NAG与α1-M在糖尿病早期肾损害诊断中的价值

目的:探讨糖尿病早期肾损害诊断指标.方法:对50例正常对照和50例糖尿病患者采用终点法测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),ELISA方法检测尿α1-微球蛋白(α1-M),比色法测尿肌酐.结果:正常对照组尿NAG/Cr为(0.52±0.46)U/mmol,α1-M/Cr为(0.78±0.51)mg/mmol,糖尿病患者尿NAG/Cr、α1-M/Cr值较正常对照组增高(P＜0.01);检测的阳性率分别为:NAG:84%,αt-M:54%,尿NAG酶检测较α1-M阳性率高.结论:尿NAG酶的检测是诊断糖尿病早期肾损害的较为灵敏、可靠的实验室指标.     

NAG与α1-M在糖尿病早期肾损害诊断中的价值

目的:探讨糖尿病早期肾损害诊断指标.方法:对50例正常对照和50例糖尿病患者采用终点法测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),ELISA方法检测尿α1-微球蛋白(α1-M),比色法测尿肌酐.结果:正常对照组尿NAG/Cr为(0.52±0.46)U/mmol,α1-M/Cr为(0.78±0.51)mg/mmol,糖尿病患者尿NAG/Cr、α1-M/Cr值较正常对照组增高(P＜0.01);检测的阳性率分别为:NAG:84%,α1-M:54%,尿NAG酶检测较α1-M阳性率高.结论:尿NAG酶的检测是诊断糖尿病早期肾损害的较为灵敏、可靠的实验室指标.     

老年肺癌患者MGMT、LRP、HIF-1α表达与临床预后关系组织芯片研究

目的:探讨老年肺癌MGMT、LRP、HIF-1α表达与临床预后之间的关系.方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测34例老年肺癌MGMT、LRP、HIF-1α的表达,并与临床预后资料进行相关性分析.结果:MGMT、LRP、HIF-1α在老年肺癌的阳性表达率分别为47%(16/34)、58%(19/34)、64%(22/34);MGMT阳性表达与组织学类型、TNM分期密切相关(P<0.05),与肿瘤体积、淋巴结转移无关(P>0.05);LRP阳性表达与TNM分期、淋巴结转移密切相关,与组织学类型、肿瘤体积无关(P>0.05);HIF-1α阳性表达与组织学类型、肿瘤体积密切相关,与TNM分期、淋巴结转移无关(P>0.05).经多因素Cox比例风险模型分析显示:TNM分期、肿瘤组织类型及MGMT、HIF-1α阳性表达与肺癌患者术后生存率有关(P<0.05).结论:TNM分期、肿瘤组织类型及MGMT、HIF-1α可作为老年肺癌的独立预后指标.     

尿微量蛋白联合尿酶在特发性水肿中的应用价值

目的 :探讨特发性水肿病人早期肾损害诊断指标。方法 :对 5 0例正常对照和 4 0例特发性水肿患者采用ELISA方法检测尿微量白蛋白 (mALB)、视黄醇结合蛋白 (RBP) ,尿转铁蛋白 (TRF)和α1-微球蛋白 (α1-M ) ,终点法测尿N -乙酰 - β -D -氨基葡萄糖苷酶 (NAG) ,比色法测尿肌酐。结果 :正常对照组尿mALB为 (3.6 1± 2 .4 6 )mg/L ,RBP/Cr为 (7.4 6± 5 .0 2 ) μg/mmol,TRF/Cr为 (0 .0 5± 0 .0 3)mg/mmol ,α1-M /Cr为 (0 .78± 0 .5 1)mg/mmol,NAG/Cr为 (0 .5 2± 0 .4 6 )U/mmol,特发性水肿患者尿mALB为 (12 .4 2± 11.2 5 )mg/L ,RBP/Cr为 (18.75± 17.16 ) μg/mmol,TRF/Cr为 (0 .0 8± 0 .0 1)mg/mmol ,NAG/Cr为 (1.89± 1.6 4)U/mmol,α1-M /Cr为 (0 .86± 0 .14 )mg/mmol;其检测的阳性率分别为 :mALB :30 % ,NAG :4 0 % ,RBP :2 7.5 % ,TRF :2 .5 % ,α1-M :5 % ,两项指标联合检测其阳性率分别为 :NAG+mALB :4 0 % ,NAG +RBP :4 0 % ,mALB +RBP :32 .5 %。结论 :尿NAG酶的检测是诊断特发性水肿早期肾损害的最灵敏、可靠的实验室指标。     

