Nodal基因的剪接异构体分析

利用GenBank数据库中Nodal分子的核酸和蛋白相关信息,采用生物信息学方法分析Nodal的分子生物学特征及其剪接异构体.应用基因克隆方法克隆人Nodal基因.结果表明Nodal基因至少有四种剪接异构体,除研究较清楚的isoform 1相对完整外,其它剪接异构体信息并不完整、功能未知且表达可能有组织特异性.特别是虽然Nodal基因isoform 1的氨基酸编码序列已知,但是发现目前NCBI提供的Nodal基因mRNA参考序列并不完整.通过基因克隆发现一种新的Nodal基因剪接异构体,它可能具有TGF-β超家族的特征性结构,但功能未知.结果说明人Nodal基因可能至少存在5种剪接异构体,除isoform 1外,其它isoform具体功能还有待进一步研究.     

细胞分化的基因选择性表达及其调控

细胞分化是生物机体生长和发育过程中的重要事件,其实质是基因的选择性表达.本文就细胞分化过程中如何实现基因的选择性表达以及基因选择性表达的调控方式进行了探讨.     

绵羊IGF-Ⅰ基因剪接异构体克隆及生物信息学分析

胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor I,IGF-Ⅰ)是机体重要的生长因子,可作为培育高产、优质的毛用、肉用家畜新品种时重要的候选基因,但其在转录过程中存在着选择性剪接现象。本研究成功克隆得到了绵羊IGF-Ⅰ基因Ⅰ类Ea型和Eb型两种剪接异构体,并结合生物信息学方法对其结构与功能进行分析。研究结果表明,克隆得到的绵羊IGF-Ⅰ基因Ⅰ类Ea型与GenBank数据库信息相一致,预测编码154个氨基酸;IGF-Ⅰ基因Ⅰ类Eb型为新发现的剪接异构体,预测编码188个氨基酸。信号肽分析显示两剪接异构体均在49~50位氨基酸处存在潜在的信号肽切割位点;系统进化树分析显示两种剪接异构体在进化上均与哺乳动物更为接近,与灵长类、啮齿类和两栖类较远;蛋白理化性质分析显示,两剪接异构体在等电点及亲疏水性上存在部分差异,但总体上表明疏水性较弱,亲水性较强,为亲水性氨基酸;亚细胞定位结果表明二者均为分泌型蛋白质,主要存在于分泌途径;两剪接异构体均存在两个跨膜螺旋,但不存在明显的跨膜区,不是跨膜蛋白,二者含有不同数量的糖基化位点和磷酸化位点;蛋白质二级结构分析显示两剪接异构体均以α-螺旋为主,蛋白质三级结构分析显示为明显的弯曲状螺旋结构。     

胃癌患者外周血调节性T细胞CD4+和CD25+的检测及意义

目的:研究胃癌患者外周血中调节性T细胞(T regulatory cells,Tr)的CD4 和CD25 表达与胃癌临床病理的关系,并分析其意义。方法:采用流式细胞术检测44例胃癌患者和10例健康体检者外周血CD4 CD25 Tr水平,并进行分层分析。结果:健康成人对照组外周血Tr表达率为(6.05±1.88)%,胃癌患者外周血CD4 CD25 Tr细胞占总CD4 T细胞的(15.27±4.06)%,与健康对照组比较,外周血CD4 CD25 Tr细胞比率均明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。分层分析显示,胃癌外周血Tr表达与淋巴结转移率和TNM分期有着负相关性,淋巴结转移阳性和TNM分期越晚,Tr表达率越高(P<0.05)。结论:胃癌患者外周血CD4 CD25 Tr细胞比率明显升高,并与患者免疫力低下及临床病理存在显著相关性,提示祛除人的CD4 CD25 Tr细胞是一种有效的治疗肿瘤的新方法。     

