金线莲多糖对Hep1-6细胞活性的影响

通过采用MTS法、流式细胞术法以及构建RAW264.7/Hep1-6细胞共培养模型检测经不同浓度(0、125、250、500、1 000、2 000μg/mL)金线莲多糖(Anoectochilus roxburghii Polysaccharides, APS)处理的RAW264.7细胞和Hep1-6细胞的增殖及周期情况,研究APS对Hep1-6细胞生长的影响.直接使用APS处理Hep1-6细胞,发现不同浓度APS对Hep1-6细胞增殖无抑制作用,且对其周期无影响.由共培养模型可知,不同浓度APS先作用于RAW264.7细胞24 h后,将RAW264.7细胞及其培养液与Hep1-6细胞共培养24 h后,0、125、500μg/mL试验组与不加药无RAW264.7空白对照组相比,Hep1-6细胞受到一定抑制作用,细胞毒性为1级. 125、500μg/mL试验组与不加药含RAW264.7对照组相比,Hep1-6细胞具有显著抑制(P <0.01),但2 000μg/mL试验组中Hep1-6细胞生长率高于对照组. APS直接作用于Hep1-6对其活性无影响,而RAW264.7与Hepl-6共培养后,RAW264.7可以抑制Hepl-6的生长,加APS处理RAW264.7后再与Hepl-6共培养,一定浓度范围内可以进一步抑制Hepl-6的生长,但过高浓度的APS反而对共培养的Hepl-6生长有一定促进作用.     

高效液相色谱法测定K562细胞对顺铂的摄取

顺铂是目前治疗癌症最有效的药物之一,测定细胞内顺铂的含量对于了解细胞摄取顺铂和顺铂发挥药效有重要作用．本研究通过MTT法检测了顺铂杀伤K562细胞的有效浓度,建立并利用高效液相色谱法（HPLC）检测了K562细胞对顺铂的摄入．结果表明K562细胞经10μg/mL顺铂处理12h后,细胞活性显著下降;细胞外有36．75％顺铂进入胞内．实验数据显示,顺铂对K562细胞的杀伤与其在胞内的累积相关．     

神经癌细胞PC12对二甲基亚砜耐受剂量的分析

通过观察不同剂量二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide DMSO)作用下PC12细胞形态和生长状态的变化,确定PC12细胞对DMSO的耐受剂量.按照一定浓度梯度(V/V)将DMSO加入培养液干预后的24、48和72 h于倒置相差显微镜下观察AO/EB染色前后细胞的形态特征,同时用四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法检测细胞的生存率和计算半数抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC50).结果表明:DMSO浓度为14 mL/L时,24 h内90%的PC12细胞生长正常,形态完整,活力与对照组比较无差别,浓度提高到20 mL/L时,24 h时细胞生存率可下降27%,随着作用时间延长,细胞生存率进一步降低;24、48和72 h对应的IC50值分别为31.4、23.9和19.2 mL/L.因此,对PC12细胞而言,24 h内的应用终浓度应低于14 mL/L,干预时间如需延长,DMSO的应用剂量应相应降低.     

水杨酸对水稻幼苗硝酸还原酶活性和根系生长的影响

用 5 0mg/L水杨酸 (SA)浸种处理后 ,水稻根系生长受到明显促进。幼苗经 5 0mg/LSA诱导处理 2 4h后 ,体内的硝酸还原酶活性 (NRA)显著增强。与此相一致的是 ,5 0mg/LSA处理不仅能提高幼苗内源细胞分裂素和生长素的水平 ,还可以降低脱落酸的含量。提示SA对硝酸还原酶活性的诱导作用可能是通过调节内源激素的水平来实现的。     

50Hz正弦磁场对细胞超氧产率及细胞增殖的影响

中国仓鼠肺成纤维细胞（CHL）和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）受磁场辐照后,采用荧光光度法检测细胞的超氧产率和采用噻唑蓝比色分析法检测细胞的增殖情况。50Hz、0．4mT正弦磁场辐照30min引起CHL细胞和HUVEC细胞的超氧产率分别较对照组增加12％和19％：该磁场辐照24h导致CHL细胞和HUVEC细胞的数目分别较对照组上调9％和10％。提示50Hz、0.4mT正弦磁场促进CHL细胞和HUVEC细胞的增殖,可能与超氧自由基产率的上调有关。     