环氧化酶-2基因在乳腺癌组织中的表达

目的:探讨环氧化酶-2(cos-2)在乳腺癌中的表达特点及其与临床病理参数的相关性.方法:采用免疫组织化学SP法,检测60例乳腺癌组织中环氧化酶-2的表达情况.结果:60例乳腺癌组织中环氧化酶-2阳性表达率为78.33%.环氧化酶-2在临床分期Ⅰ～Ⅱ期的阳性率(83.67%)明显高于Ⅲ～Ⅳ期阳性率(54.55%),两组间的表达有显著差异(P<0.05).在有、无淋巴结转移组间,环氧化酶-2阳性表达也有显著差异(P<0.05);而在不同年龄组、病理类型及左右乳分组中的阳性表达差异无显著性.结论:环氧化酶-2在肿瘤形成的早期过程中产生,可能参与或促进肿瘤的形成.环氧化酶-2的检测可能对乳腺癌的早期诊断有实际意义.     

优化多重PCR检测Duchenne muscular dystrophy基因外显

目的:介绍一种快速简便地优化多重PCR检测DMD基因外显子缺失的方法及详细步骤.方法:采2ml外周血,用0.2%氯化钠处理收集白细胞,再用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA,用优化的多重PCR法直接检测DMD基因外显子的缺失.结果:用该方法检测DMD基因外显子缺失结果准确清晰.结论:用优化的多重PCR技术可以直接检测DMD基因外显子缺失,跟通常使用的9对引物一步法相比,具有经济、快速、简便等特点.     

散发性乳腺癌细胞14-3-3σ异常甲基化及其蛋白表达的关系

目的:探讨散发性乳腺癌癌变过程14-3-3σ基因启动子异常甲基化状况及其与转录表达的关系。方法:用甲基化特异PCR方法对散发性乳腺癌病人癌组织及正常组织进行14-3-3σ异常甲基化检测;用免疫组织化学测定14-3-3σ蛋白表达。结果:68例散发性乳腺癌组织中,14-3-3σ基因启动子异常甲基化率为90%(61/68),部分不典型增生病例检出异常甲基化18%(2/13),而正常组织未检出。14-3-3σ基因启动子异常甲基化与患者居住地、组织分型、分级和淋巴结转移相关(P&lt;0.05)而与年龄无相关性(P&gt;0.05),14-3-3σ基因甲基化与其蛋白表达下降呈良好的一致性(P&lt;0.05)。单变量分析发现,淋巴结转移与预后明显相关(风险指数为:5.0,P=0.02)。14-3-3σ基因甲基化与否并不影响乳腺癌的五年生存率(P&gt;0.05)。结论:14-3-3σ基因异常甲基化参与乳腺癌癌变过程,是其蛋白表达下降的重要原因之一,但不影响乳腺癌的生存率。     

联合检测尿液α_1-MG、NAG及尿液Cystatin C对肾损害早期诊断的临床意义

[目的]探讨尿液α1-微球蛋白(α1-MG)、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cystatin C)联合检测对诊断肾脏早期损害的临床价值.[方法]采用免疫比浊法检测尿液α1-MG、CystatinC的含量,连续监测法检测尿液N乙酰β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG).[结果]患者尿中α1-MG、NAG、Cystatin C水平均显著高于对照组(P<0.01).单纯检测上述指标中的一项或两项阳性率较低,联合检测三项阳性率较高.[结论]检测尿液α1-MG、NAG、Cystatin C是早期肾损害的敏感指标,联合检测对患者肾脏损伤的早期诊断和疗效观察有重要的意义.     

α-硫辛酸对热应激小鼠睾酮分泌失调的保护作用

目的:研究α-硫辛酸对热应激引起小鼠睾酮分泌失调的保护作用.方法:将性成熟雄性SPF昆明小鼠60只,随机分为3组,即对照组、热应激组和α-硫辛酸+热应激处理组.分别采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠血清睾酮含量,石蜡切片免疫组化染色法(IHC)分析各组小鼠非折叠蛋白反应信号通路的关键信号转导调节分子肌醇需求酶1(IRE1)在睾丸中的表达定位,以及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠IRE1和促凋亡基因半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达量变化.结果:与对照组相比,热应激组的血清睾酮含量显著下降(P<0.01),睾丸组织中IRE1和Caspase-3蛋白表达量显著增加(P<0.01,P<0.01);与热应激组相比,α-硫辛酸+热应激处理组的血清睾酮含量显著升高(P<0.05),在睾丸生精小管和间质细胞中均可观察到IRE1蛋白的阳性免疫染色,但IRE1蛋白阳性细胞数量显著减少(P<0.05),IRE1和Caspase-3的蛋白表达量均显著降低(P<0.05,P<0.05).结论:热应激能够抑制小鼠睾丸睾酮的分泌,降低血清睾酮的含量;在本试验条件下,添加60 mg/(kg·d)的α-硫辛酸能够有效增加热应激状态下小鼠的血清睾酮含量,其发挥保护作用的机制可能与α-硫辛酸抑制IRE1介导的非折叠蛋白反应信号通路激活、降低凋亡促进基因Caspase-3的蛋白表达量有关.     

