响应面法优化米曲霉HML366产β-葡萄糖苷酶发酵培养基

文章研究旨在优化前期筛选到的米曲霉HML366产β-葡萄糖苷酶的培养基条件。通过单因素实验和响应面设计对米曲霉HML366产β-葡萄糖苷酶的培养基条件进行了优化组合,确定最佳的发酵培养基配方为:甘蔗渣3.49%,豆饼粉0.375%,KH2PO4 0.255%。在此培养条件下得到β-葡萄糖苷酶酶活力达92.64 U/g,是未优化前酶活71.12 U/g的1.30倍。     

Bacillus sp.ZJU318脂肪酶发酵条件的优化及其酶学性质的研究

利用均匀设计法对Bacillus sp．ZJU318产酶的最佳培养基进行了快速优化研究。结果表明,其最适产酶培养基为：3．28％黄豆粉,0．023％蔗糖,0．075％K2HPO4,配制时的pH为12（灭菌后pH为8～9）;此外,其发酵的最佳条件为：发酵温度28℃,接种量20％,摇瓶装量20mL（250mL三角瓶）。在最适的发酵条件下,脂肪酶的发酵水平可达24．7U／mL。Bacillus sp．ZJU318脂肪酶作用的最适温度为45℃,40℃保温1h,活力几乎没有损失;但是,在50℃和60℃的条件下保温1h后,酶活降低得比较明显;酶作用的最适pH为9．0。在pH7～10,该脂肪酶较稳定,但是在酸性的环境中,酶的稳定性较低。     

黑曲霉固体发酵生产麦角固醇的研究

通过紫外扫描和高效液相色谱证实黑曲霉中含有麦角固醇。采用正交实验设计法,研究了用黑曲霉固体发酵生产麦角固醇的最佳发酵条件。实验表明,料水比是影响发酵的显著因子,最佳发酵条件为料水比1．0,初使PH值7．5,发酵时间66h,碳源（麸皮）和氮源（豆粕）此8：2。最佳发酵条件下麦角固醇产量可达0．983mg／g干培养基。     

亲水性单胞菌几丁质酶发酵工艺优化

首次报道从温州浅海海水中筛选得到的一株产几丁质酶的亲水性单胞菌属细菌(Aeromonas hydrophila sp.)。在探索了碳、氮源和环境因子对细菌产酶影响的基础上,利用均匀设计法优化得到了较佳的产酶发酵培养基配方(g/L):胶体几丁质5.0,蛋白胨12.0,尿素2.0,MgSO4 0.5,K2HPO4 0.3,NaCl5.0,初始pH 6.5。在接种量6%,培养温度28℃,180 r/min的较佳工艺下振荡发酵5 d,该菌产酶活力达到1.89 U/mL。     

以羽毛为底物发酵产角蛋白酶培养基的优化

以角蛋白酶为考察指标,采用正交试验对以羽毛为底物,利用枯草芽孢杆菌菌株KD-N2生产角蛋白酶的培养基组成进行了优化试验.结果表明在NaCl含量为0.5 g/L,MgSO4含量为0.2 g/L,KH2PO4/K2HPO4含量为0.35/0.7 g/L时有利于角蛋白酶的产生,验证试验证明发酵24 h时角蛋白酶活性为(66.5±2.04)U/mL:各组发酵液pH值均呈上升趋势,发酵残留物重量也随发酵培养基组成不同而呈现一定的差异,表明以羽毛为底物发酵产角蛋白酶为一复杂过程.以天青角蛋白和酪蛋白为底物对酶活测定的结果表明了实验方法和结果的可靠性.     