用十二烷基硫酸钠消除枯草芽孢杆菌中的质粒

为获得宿主菌 ,研究了十二烷基硫酸钠 (SDS)对枯草芽孢杆菌中质粒的消除 .将过夜培养的枯草芽孢杆菌2 4/pMX45接种于含SDS( 0— 0 .0 0 8% )的LB培养基中 ,当SDS浓度 (w /v)大于或等于 0 .0 0 6 %时 ,菌体不能生长 .SDS的亚致死浓度为 0 .0 0 5 % ,其致死率达 99% .菌液稀释后涂LB平板 ,再随机挑选单菌落至抗性平板 ,检测由质粒编码的红霉素抗性是否丢失 .氯化铯 溴化乙锭梯度离心及质粒DNA的电泳图像证实了 2 4/pMX45的衍生菌株A7中的质粒已完全被消除 .A7延迟期较短 ,并且细胞浓度高于 2 4/pMX45 .用SDS处理 8h后 ,2 4/pMX45的遗传标记开始丢失 ,消除率持续增高至 2 2h ,随之消除质粒的菌体量保持恒定 .在未经SDS处理的对照实验中 ,相同条件下培养 2 4h及 48h后 ,没有发现质粒自然丢失的现象 ,因此SDS能消除枯草芽孢杆菌中的质粒     

四鳃鲈内脏组织细胞原代培养

采用动物组织块培养法对四鳃鲈（Trachidermus fasciatus）内脏组织进行离体培养研究.对培养条件进行了优化,比较了不同培养基（DMEM、M199）、不同生长条件（加生长因子、不加生长因子）和不同培养条件（CO2培养箱、恒温培养箱）下离体培养细胞的生长情况.结果显示：内脏组织接种后3～5 h,细胞迁移伸展,6 d后生长细胞集群汇合,来源于不同组织的再生细胞呈现不同的形态.在M199培养基中添加青链霉素抗生素（0.28%）及10%小牛血清和1%碱性成纤维生长因子、控温27℃、pH值为7.2～7.4并在CO2（5%）培养箱中培养的内脏细胞生长最快.不同来源的组织培养中肝细胞在离体培养中细胞增殖生长速度最快.     

刺五加多糖对人白血病K562细胞作用的研究

目的:研究刺五加多糖对体外培养人白血病K562细胞有无增殖抑制和凋亡诱导作用。方法:取培养至对数生长期的K562细胞(密度为5×104/mL和1×106/mL)分别接种于96孔培养板(100μL/孔)及50mL培养瓶(1.5mL/瓶)中,加入不同浓度的刺五加多糖作用24h后,用CCK-8法检测刺五加多糖对K562细胞增殖抑制作用;荧光显微镜检测细胞凋亡。结果:不同浓度刺五加多糖(0.405、0.810、1.620、2.430、3.240mg/mL)作用K562细胞24 h,抑制率分别为16%、27%、48%、50%、55%;荧光显微镜下观察发现培养K562细胞中出现核固缩、凋亡小体。结论:刺五加多糖对体外培养K562细胞生长有明显的抑制作用,可诱导K562细胞凋亡。     

人工感染E.tenella鸡嗜酸性细胞的动态变化

8 0羽 2 1日龄罗曼蛋公鸡随机分成试验与对照两组 ,研究雏鸡在 2 1日龄人工感染E .tenella后第 1、2、3、4、5、6、7、8天鸡嗜酸性细胞的动态变化。结果表明 :感染E .tenella之后 ,试验组比对照组嗜酸性细胞明显增多 ,每日组间差异均极显著 (P <0 .0 1 ) ;在感染后第 1～6天 ,试验组日间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,在感染后第 6～ 7天 ,试验组日间差异极显著 (P <0 .0 1 ) ,而在感染后第 7～ 8天日间差异显著 (P <0 .0 5 )。     