尿微量蛋白联合尿酶诊断糖尿病肾脏早期损伤

目的 :探讨糖尿病肾脏损伤的早期诊断方法。方法 :采用免疫透射比浊法检测尿微量白蛋白 (mALB)和尿β2 -微球蛋白 (β2 -MG) ,终点比色法测尿N -乙酰 - β -D -氨基葡萄糖苷酶 (NAG) ,Jaffe速率法测尿肌酐 (CRE)。结果 :糖尿病患者尿mALB/CRE、β2 -MG/CRE及NAG/CRE值较正常对照组增高 (P <0 .0 1)。三项指标联合检测在糖尿病中阳性率可达4 8.78% ,而尿常规蛋白定性检测阳性率仅为 17.0 7%。结论 :联合检测尿mALB、β2 -MG及NAG是糖尿病肾脏损伤早期诊断灵敏、可靠的实验室指标。     

乳腺癌中存活素的表达及其与人类表皮生长因子受体-2的相关性

目的:研究存活素(Survivin)在乳腺癌组织中的表达及其与人类表皮生长因子受体-2(C-erbB-2)的关系.方法:应用免疫组化二步法检测68例乳腺癌组织中Survivin及C-erbB-2的表达.结果:68例乳腺癌组织中Survivin基因的阳性表达率为72%(49/68),C-erbB-2基因的阳性表达率为28%(19/68).Survivin的表达与乳腺癌临床分期有关(P＜0.05),而与患者年龄、肿块大小、淋巴结转移状况无显著性相关(P＞0.05),Survivin的表达与C-erbB-2的表达呈正相关(P＜0.05).     

人α-防御素-1在单核细胞内的表达及其基因克隆

目的:探测细胞氧化低密度脂蛋白(LDL)过程中人α-防御素-1(HNP-1)基因的表达水平并构建人HNP-1的克隆载体。方法:提取人单核细胞系(THP-1)的总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法获得cDNA,采用pBS-T克隆HNP-1。结果:用RT-PCR在THP-1细胞总RNA中扩增出一条285 bp的DNA片段,与HNP-1 cD-NA片段大小一致。重组质粒经PCR和测序鉴定获HNP-1基因克隆。另外,LDL可诱导THP-1细胞HNP-1的mR-NA表达增加。结论:HNP-1可能参与LDL的细胞氧化过程,成功构建HNP-1克隆载体将为进一步亚克隆到原核及真核的表达载体提供了基础。     

清开灵对急性脑梗死患者血清中TNF-α和IL-6影响

目的:探讨清开灵对急性脑梗死患者血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的影响。方法:88例急性脑梗死患者随机分为对照组(常规治疗)和清开灵组(清开灵 常规治疗,生理盐水250 ml加入清开灵1200 mg,1次/d,连续14 d,静脉点滴),检测治疗前和治疗后患者血清中TNF-α和IL-6浓度的变化及两组的疗效。结果:治疗前清开灵组与对照组比较,血清中TNF-α和IL-6浓度差别无统计学意义(P>0.05)。治疗后清开灵组血清中TNF-α和IL-6浓度较对照组显著下降(P<0.01);清开灵组总有效率95.65%,对照组78.57%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论:早期对急性脑梗死患者进行清开灵治疗可以减轻缺血脑细胞的损害、有利于病情的康复。其对脑缺血神经元的保护机制可能与抑制TNF-α和IL-6的产生、阻止白细胞向梗死区的浸润有关。     

观察小儿肺炎患儿采用沐舒坦治疗临床疗效

目的:观察小儿肺炎采用沐舒坦超声雾化吸入治疗疗效.方法:选取98例小儿肺炎患儿纳入研究,按照患儿入院时间先后顺序分组为对照组和观察组.对照组:采用抗生素联合α-糜蛋白酶雾化吸入治疗;观察组:采用抗生素联合沐舒坦雾化吸入治疗.观察两组患儿治愈时间和临床体征、症状消失时间及临床疗效等.结果:观察组治疗第5天、第7天分别为83.67%(41/49)、93.88%(46/49)与对照组71.43%(35/49)、81.63%(40/49)比较(P0.05).两组均未见明显不良反应.结论:临床采用沐舒坦治疗小儿肺炎患儿,其可加速患儿临床症状和体征改善,提高临床治疗效果.     