黑曲霉HYA4菌株产果胶酶酶学性质研究

对黑曲霉HYA4菌株所产果胶酶的酶学性质进行了研究。结果表明：该酶反应最适温度为48℃,果胶酶最适pH值为4.8,果胶酶活力稳定的pH范围为3.0-6.0;Km值为4.33mg/mL;金属离子Ca2＋、Mg2＋对果胶酶有较强的激活作用,Ba2＋对果胶酶也有一定的激活作用,Ag＋、Mn2＋、Zn2＋、Fe3＋、K＋对果胶酶有抑制作用。由SDS-PAGE测定果胶酶的相对分子量为46000＆#177;3000Da;IEF电泳测定其等电点为4.7＆#177;0.2。     

黑曲霉HYA4菌株产亚麻脱胶用酸性果胶酶的分离纯化

将黑曲霉HYA4粗酶液,通过硫酸铵盐析、Sephadex G-25脱色、Octyl-Sepharose FF疏水相互作用层析、Sephadex G-25凝胶过滤层析、Q-Sepharose FF离子交换层析、Superdex 75凝胶过滤层析等方法对果胶酶进行了纯化。纯化后果胶酶的比活力由14.56U/mg提高到102.98U/mg,其相对于发酵液的活力回收率为9.62%,纯化倍数为7.07倍。     

己酸乙酯酯化酶产生菌的自然选育及其酶学特性的初步研究

通过对窖泥、大曲、米曲、黑曲及红曲中微生物的分离、筛选，获得两株己酸乙酯合成能力较强的菌株，经初步鉴定，都归于曲霉属。两菌株均在３０℃、ｐＨ为５的麸皮培养基中培养６０ｈ后产酶最高；Ｍｍ－４菌株的酯化酶在适宜条件下（２％乙醇和０．２５％的己酸作底物，ｐＨ为４．０，３０℃）酶活力可达２２０ｕ／ｇ。     

鼠李糖乳杆菌的筛选与诱变

正为了制备益生效果强的鼠李糖乳杆菌培养物,从鼠李糖乳杆菌的选育进行研究。用牛津杯双层平板定量扩散法、酸度计测培养物pH值法及菌体干重法,对9种13株乳酸菌进行了抑菌活性、抑菌范围、产酸能力及生长速度的测定来筛选,再对筛选菌进行紫外诱变,最终选育优异益生菌株鼠李糖乳杆菌L3-22株。乳酸菌培养物中含有乳酸菌、多种代谢产物及变性培养基成分,可以作为一种有益的饲料添加剂。本试验的目的就是要选育出一株抑菌活性高而广,产酸性能强和生长繁殖速     

啤酒废渣生物处理的研究

研究了用米曲霉W10和啤酒工业的废酵母泥固体发酵啤酒废渣生产多酶蛋白饲料添加剂。在最适温度30～35℃范围和培养基初始含水量66％时，粗蛋白含量增加20％～25％，β-葡聚糖酶、酸性蛋白酶和纤维素酶最高分别为14000U／g、7000U／g和2000U／g，提高了啤酒废渣的利用价值。     

安中片中延胡索提取工艺的研究

本文对安中片中延胡索的提取工艺进行研究。最佳的提取工艺为浸泡0．5小时,提取二次,第一次5倍60％乙醇提取2小时,第二次4倍60％乙醇提取1．5小时,过滤,合并滤液,减压浓缩。本方法可靠、简单,可用于生产。     

拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)NRRL-B593在三种不同培养基中乙醇脱氢酶活力的测定

拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii〗)NRRL-B593在葡萄糖基质中可以代谢产生丁醇、乙醇、异丙醇。乙醇脱氢酶(ADH)是产生醇类的关键酶,比较了拜氏梭菌(C.beijerinckii)NRRL-B593在葡萄糖基质与氨基酸基质中ADH活性,为进一步研究该菌株的代谢及表达调控提供理论基础。首先通过监测C.beijerinckii NRRL-B593在不同培养基中D_(600)值,绘制生长曲线,后在8000 r/min,10min下收集对数期与稳定期的细胞,利用厌氧型细胞破碎仪French Press获得无细胞抽提物(CFE),最后通过Bradford法测量蛋白质含量,在厌氧条件下利用丙酮为底物,NADPH依赖型的氧化反应测其酶活力。结果显示,稳定期的ADH酶活力远远高于对数期酶活力高,氨基酸培养基中的ADH酶活力高于葡萄糖培养基。     

辣椒素提取工艺研究

本文对辣椒中辣椒素的提取工艺进行研究。最佳的提取工艺为回流提取3次,第一次8倍80%乙醇浸泡0.5小时后回流提取1.5小时,第二次7倍80%乙醇回流提取1.0小时,第三次6倍80%乙醇回流提取0.5小时,过滤,合并滤液,减压浓缩。本方法可靠、简单,可用于生产。     