磁场对绿豆芽长及超氧化物歧化酶的实验研究

用恒定强度的磁场(1T)对绿豆进行不同时间的处理,得出了不同磁场处理时间和培养时间对绿豆芽长和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。实验结果表明:恒定磁场强度下不同处理时间对绿豆的芽长和SOD活性是有影响的,磁场强度为1T时,在6个处理时间中,30 min处理组在每次测量时芽最长。对绿豆的SOD测定表明:经过磁场处理后的绿豆SOD含量产生了明显的差异,培养时间为7 h的实验组在各磁场处理时间下的SOD活性均高于对照组,在培养21 h后差异最大;磁处理具有滞后效应,磁处理短期内并不产生明显的效果;豆芽SOD含量和芽长并不成对应关系。     

Ethaselen: a novel organoselenium anticancer agent targeting thioredoxin reductase 1 reverses cisplatin resistance in drug-resistant K562 cells by inducing apoptosis

It has been reported that Ethaselen shows inhibitory effects on thioredoxin reductase (TrxR) activity and human tumor cell growth. In order to find an efficient way to reverse cisplatin resistance, we investigated the reversal effects of Ethaselen on cisplatin resistance in K562/cisplatin (CDDP) cells that were established by pulse-inducing human erythrocyte leukemic cell line K562, which are fivefold more resistant to cisplatin compared to K562 cells. The morphology and growth showed that the adhesion of K562/CDDP further decreased while the cell volume increased. The proliferation of K562/CDDP is strengthened. The antitumor activities in vitro were assessed by MTT (3-(4,5- dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay and combination index (CI), showing the significant synergic effects of cisplatin and Ethaselen. Focusing on apoptosis, a series of comparisons was made between K562 and K562/CDDP. Cisplatin induced higher reactive oxygen species (ROS) generation in K562 and subsequently induced the formation of mitochondrial permeability transition pores (PTPs). In addition, cisplatin increased the ratio of Bax to Bcl-2 in K562, which can influence the mitochondrial membrane permeability. PTP formation and mitochondrial membrane permeabilization eventually resulted in the release of cytochrome c and activation of the Caspase pathway. However, these effects were not clearly seen in K562/CDDP, which may be the reason for the acquired CDDP resistance. However, Ethaselen can induce a high level of ROS in K562/CDDP by TrxR activity inhibition and increased ratio of Bax to Bcl-2 in K562/CDDP by nuclear factor κB (NF-κB) suppression, which subsequently induces the release of cytochrome c in K562/CDDP. This response is partly responsible for the reversal of the cisplatin resistance in K562/CDDP cells.     

Homoharringtonine induces apoptosis of endothelium and down-regulates VEGF expression of K562 cells

Homoharringtonine (HHT) has currently been used successfully in the treatment of acute and chronic myeloid leukemias and has been shown to induce apoptosis of different types of leukemic cells in vitro. Emerging evidence suggests that angiogenesis may play an important role in hematological malignancies, such as leukemia. How ever, whether HHT can relieve leukemia by anti-angiogenesis is still unknown. We investigated the anti-angiogenesis potential of HHT with the human umbilical vein endothelial cell line (ECV304) and leukemic cell line (K562) in vitro. Cellular proliferation was determined by MTT assay and apoptosis was analyzed by flow cytometry. The mRNA expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) was assessed by RT-PCR and VEGF protein production was detected by Western blot. Inhibition of cell proliferation and induction of apoptosis by HHT were discovered in ECV304 cells, and appeared in a dose- and time-dependent manner. Also, treatment with HHT caused down-regulation of VEGF mRNA expression in K562 cells in similar dose- and time-dependent manner and inhibition of VEGF protein production in K562 cells in response to the enhancing concentration of HHT. The results demonstrated that HHT could also induce apoptosis in endothelium and down-regulate VEGF expression in K562 cells. In conclusion, we believe HHT has anti-angiogenesis potential and speculate that HHT might exert its anti-leukemia effects via reduction of angiogenesis.     