反相高效液相色谱荧光检测法测定血浆中阿霉素的浓度

目的:建立一种RP-HPLC检测盐酸阿霉素在小鼠体内药物浓度的方法.方法:血浆中样品以氯仿-乙醇(101)混合液提取,NovapakC18柱为分析柱,甲醇-乙腈-0.02mol/L磷酸二氢铵-冰醋酸(525430.6V/V)为流动相, Ex=246nm、Em=555nm为检测波长 ,以α-萘酚为内标 .结果:0.0102-4.080μg/mL范围内线性关系良好(r=0.995),日内RSD<10.0%,最低检测浓度为5ng/mL,平均回收率为97.22%.结论:该方法灵敏、简便,符合临床药浓监测及药代动力学研究的要求.     

聚合酶链反应检测儿童急性呼吸道流感嗜血杆菌感染的研究

目的 :建立儿童急性呼吸道感染的PCR检测方法 ,并与常规方法进行比较。方法 :选择编码外膜蛋白P6基因作为靶片段设计引物 ,分别用PCR方法及常规培养法检测 78例急性呼吸道感染儿童。结果 :建立的PCR检测法可以检测 10～ 5 0个流感嗜血杆菌 ;78例急性呼吸道感染儿童中PCR方法检出 4 2株 (5 3.8% ) ,常规培养方法检出 33株 (4 2 .3% ) ,培养法检测阳性者PCR方法均为阳性。PCR方法较培养法有显著性差异。结论 :PCR方法检测呼吸道流感嗜血杆菌感染比常规方法更快速 ,更简便 ,更敏感。PCR方法检测流感嗜血杆菌有可能成为临床流感嗜血杆菌感染诊断的一种实用、理想的方法。     

奶牛CD4基因选择性剪接的鉴定

目的:通过检测奶牛CD4基因选择性剪接,为研究CD4基因的结构和功能打下基础。方法:采集奶牛尾静脉血,提取血液总RNA后反转录成cDNA。通过反转录PCR扩增和测序,以鉴定CD4基因剪接体和单核苷酸多态性。结果:通过序列比对分析,发现奶牛CD4基因外显子8处存在缺失,扩增的两种CD4mRNA序列长度相差122bp(整个外显子8缺失)。另外,在牛CD4基因外显子8处检测到1个碱基突变(C/A)。结论:奶牛CD4基因发现两种相差外显子8的剪接体,并检测到1个SNP。     

DNA修复酶在胃癌组织中的表达变化及临床意义

目的:检测胃癌组织中DNA损伤修复酶(O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶O6-methylguanine DNA methyltransferase, MGMT)的表达变化,探讨其表达和胃癌临床病理特征之间的关系,进一步用于指导临床化疗方案的制定.方法:采用免疫组化方法(SABC法)检测55例胃癌标本中MGMT的表达情况.结果:MGMT在胃癌组织中的阳性表达率为43.64%(24/55),其阳性表达与年龄、病理类型有关,而与性别、分化程度、侵犯深度、淋巴结转移的相关性不明显.结论:MGMT对胃癌化学治疗方案的制定有指导作用.     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠胰腺β细胞凋亡的影响

目的:探讨α-硫辛酸对1型糖尿病大鼠胰腺β细胞凋亡的作用机制。方法:20只雄性Wistar大鼠制作1型糖尿病模型后随机分为α-硫辛酸组和糖尿病组,α-硫辛酸组腹腔注射α-硫辛酸50 mg/kg,连续4周,糖尿病组大鼠腹腔注射同体积的生理盐水。每周检测各组大鼠空腹血糖和胰岛素水平,Western blot检测胰腺组织中Caspase-3和Bcl-2的含量。另取10只雄性Wistar大鼠作为正常对照。结果:4周后α-硫辛酸组大鼠空腹血糖显著低于糖尿病组(P&lt;0.05),但胰岛素值逐渐升高超过糖尿病组(P&lt;0.05)。胰腺β细胞中Caspase-3的表达显著低于糖尿病组(P&lt;0.05),Bcl-2的表达则显著高于糖尿病组(P&lt;0.05)。结论:α-硫辛酸可能通过线粒体途径减少β细胞凋亡而发挥保护作用。     

尿微量蛋白联合尿酶诊断高血压病肾脏早期损伤

目的:探讨高血压病肾脏损伤的早期诊断方法.方法:采用免疫透射比浊法检测尿微量蛋白(mALb)和尿β2-微球蛋白(β2-MG),终点比色法测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),Jaffe速率法测尿肌酐(CRE).结果:高血压病患者尿mALB/CRE,β2-MG/CRE及NAG/CRE值较正常对照组增高(P＜0.01),三项指标联合检测在高血压病中阳性率可达46.59%(41/88),而尿常规蛋白定性检测阳性率仅为4.55(4/88).结论:联合检测尿mALB、β2-MG及NAG是高血压病肾脏损伤早期诊断灵敏、可靠的实验室指标.