急性脑梗死患者CD4+、CD8+-T淋巴细胞和肿瘤坏死因子-α变化的研究

目的:探讨脑梗死患者外周血CD4 、CD8 -T淋巴细胞亚群和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在脑梗死发病中的作用及两者的相关关系。方法:运用流式细胞仪及酶联免疫检测仪,对45例急性脑梗死患者(观察组)和30名健康体检者(对照组)外周血CD4 、CD8 -T淋巴细胞百分率和血清中TNF-α浓度进行检测,并分析两者的相关性。结果:急性脑梗死患者外周血中CD8 -T淋巴细胞和血清中TNF-α浓度均比对照组显著增加,CD4 -T淋巴细胞及CD4 /CD8 明显减低,且随病情加重而显著改变。结论:急性脑梗死时,患者外周血中CD4 、CD8 -T淋巴细胞和血清中TNF-α浓度异常改变,参与了急性脑梗死的异常病情反应,在脑梗死发病中起重要作用。     

猪PIT-1基因多态性与生长性状的关联分析

目的:研究猪PIT-1基因多态性及其对生长性状的遗传效应,旨在寻找改良猪生长性能的分子标记。方法:采用PCR-RFLP方法检测猪PIT-1基因的单核苷酸多态性(SNP),并分析基因多态性与生长性状的关联性。结果:猪PIT-1基因的Rsa I酶切位点存在多态性。其中,杜洛克猪未检测到AA型,BB基因型频率高于AB型,等位基因B频率高于等位基因A,SNP处于低度多态(PIC0.25);淮猪新品系未检测到BB型,AA基因型频率高于AB型,等位基因A频率高于等位基因B,SNP处于低度多态(PIC0.25);杜洛克猪×淮猪新品系未检测到BB型,AB基因型频率高于AA型,等位基因A频率高于等位基因B,SNP处于中度多态(0.25PIC0.5)。关联分析表明,PIT-1基因型对猪平均日增重和饲料转化率的遗传效应都未达到显著水平(P0.05)。结论:杜洛克猪、淮猪新品系、杜洛克猪×淮猪新品系PIT-1基因Rsa I酶位点都存在多态性,但PIT-1基因对猪生长性状没有显著影响。     

运动对T淋巴细胞CD4+、CD8+亚群免疫的影响

T淋巴细胞是机体免疫细胞中数目最多,作用最重要的功能细胞。T淋巴细胞CD4 、CD8 亚群是重要的免疫调节细胞。中小强度有规律的运动提高CD4 /CD8 比值,增强机体T淋巴细胞的免疫功能;而大强度、力竭运动则降低CD4 /CD8 比值,减弱T淋巴细胞的免疫功能。     

基于改进的BP网络的CD4细胞图像识别

采用改进的BP网络分类器对CD4细胞图像进行识别.首先对图像进行了预处理,分析了图像的特征,然后通过增L减R法选择,介绍了BP网络分类器和LM算法的原理,构建了基于LM算法的BP网络分类器,较好地实现了CD4细胞的识别.     

奶牛LF基因5’-UTR多态性与子宫感染和生殖参数的相关性分析

乳铁蛋白（Lactoferrin,LF）是牛子宫分泌物中一种重要的抗菌化合物,LF等位基因多态性会影响子宫感染的敏感性和耐药性。本次试验以89头荷斯坦奶牛为研究对象,通过AS-PCR方法和基因测序技术研究了牛LF基因5’非编码区的SNPs。研究结果表明,感染疾病组和未感染疾病组的LF基因5’-UTR扩增片段均发生G→C碱基突变。统计分析表明LF基因5’UTR的SNP与子宫感染没有显著相关性（P〉0.05）,CC基因型个体和CG基因型个体在输精次数和空怀天数水平上显著低于GG基因型个体（P〈0.05）,此外,产后第一次配种时间在3种基因型间没有显著差异（P〉0.05）。     