Homoharringtonine induces apoptosis of endothelium and down-regulates VEGF expression of K562 cells

INTRODUCTION Homoharringtonine (HHT) is a cephalotoxin alkaloid with anti-leukemic activity and had been used successfully in the treatment of acute and chronic myeloid leukemias (O払rien et al., 1995; 1999; Feldman et al., 1992). The principal mecha-nism of action by HHT is the inhibition of protein synthesis in a dose- and time-dependent manner by binding to ribosome and inhibiting polypeptide chain elongation (Tujebajeva et al., 1989; Zhou et al., 1995). HHT had been shown to indu…     

海洋来源真菌的抗肿瘤抗真菌活性筛选

目的：将深海来源的16株真菌经发酵培养与活性筛选,获取活性菌株以供筛选药源活性产物。分别经真菌普通培养基和人工海水培养基发酵获得样品,采用MTT法测试抗肿瘤活性,纸片法测试抗真菌活性。结果：菌株中有3株经过普通发酵培养基发酵和4株经过海水培养基发酵的样品在100μg/mL浓度下对K562细胞的抑制率大于60%;抗真菌活性测试中,仅有菌株16-02-1的发酵样品对受试白色念珠菌ATCC 10231和土曲霉W-1均呈现一定的抑制活性。结论：深海来源真菌在不同培养基中发酵获得的样品,抗肿瘤活性各不相同,经过筛选获得高活性菌株为寻找药源活性产物提供了菌株。     

火焰原子吸收光谱法检测人白血病细胞K562对顺铂的摄入

建立了检测1640培养液中顺铂含量的火焰原子吸收光谱实验方法,并用该方法来检测人白血病细胞K562经10μg/mL顺铂孵育8 h后,细胞外液的顺铂含量.具体方法为:将含有顺铂的培养液加热干燥后用含有释放剂的无机酸溶剂溶解,火焰原子吸收光谱法测定铂的含量.对无机酸和释放剂进行了筛选,确定了最佳测定条件并检测了上述实验条件下细胞外液中的顺铂含量.结果显示,含顺铂的培养液或细胞外液加热干燥后,可用体积分数为1%HNO3溶液完全溶解,在溶解过程中加入质量分数为1%的La(NO3)3,可使铂成分获得良好的释放效果.K562细胞经10μg/mL顺铂孵育8 h可致细胞活性显著下降(P0.05),此时约6.2%顺铂进入胞内.与传统顺铂检测方法相比,文中的制样方法可使样品不经灰化即可有效检测肿瘤细胞对顺铂的吸收量.     

一种噻二唑类杂环化合物抗K562肿瘤活性研究

研究噻二唑类杂环化合物对人白血病K562癌细胞的体外抗肿瘤活性筛选。方法:利用MTT法间接测定各化合物对肿瘤细胞后的生长情况,并计算出肿瘤细胞的抑制率,选择抑制率较高的化合物进行深入研究,计算其半数抑制浓度(IC50),并考察其浓度-生长率线性关系。结果:大部分化合物均显示了较好的人白血病K562癌细胞抑制活性,化合物1抑制率达92.01%,IC50为7.07×10-5mol/L,浓度-生长率R2=0.986。结论:噻二唑类杂环化合物具有较好的抗肿瘤活性。     

砷剂对肿瘤多药耐药细胞株作用机理的研究

三氧化二砷（As2O3）是人们观念中的剧毒物砒霜中的有效成分．它既是一种致癌剂又有一定有益的生物学作用．本实验研究证实，砷剂在非细胞毒性剂量下能降低化疗药物阿霉素（ADM）对多耐药（multi drug resistance，MDR）肿瘤细胞株K562/ADM细胞的IC50（细胞抑制率达50％时化疗药物的浓度），表明三氧化二砷具有逆转人红白血病细胞株K562/ADM细胞MDR作用．     

砷剂对K_(562)细胞凋亡作用的基础研究

[目的]研究三氧化二砷对K562细胞凋亡的诱导.[方法]采用人红白血病细胞株K562细胞常规培养,给不同浓度的三氧化二砷,在不同的时间收获细胞,用台盼蓝排染法,DNA荧光染料Hoechst33342荧光染色法,及碘化丙啶(PI)与Hoechst33342共染计数坏死细胞的PI阳性率等方法,检测其对K562细胞的影响.[结果]三氧化二砷能够诱导K562细胞凋亡.并且呈现浓度依赖性和时间依赖性.[结论]三氧化二砷主要以诱导肿瘤细胞凋亡而表现其毒性作用.