一株产碱性磷酸酶细菌的分离、鉴定及其产酶特性研究

从土壤中分离、筛选到一株产碱性磷酸酶的菌株HB1,并且该菌株产生的碱性磷酸酶具有较好的热稳定性.根据形态学观察、生理生化特征,DNA中(G+C)mol%测定和16S rDNA序列同源性分析表明该菌为Bacillus licheniformi(地衣芽孢杆菌).调节基础培养基起始pH为7.5,添加Mn2+100 mM/L,发酵24 h,可使HB1菌株细胞内外酶活分别达到5.3 U/mL和5.9 U/mL.     

含抑菌成分中成药固体制剂微生物限度检查验证方法的建立

目的:建立含抑菌成分中成药固体制剂微生物限度检查验证方法.方法采用常规方法验证细菌、霉菌及酵母菌计数和控制菌检查,采用离心沉淀法加培养基稀释法合用检查验证细菌计数.结果:采用常规方法,霉菌及酵母菌计数的回收平均大于90%,细菌计数的回收率小于70%,采用离心沉淀法加培养基稀释法合用检查细菌计数大于90%.结论:在建立药品微生物限度检查验证方法时,有时需采用非常规的方法进行试验,才能得到比较满意的结果.     

树莓中超氧化物歧化酶(SOD)提取及不同条件下酶活力探究

由冷冻树莓制得粗酶液,测树莓中超氧化物歧化酶(SOD)的活力48.78U/g,其含量228.544μg/g鲜重。通过分别以新鲜的树莓、解冻1h树莓和加入浓度为10-6mol/L的抗坏血酸浸泡1min的树莓果实来探究酶活力。结果表明:相对条件下,冷冻树莓有最大的超氧化物歧化酶(SOD)活力。     

正交试验法优化柴胡利胆颗粒的水提工艺研究

为优化柴胡利胆颗粒的水提工艺,以干膏得量和总黄酮含量为指标,重点考察药材浸泡时间(h)、提取溶剂用量(倍)、提取时间(h)和提取次数(次)4个关键因素对该制剂在传统工艺条件下对水提工艺的影响。结果表明,优选的最佳水提取工艺为:加12倍量的水浸泡0.8h、提取2次、每次提取时间为2h;按处方10倍放大实验,在最佳水提工艺条件下,水提干膏平均得量为332.8566g(RSD=2.66%),平均总黄酮含量为1.25mg/g,(RSD=1.21%)。     

高压水射流解堵技术推广应用

新投井完井时,钻井液侵入地层,滤液、泥饼等对地层产生堵塞,使得供液能力变差,制约生产开发。而老井受颗粒运移、沥青沉淀、粘土膨胀等因素的影响,造成泥砂堵塞、产量递减,影响油井开发。普通酸化、酸洗工艺解堵效果不理想,而高压水射流解堵技术产生高冲击力及高能量脉冲,能冲出井筒及近井地带的细砂等堵塞物,再通过氮气返排将堵塞物带出地面,起到解除污染堵塞的目的。     

三株新型发酵产氢菌的分离和不同发酵条件下产氢性能的比较

氢能是理想的清洁能源,生物制氢技术的研究和开发已成为当前一个研究热点。许多细菌在厌氧条件下发酵复杂的有机化合物,同时产生H2。本文选择了来自同一活性污泥样品的3株有较高产氢能力的发酵细菌,采用生化和电镜技术对其形态学特征进行了观察比较,并进一步比较研究了在不同pH值条件下,它们产氢量、细菌生长量、液相发酵产物组成的变化和差异。获得了三株产氢菌的单位体积培养基最大累积产氢量,提出了纯培养生物制氢的最佳条件,为混合培养生物制氢强化工艺提供参考。     

小曲白酒的生产工艺及质量控制

小曲白酒是以原料、浸泡、淋洗并沥干、初蒸、水焖、复蒸、摊凉、加曲、入箱培菌糖化、醅糟、发酵、蒸馏、成品的传统生产工艺;严格控制原料质量、严格工艺操作、合理选曲加曲、怪味的处理、贮存勾兑等,对小曲白酒生产过程进行质量控制。