鹅CYP2C45基因核心启动子的鉴定及其多态性与产肝性能的关系

鉴定鹅CYP2C45基因核心启动子序列,并筛选其单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,比较等位基因的转录活性差异及其与肝重性状的相关性,进而为肝重性状的选育筛选新的分子标记。通过双荧光素酶报告基因载体系统鉴定鹅CYP2C45基因启动子转录活性区域;通过PCR-SSCP、测序和序列比对方法分析朗德鹅的CYP2C45基因SNP,并分析不同基因型的转录活性;使用SPSS软件分析不同基因型与产肝性能的关系。结果表明通过双荧光素酶报告基因载体系统分析,发现鹅CYP2C45基因启动子活性区域为-165~+38bp;对朗德鹅群体进行了该区域SNP筛查,在5′上游-93bp处发现1个T/C突变,造成了屠体重的显著差异,对该突变造成的不同突变型进行转录活性分析,发现转录活性存在差异但未达到显著水平,推断CYP2C45基因的转录水平与鹅产肝性能呈正相关。本研究发现鹅CYP2C45基因核心启动子区域为-165~+38bp,该区域存在1个SNP,且与屠体重显著相关。     

Calpain-10基因(CAPN-10)单核苷酸多态性与2型糖尿病(T2DM)遗传易感性的实验研究

目的:探讨Calpain-10基因(CAPN-10)单核苷酸多态性SNP19与2型糖尿病(T2DM)遗传易感性的关系。方法:从2型糖尿病患者外周血有核细胞中提取基因组DNA,运用聚合酶链式反应分别扩增Calpain-10基因第三个内含子包含SNP19多态性的DNA片断。将其扩增产物进行电泳分析,在紫外分析仪下观察结果并与正常人对照。结果:发现T2DM患者出现1-2条区带,而正常人则没有出现相应区带。结论:提示Calpain-10基因单核苷酸多态性SNP19可能直接或间接与2型糖尿病遗传易感性相关。     

蓖麻GPAT基因SNPs及与油脂含量的关联分析

GPAT基因对蓖麻储存油脂（triacylglycerols,TAG）的合成调控具有重要作用。为了从分子进化角度研究蓖麻GPAT的多态性,参考GenBank中编码蓖麻GPAT的基因组序列设计一对特异性引物对来自32个不同地区种质的GPAT进行测序,获得32个长约741bp的基因组序列。多态分析表明：在741bp的区间内共发现1个SNP,频率为1/741bp,多样性指数Pi为0.00069。结果表明GPAT基因与种质油含量和种子大小的关系均无明显相关性。该研究分析了GPAT基因的遗传多样性,遗传变异与油脂数量和种子大小性状的相关性。     

4~5岁幼儿基于亲社会特质的选择性信任研究

本研究运用情境实验法（询问任务和信息采纳任务）对某市81名4~5岁幼儿的基于三种亲社会特质（爱助人、爱合作与讲公德）的选择性信任进行了研究。研究发现：4岁幼儿能够选择性信任具有爱助人或爱合作特质的信息提供者,而5岁幼儿则对三种亲社会特质都能够做出选择性信任;4岁与5岁幼儿的选择性信任存在差异,5岁幼儿的正确率（选择信任...     

四君子汤对衰老大鼠胃黏膜CD4+T细胞的影响

目的：探讨四君子汤对D-半乳糖致衰大鼠胃黏膜内CD4＋T细胞的数量变化,为四君子汤对衰老大鼠胃黏膜免疫功能的恢复提供形态学依据。方法：雄性wistar大鼠30只,随机分对照组、模型组和实验组,实验组和模型组用D-半乳糖颈部皮下注射,实验组同时灌服四君子汤,对照组、模型组给予等量的生理盐水灌胃,持续42天,取胃窦,用免疫组化SP法显示黏膜内CD4^＋T细胞,在生物显微镜下计数。结果：对照组CD4^＋T细胞数为128&#177;9.5,模型组CD4^＋T细胞数为38&#177;6.4,与对照组相比,明显减少,两者比较有显著差异（P〈0.001）;实验组CD4^＋T细胞数为121&#177;10.4,与对照组比较差异不明显（P〉0.05）,与模型组比较有明显差异（P〈0.001）。结论：四君子汤可以提高衰老大鼠胃黏膜内CD4＋T细胞数,具有延缓胃黏膜免疫衰老作用。     

