大鼠睾丸支持细胞的分离培养及鉴定

目的:通过改进大鼠睾丸支持细胞的分离方法,获得高纯度支持细胞。方法:选用18~22日龄雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,去除睾丸被膜、剪碎组织块,采用0.25%胰酶和0.1%Ⅳ型胶原酶单次消化,分别在37℃水浴震荡消化15min、10min,经100目细胞筛过滤收集细胞,置于37℃、5%CO2培养箱中进行培养,24h后大多数细胞完全贴壁,观察细胞生长,待长满培养瓶80%进行传代培养。显微观察不同时间段、不同代睾丸支持细胞的形态,采用免疫荧光方法对睾丸支持细胞进行鉴定。结果:显微观察可见分离培养的支持细胞胞质呈不规则的多处突起,细胞核呈圆形或椭圆形,细胞之间交织成网状;免疫荧光Vimentin特异性表达鉴定显示,所分离培养的细胞为睾丸支持细胞,经显微镜下计数其纯度达95%以上。结论:缩短两步酶消化时间,培养24h后用预冷磷酸盐缓冲溶液(PBS)洗换培养液,连续传代培养至第三代,此方法简化了分离培养支持细胞步骤,同时提高了支持细胞的纯度和细胞数量。     

成年大鼠心室和窦房结细胞急性分离方法和动作电位比较

介绍了急性分离成年大鼠心室肌细胞和窦房结细胞的方法。通过全细胞膜片钳实验技术分别检测了窦房结细胞的自发动作电位和心室肌细胞的诱发动作电位,比较了二者动作电位波形在形态上的差异,并通过计算比较了心室肌细胞和窦房结细胞动作电位时程和静息电位水平,分析了二者电生理特性差异形成的原因。     

益肾强心合剂对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:观察益肾强心合剂对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法:以皮下大量注射异丙肾上腺素(ISO)的方法制备慢性心衰大鼠模型.造模成功后随机分为模型对照组、卡托普利组及益肾强心合剂大、小剂量组,另设正常对照组,给药四周.TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化方法检测心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白表达,计算Bcl-2/Bax比值.结果:模型对照组心肌细胞凋亡指数、Bax促凋亡蛋白表达明显增加,Bcl-2抑凋亡蛋白表达减少、Bcl-2/Bax的比值明显降低,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05);益肾强心合剂大、小剂量组凋亡指数、Bax蛋白显著降低,Bcl-2蛋白明显增加、Bcl-2/Bax比值明显升高,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05).结论:益肾强心合剂对慢性心衰心肌细胞凋亡有良好的抑制作用,是防治慢性心衰(CHF)的有效药物.     

山莨菪碱对大鼠心肌细胞钙离子浓度的影响

山莨菪碱对静息状态下心肌细胞浆[Ca2+]i无显著影响,对高钾诱发心肌细胞浆[Ca2+]i升高,山莨菪碱10μmol·L-1虽有抑制作用,但与对照组相比天显著差异（P＞0.05）,山莨菪碱50μmol·L-1可显著抑制大鼠心肌细胞浆[Ca2+]i升高,与对照组相比,差异显著（P＜0．01）     

盲信号分离的细胞神经网络方法

本文用双层的细胞神经网络(CNN)进行盲信号分离.提出CNN的拓扑结构和内部参数.CNN的第一层功能是一只自适应渐近收敛于平衡点的滤波器.一个平稳随机的模型,是第一层收敛的细胞,用于探测的必要条件,也是对标准的平衡状态解的主要条件.第二层的功能是一个信号分离器.仿真显示,CNN盲信号分离器具有良好的鲁棒性,而且工作平稳.     

和营安心方对过氧化氢损伤大鼠胚胎心肌细胞的保护作用

目的：探讨和营安心方对过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）所致大鼠胚胎心肌细胞损伤的保护作用。方法：建立H2O2致大鼠胚胎心肌细胞氧化应激损伤模型,设正常对照组（Control）、过氧化氢（200μmol·L-1）模型组（Model）、和营安心方（500、250、125 mg·kg-1）三个剂量组,四甲基偶氮唑盐（3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl）-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT）代谢率检测心肌细胞细胞活性,测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）及丙二醛（malondialdehyde,MDA）的含量。结果：H2O2组细胞活性显著性降低（P<0.01）, LDH及MDA含量显著性升高（P<0.01）;和营安心方可显著提高H2O2损伤心肌细胞的活性,减少MDA 含量（P<0.05）,降低LDH 活性（P<0.05）。结论：和营安心方对H2O2损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化有关。     

中草药节育胶囊对成年雄大鼠生育调控作用实验研究

目的:观察抗生育胶囊抗生育情况.方法:通过应用口服中草药节育胶囊对雄性育龄大鼠进行用药前后睾丸生殖上皮细胞形态变化和血清睾丸酮测定,观察药物抗生育情况.结果:挑选出用药前生育率达到100%的雌雄大鼠,观察用药后生育情况,结果生育率明显下降,只有12%.血清睾酮用药组较对照组明显下降(P＜0.001).结论:中草药抗生育胶囊生育调控作用确切,有进一步研究价值.     

