄性SD大鼠随机分为安静对照（r-C）组、急性HIT（a-HIT）组和长期HIT（c-HIT）组,每组n＝10只。a-HIT组进行1次急性HIT,c-HIT组进行8周HIT,r-C组保持安静状态。实验后分离胫骨前肌（快肌,II型肌纤维为主）和比目鱼肌（慢肌,I型肌纤维为主）,比色法测定琥珀酸脱氢酶（SDH）和乳酸脱氢酶（LDH）活性,ATP酶染色法鉴定肌纤维类型（I、II）,Western Blot法测定腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）α亚基（AMPKα）、磷酸化AMPKα（p-AMPKα）、p38促分裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、p-p38 MAPK、钙调神经磷酸酶（CaN）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ 辅激活因子1α（PGC-1α）、激活T细胞核因子（NFAT）c1亚基（NFATc1）蛋白相对表达量以及肌球蛋白重链（MHC）亚型（I、IIa、IId/x和IIb）百分构成比。结果：与r-C组比较,a-HIT组比目鱼肌和胫骨前肌糖原含量均下降（P<0.05）,p-AMPKα/AMPKα、p-p38 MAPK/p38 MAPK、CaN、PGC-1α和NFATc1蛋白表达量升高（P<0.05）;c-HIT组力竭时间延长（P<0.05）,胫骨前肌LDH活性升高,比目鱼肌和胫骨前肌糖原含量、SDH活性以及PGC-1α和NFATc1蛋白表达量升高（P<0.05）,比目鱼肌IIa型和IIb型肌纤维比例减少（P<0.05）,I型肌纤维比例增加（P<0.05）,胫骨前肌IIb和IId/x型肌纤维减少（P<0.05）,IIa和I型肌纤维增加（P<0.05）。结论：一次急性HIT可同时募集快肌和慢肌纤维并激活多种信号转导通路;而长期HIT则提高快肌中I型和IIa型肌纤维以及慢肌中I型肌纤维比例,上调快肌和慢肌糖原含量和有氧代谢酶活性以及快肌无氧代谢酶活性,最终改善运动能力。     

高二化学实验分析与实验教法建议 第三章 化学平衡 电离平衡

化学平衡和电离平衡原理,是中学化学重要基础理论之一。在现行中学化学教材中,有一个平衡理论体系,它包括“溶解平衡”、“化学平衡”、“电离平衡”和“水解平衡”等。其中化学平衡是这一平衡理论体系中的核心。通过“化学平衡”的学习,既使学生对“溶解平衡”理论加深理解,又为学习“电离平衡”、“水解平衡”等理论奠定了基础。教材中的一些重要原理和规律,都是建立在实验基础上的。例如,外界条件对化学反应速度和化学平衡的影响等,做好这部分演示实验,不仅能帮助学生获得知识,而且还能培养学生根据实验事实,进行分析、综合、归纳的能力…     

土壤中淀粉酶产生菌的筛选

利用平板透明圈法,从高黎贡山百花岭地区土壤中筛选到23株产淀粉酶的菌株,它们在淀粉选择平板上都产生明显的淀粉水解透明圈.23株菌的水解圈直径与菌落直径之比约在1.9-5.5之间.这些产淀粉酶菌株的获得为进一步研究淀粉酶的酶活性、产酶条件优化等相关性质奠定了一定的基础.     

污水处理系统中肠出血性大肠杆菌O157噬菌体的分离及其生物学特性

采用双层平板法从污水处理厂曝气池中分离出一株肠出血性大肠杆菌O157强裂解性噬菌体,命名为PO157-Z。通过透射电镜、基因组酶切以及最佳感染复数、裂解曲线和酸碱耐受性等生物学特性测定分析发现:噬菌体PO157-Z头部呈正六面体的立体对称结构,直径约70 nm,尾部较短,长和宽均约10 nm.EcoR I酶切表明,其核酸类型为dsDNA.该噬菌体的最佳感染复数为0.01,其对酸碱耐受性较好,且耐受范围较宽.此外,对宿主菌的裂解曲线进一步表明,其对大肠杆菌O157具有高效快速的裂解作用.因此, PO157-Z作为一株肠出血性大肠杆菌O157强裂解性噬菌体,属dsDNA短尾科噬菌体,其对宿主菌的高效裂解性以及强酸碱耐受性等特点,为污水处理系统中大肠杆菌O157的生物防控,提供了新思路和技术支持.