ABCA1基因M883I多态性与子痫前期发病的关联

探讨ABCA1基因M883I多态性在福建汉族女性中的分布特点及其与子痫前期患者体内ABCA1蛋白表达、血脂水平的关联性。研究对象400例,包括正常对照组、子痫前期病例组各200例。采用PCR-RFLP法测定ABCA1基因外显子区M883I在病例组及对照组中的多态性分布特点,ELISA法测定ABCA1蛋白表达水平,并检测血脂水平。结果:ABCA1基因M883I多态性对子痫前期的发病率无显著影响,但子痫前期患者中MI+II基因型血清ABCA1蛋白浓度及外周血HDL-C、Apo A1均明显高于MM基因型,差异显著(P<0.05)。结果表明:ABCA1基因M883I在福建汉族女性中,I等位基因可提高血清中ABCA1蛋白的表达,使血液中HDL-C及Apo A1水平升高,从而降低了子痫前期合并血脂代谢紊乱的风险性。     

“基因的选择性表达”在“细胞的生命历程”复习中的渗透

利用基因的选择性表达可以将"细胞的生命历程"一章中相关内容有机联系在一起,利于这一章知识的复习和理解。     

SRY基因的分子机制及其在奶牛性别控制中的应用

综述了性别决定的生物学机制和性别决定基因（SRY）的定位、结构、功能、表达特异性及其作用的分子机制,在此基础上阐述了SRY在奶牛精子性别控制与胚胎性别鉴定中的应用,着重介绍了用于胚胎鉴定的PCR扩增法和DNA探针法。     

APOA5基因rs147142271位点多态性与高甘油三酯血症的相关性

目的了解汉族人群APOA5基因rs147142271位点遗传多态性与高甘油三酯血症的关系。方法采用SNa Pshot技术分析85例HTG患者和110例正常对照rs147142271位点遗传多态性。结果 HTG患者和正常对照rs147142271位点多态以基因型GG为主,两组内的甘油三酯均值不存在差异,GG基因型为2.125±1.42mmol/L,TG基因型为3.17±0.000mmol/L,TT基因型为2.27±0.000mmol/L,最高为TG基因型,两组间不同基因型个体的甘油三酯水平在男女性别差异上无统计学意义(P=0.677),不同性别不同基因型个体间的甘油三酯水平差异无统计学意义(P=0.181)。结论 rs147142271位点各基因型可能与汉族人群高甘油三脂血症不相关,且在男女性别差异上无统计学意义。     

孟鲁司特对哮喘大鼠骨髓CD34^＋细胞IL-4 mRNA和IL-4蛋白表达的影响

目的：研究IL-4mRNA和IL-4蛋白在哮喘大鼠CD34^＋细胞中的转录表达及孟鲁司特（montelukast,MK）对其表达的影响。方法：将SD大鼠随机分为3组：哮喘组、MK组和正常对照组。用卵白蛋白制备大鼠哮喘模型。应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定血浆中IL-4和γ-干扰素（IFN-γ）浓度;用MiniMACS磁珠分选系统分离骨髓CD34^＋细胞;采用SYBRGREEN I荧光实时定量PCR法测定CD34^＋细胞中IL-4mRNA的相对表达量。采用免疫组化技术测定CD34＋细胞中IL-4蛋白的表达量。结果：哮喘组骨髓CD34＋细胞中IL-4mR．NA和IL-4蛋白的表达量高于其它各组（p〈0．01）;哮喘组除了IFN-1水平低外,IL-4浓度和嗜酸性粒细胞（EOS）绝对值都是三组中最高的（P〈0．01）;除哮喘组外,其余组的各项指标相近（P〉0．05）。IL-4mRNA表达量与IL-4浓度、Eos绝对值呈正相关（P〈0．01）,与IFN-γ浓度呈负相关（P〈0．01）。结论：哮喘大鼠骨髓CD34^＋细胞中IL-4 mKNA的表达增强;孟鲁司特可以下调IL-4mRNA的表达。可能成为其抑制哮喘气道炎症形成的重要机制之一。     

奶牛急性乳房炎病原的分离与鉴定

安徽某奶牛场奶牛发生了一起急性乳房炎,选择其中两头病牛乳汁样品,分别对其病原进行分离与鉴定.经细菌学检验表明,该场奶牛的急性乳房炎是由不溶血性金黄色葡萄球菌、溶血性革兰氏阳性停乳链球菌和不溶和不溶血性革兰氏阴性的大肠杆菌共同引起.