不同负荷训练对大鼠心肌细胞热休克蛋白70表达的影响

通过建立大鼠有氧游泳训练和过度游泳训练运动心脏模型,观察长期不同负荷训练后心肌细胞HSP70的表达情况,探讨运动诱导心肌细胞HSP70表达的规律,旨在为进一步研究运动员心脏提供实验依据．研究结果表明,运动训练可诱导心肌细胞HSP70表达增强,并且HSP70的表达与运动负荷存在一定的关系,随运动负荷增加,其表达呈上升趋势．     

电击后心肌细胞骨架改变的研究进展

心肌细胞骨架主要由微管、中间丝和微丝及相关的骨架蛋白组成,它不仅作为细胞的支架,同时也参与细胞的一系列生理活动,因此,对心肌细胞骨架的研究日益受到重视。本文综合目前对心肌细胞骨架的基本构成、各种心肌细胞骨架成分在电击死亡前后发生的变化等研究进展,为以后的研究提出新的思路和问题。     

运动训练与心肌细胞凋亡研究的新进展

心肌细胞凋亡是在一系列基因调控下进行的程序化细胞死亡,它存在于心血管系统的许多生理和病理变化过程中,是导致多种心血管疾病发生的重要细胞学基础。该文从心肌细胞凋亡的研究方法和生物学特征出发,综述了心肌细胞凋亡的调控基因,运动训练对心肌细胞凋亡的影响及其机制的研究现状,并对心肌细胞凋亡在体育科学领域的研究进行展望。     

心肌缺血对左室心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响及其分子机制

目的:研究缺血对左室心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响,探讨心肌细胞凋亡的分子机制。方法:采用结扎冠脉左前降支(LAD)法制作大鼠心肌缺血模型;运用DNA琼脂糖凝胶电泳技术鉴定基因组DNA的断裂情况;使用Northern Blot检测缺血心肌细胞p53、c-myc及bcl-2的表达活性。结果;a.缺血能够诱导左室心肌细胞凋亡;b.缺血明显上调p53基因的转录;c.缺血的左室心肌细胞c-myc mRNA含量显著增加;d.缺血减弱了bcl-2基因的转录。结论:内源性促凋亡基因p53、c-myc及抗凋亡基因bcl-2表达活性的改变介导了缺血诱导的心肌细胞凋亡,凋亡是心肌缺血时心肌细胞缺失的一个重要原因。     

红曲米中红曲色素及Monaco link的提取与分离

本文主要研究了红曲米中红曲红、黄色素和Monaco link的分离方法。提出通过乙醇萃取、新的组合色谱柱(硅胶色谱柱和中性氧化铝色谱柱)分离程序分离上述三种物质的方法。红曲红色素、黄色素的色调分析显示分离效果良好。并用HPLC法测定了分离前后红曲样品中的Monaco link含量。     

大鼠心室肌细胞膜片钳技术研究生实验设计

面向生物学科硕士研究生开设细胞电生理实验可弥补高校细胞电生理实验教学领域的空缺,使学生更好掌握细胞电生理理论知识。论文详细阐述了依托于膜片钳实验技术、以大鼠心室肌细胞动作电位为主要研究对象的细胞电生理实验课程的具体实验内容,相关的实验方法和实验结果。记录大鼠心室肌细胞的动作电位、三种主要成分(Na+、K+和Ca2+)离子电流的分离可以使学生更好理解动作电位产生的离子机制和三种主要成分电流的动力学特性。此外,记录和观察BK单通道和全细胞电流特征可以使学生在认识某种特异性离子通道电流特性的同时加深对膜片钳实验技术的理解和掌握。     

醋酸铅对雄性小白鼠精子形态的影响

将 5 0只小白鼠随机分成 5组 ,分别腹腔注射甲基磺酸乙脂 6 0mg/kg ,去离子水 16 6ml/kg ,醋酸铅 2 1mg/kg ,10 5mg/kg ,5 2 5mg/kg ,每天一次 ,连用 5天。试验 35天时处死小白鼠 ,检查各组小白鼠的精子形态。结果显示精子畸形率为 :甲基磺酸乙脂组为 4 4 5 % ,去离子水组为 1.8% ,高、中、低剂量醋酸铅组分别为 4 0 .5 % ,30 .4 %和 15 .6 % ,说明醋酸铅对小白鼠精子有致畸形作用 ,而且随着剂量的增大精子畸形率增加。     

试论成人教育班主任管理的方法与艺术

新形势下成人中专学校的生源发生了很大的变化,作为班级工作的组织者、管理者。面对挑战,班主任必须不断探索,寻求新的管理方法。     

成人教学原则研究的问题及对策

成人教学原则研究发展到现在，虽然取得了一定的成绩，但也还存在着一些不可忽视的问题，如不注意结合成人教学特点，借鉴其它学科力度不够，不能充分地消化吸收，构建标准不统一等。因此应大胆借鉴其它学科成果，注意原则的可操作性，构建标准的统一性，构筑出一个科学、合理和实用的成人教学原则体系。     

学习方式:成人学习在网络教育中转轨

网络学习是一种主动的、个性化的、基于资源的学习,它的主要对象是成人。网络学习所具有的开放性、交互性、多样性等特征,使成人学习必须从维持性学习、模仿性学习、群体性学习、竞争性学习转变为创新性学习、自主性学习、个性化学习以及合作性学习。     

鸭胚成纤维细胞培养方法的初步建立

在鸭胚成纤维细胞 (DEF)的制备及单层维持过程中 ,通过对不同消化方式 ,营养液的不同pH值 ,不同血清浓度对细胞生长及维持的影响 ,摸索出一种比较经济实用的培养方法 :细胞增殖时 ,最低血清浓度在 5 %左右、pH6 .8～ 7.2时 ,生长状态较佳 ;维持细胞时 ,血清浓度在 1～ 2 %、pH值在 7.4～ 7.6时较好。添加L -谷氨酰胺后 ,细胞的贴壁性增强     

胚胎干细胞的鉴定方法研究进展

胚胎干细胞的鉴定工作对于研究和利用胚胎干细胞具有重大的意义.本文综述了利用胚胎干细胞的形态特征、生长特性、染色体结构、多能性和全能性,以及免疫学方法鉴定胚胎干细胞的研究情况,并介绍了几种常用的鉴定过程.