红球菌Y-1发酵条件优化及其抗菌活性物质初探

红球菌（Rhodococcus sp.）Y-1菌株分离自小麦叶片,初步研究发现其对小麦赤霉病的病原菌禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum Schwabe）有一定的拮抗作用。文章采用单因素试验对Y-1菌株产抗菌活性物质的发酵条件进行优化,并初步研究其抗菌活性物质类型。当发酵条件为500 mL锥形瓶装100 mL液体培养基、发酵温度25℃、发酵时间72 h、接种量1%、p H 6.0时,5 mL Y-1无菌发酵液对禾谷镰刀菌的抑菌率为58.6%,且显著高于各单因素试验的抑菌率。粗活性物质的研究结果显示,Y-1菌株的主要抗菌活性物质为挥发性物质（抑菌率57.5%）和非蛋白类物质（抑菌率77.4%）,且二甲苯是非蛋白类粗活性物质的最佳萃取剂。     

草莓红中柱根腐病原致病性及杀菌剂毒力测定

为探究草莓红中柱根腐病的病原菌类型及筛选防治草莓红中柱根腐病适用药物,对皖北草莓种植区红中柱根腐病进行了调查、取样,并在室内进行病原菌分离、鉴定及致病性测定;同时,采用杀菌剂平板生物量法测定5种杀菌剂对草莓根腐病原菌的抑制中浓度EC50。结果表明,皖北草莓红中柱根腐病优势病原菌为立枯丝核菌及尖孢镰刀菌两种类型,58％雷多米尔EC50值为464．05,抑菌率最高;其次为95％溴菌清、50％异菌脲和80％乙磷铝;72．2％霜霉威EC50值为5715．58,抑菌率最差,EC50值大小为72．2％霜霉威〉80％乙磷铝〉50％异菌脲〉95％溴菌清〉58％雷多米尔。     

野生艾蒿内生菌的分离及其拮抗活性菌的筛选

采用组织块分离法,从采自商洛的野生艾蒿根、茎和叶中分离到54株内生菌,其中35株细菌,19株真菌。以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌为供试靶标菌,采用纸片法对分离的艾蒿内生细菌进行了拮抗活性的筛选,以棉花枯萎病菌、烟草赤星病菌、茄病镰孢霉为植物病原菌,用对峙法对内生真菌的拮抗活性进行了筛选。结果表明:分离到的内生细菌和真菌在野生艾蒿中的数量分布均表现为在根中最多,茎中次之,叶中最少。从内生细菌中筛选出了4株具有较强拮抗活性的菌株,分别是BS-6和BR-6菌株对枯草芽孢杆菌有较强拮抗作用,BR-9和BS-12菌株对大肠杆菌有较强拮抗作用;从内生真菌中筛选到2株对植物病原菌具有拮抗活性的菌株,分别是FS-8菌株对棉花枯萎病菌有较强的拮抗作用,FR-4菌株对茄病镰孢霉具有明显的拮抗作用。由此可见,野生艾蒿组织中内生菌含量较为丰富,而且其中存在对细菌和植物病原菌具有较强拮抗活性的菌株,其内生菌资源应进一步开发利用。     

不同培养条件对粉红聚端孢菌孢子形态的影响

在不同的酸碱度、光环境和营养等条件下对粉红聚端孢菌的菌落形态和孢子大小进行了研究．结果表明：该菌在不同条件下培养后,菌落颜色、形态以及分生孢子的大小有一定差异,病原菌分生孢子长圆形或洋梨形,无色或半透明,孢基偏乳头突起,双细胞,隔膜处略缢缩;在pH近中性及光照条件下,分生孢子大型化现象最显著;该菌能利用所有供试碳源,孢子大型化的最适碳源为木糖醇,在可溶性淀粉培养基上产生的孢子最小;在供试氮源中。孢子大型化最适氮源为甘氨酸,在L-胱氨酸、尿素、氯化铵培养基上不产孢子．     

羔羊大肠杆菌分离鉴定及其致病性、耐药表型和耐药基因检测

目的:对皖北地区羊养殖场中所采集的37份腹泻羔羊粪便样本进行病原菌的分离鉴定,并对其耐药性及耐药基因进行测定。方法:将采集样本进行病原菌分离鉴定并进行同源性分析,通过药敏试验测定分离菌药物敏感性并对其耐药基因进行检测。结果:试验分离细菌37株,经生长特性、生化鉴定及16S rRNA测序对比序列确定分离菌均为大肠杆菌。致病性检测大肠杆菌中有21株为产志贺毒素大肠杆菌,其中Stx-1毒力基因和Stx-Ⅱ毒力基因分别占比8.10%和48.65%,肠毒性大肠埃希杆菌在本次试验中未检出。对分离的大肠杆菌进行耐药基因检测,6组耐药基因中tetA(97.30%)和qnr(83.78%)检出率较高。药敏结果显示分离的大肠杆菌对复方新诺明和林可霉素的耐药率分别达到89.19%和94.59%。结论:皖北地区部分大肠杆菌存在致泻性、携带多种耐药基因、存在多重耐药情况。     

链格孢菌毒素能诱导中国月季产生抗蚜活性的细交链孢菌酮酸

目的：研究链格孢菌毒素能诱导中国月季植株产生对月季长管蚜的抗性,从而证实寄主植物介导的病虫互作关系的存在,并研究其互作机制。
　　创新点：证实了一种对寄主植物和害虫均无毒性的真菌毒素能使寄主植物产生对昆虫的诱导抗性。
　　方法：马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基培养链格孢菌获得毒素粗品,大孔树脂纯化后配制成不同浓度的溶液,喷施到中国月季植株上。处理结束后接种月季长管蚜,与对照相比,计算毒素处理对蚜虫的抑制百分数。用高效液相色谱法（HPLC）结合标准品分析毒素中是否存在细交链孢菌酮酸（TeA）,并测定其含量。TeA 同法处理中国月季植株,测定TeA对蚜虫的抑制率,并与毒素粗品比较。再通过HPLC法测定植物体表和体内残留的TeA,以证明TeA能自然降解完全。
　　结论：（1）链格孢菌粗毒素和对照品 TeA均能使中国月季植株产生对月季长管蚜的系统诱导抗性,显著降低月季长管蚜对中国月季的危害;（2）链格孢菌粗毒素中的主要抗蚜活性成分是 TeA, TeA有望成为中国月季上具有抗蚜活性的先导化合物;（3）粗毒素和对照品 TeA对蚜虫和植物均无伤害作用,但能激活植物对虫害的诱导抗性（ISR）和系统获得性抗性（SAR）,可直接证实二者间存在着寄主植物介导的间接的病虫互作关系。     

一种高效的柑橘绿霉菌基因敲除体系的构建(英文)

研究目的:提高柑橘绿霉菌基因敲除效率。创新要点:低效的基因敲除与丝状真菌非同源末端链接(NHEJ)的DNA双链断裂修复途径有关。为提高柑橘绿霉病菌基因敲除效率,本研究利用农杆菌介导的转化体系,获得NHEJ途径中关键因子Ku80的缺失突变体(ΔPdKu80)。研究方法:与野生型菌株相比,以ΔPdKu80作为出发菌株,提高柑橘绿霉病菌PdbrlA和PdmpkA的基因敲除效率(见表1)。重要结论:ΔPdKu80的营养生长、产孢和致病性与野生型菌株基本一致。ΔPdKu80作为出发菌株,能显著提高柑橘绿霉菌的敲除效率。