HBV核酸光敏生物素探针的制备

利用设计合成的特异性引物，通过PCR扩增获得乙肝病毒的S区621个bpDNA片段．该扩增产物经EcoRI与BamHI双酶切后直接克隆进入PSK载体进行表达，再通过扩增重组菌株，以获得大量的S区DNA片段，对它们进行光敏生物素标记，制成探针，对乙肝病毒进行检测灵敏度高，特异性强，其灵敏度可达到4pg水平。     

PCR 是如何扩增特定 DNA 片段的

1提出问题在PCR过程中,有时需要扩增DNA中特定的片段(图1),如目的基因的扩增等。那么,如何控制扩增特定的DNA片段呢?人教版高中《生物》选修1教材中指出:"DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列,使这段固定长度的序列呈指数扩增。"对这句话,该如何理解?     

PCR技术研究进展

PCR技术是近年发展起来的一种体外特异性扩增DNA片段的新技术，在分子生物学检测与研究中得到广泛应用。本文扼要介绍了PCR技术的基本原理，对PCR技术的方法及特点作了详细阐述，特别是PCR技术在分子生物学的理论研究，遗传病的产前诊断，突变基因的检测，法医学鉴定以及病毒和癌症检测等应用研究的新进展作了综述。预测PCR技术在分子生物学的各个领域的应用具有广阔的前景。     

DNA分子标记技术及其原理

综述几种DNA分子标记技术：RFLP是用限制性内切酶切割不同个体基因组DNA后，含同源序列的醇切片段在长度上的差异，可靠性较高、但操作烦琐，信息含量低；染色体原位杂交是利用特异性核酸片段作探针，直接同染色体DNA片段杂交，在染色体上显示特异DNA，准确、直观，但技术非常复杂；PCR是模仿DNA在生物体内的自然复制过程来扩增DNA片段，安全性好，快速易行；RAPD是以人工合成的碱基顺序随机排列的寡核苷酸单链为引物，对所研究的基因组DNA进行PCR扩增，产生多态性的RAPD片段，可以检测多个基因位点，但不能识别杂合子位点；AFLP指纹技术是在RFLP与RAPD两种指纹技术基础上建立和发展起来的，有较高的稳定性，但对基因组纯度和反应条件要求较高；DNA芯片技术是一种以杂交测序基本理论为基础的新型生物技术，用于测序、基因表达、疾病诊断等，但造价、探针的密度与纯度还有待完善；小卫星DNA一般与RFLP技术结合以获得小卫星DNA指纹图谱，信息含量高，但它在染色体上分布不均匀；微卫星DNA既可用作探针获得指纹图谱，也可通过PCR方法进行微卫星位点多态性分析，但工作量大；ISSR即内部简单重复序列，也是一种新兴的分子标记技术，具有很好的稳定性和多态性。     

PCR技术的研究与应用

PCR（ polymerase chain Reaction──聚合酶链反应,简称PCR）是一种体外扩增特异性 DNA片段的酶学方法。其原理是:用一对寡核苷酸作为引物,引导 DN A聚合酶在引物识别位点之间的两条互补链上进行DNA合成。经过模板变性、引物复性、引物延伸三步反应的多次循环,可使特定的DNA片段在数量上呈指数增加。这项操作简单、省时且已实现自动化的先进技术,已成为分子生物学及临床医学等理论研究和实际应用的重要工具。本文将阐述近年来几种PCR技术的改进与应用。 一、PCR固相分析 1988年Syvanen等首先将 DNA固相技术引入PCR扩增产物的定量研究中,该法采用了DNA的5’端被生物素（biotin）修饰的PCR引物,使扩增DNA序列的末端均带生物素,接着在溶液中用同位素标记探针与扩增序列杂交,杂交链借5’端生物素结合在能与其特异结合的亲合素（avidin）包被的固相载体上（即     

龙竹和麻竹FT同源序列的扩增与序列分析

根据拟南芥Flowering Locus T（FT）基因和水稻Heading date 3a（Hd3a）基因的序列设计引物,通过PCR扩增的方法分别从麻竹和龙竹基因组DNA中各得到长为334bp的DNA片段.经BLAST检索、基因结构分析和编码蛋白功能域预测等分析,初步确定所得DNA片段可能是麻竹和龙竹中的FT同源基因的部分序列.     

关于“利用PCR技术扩增目的基因”的教学建议

正PCR技术是生物学研究上一项非常重要的技术,它是体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,只需在eppendorf离心管中建立反应,经数小时后,就能将极其微量的目的基因或某一特定DNA片段扩增数十万倍,甚至千百万倍.这项技术不仅可以用于获取和扩增目的基因,而且在癌症治疗的监控、临床医疗诊断以及法医学等众多领域都有着重要的用途,如此一项有重要作用的技术,笔者认为高中生必要理解和掌握这项技术.但是实际情况是学生对于PCR技术的掌握情况并不是很理想,对PCR技术原理和过程的掌握不够到位.究其原因,一方面由于PCR扩增DNA技术所需设备昂贵,一般中学很少具备动手操作的条件,另一方面PCR技术在高中教材中仅有少     

PCR技术在环境监测中的应用

PCR技术是在体外合成特异性DNA片段的方法，其基本原理类似于生物体内的DNA的复制，PCR技术应用于环境监测具有快速、灵敏、准确、简便、特异性强的特点，被广泛应用于水体、气体和土壤等方面环境污染的监测中，PCR技术对环境保护具有深远的意义.     

从PCR技术谈教材中DNA分子复制中的几个问题

随着2017年高考考试大纲颁布,生物学科教材选修3中“基因工程的原理及技术”调整成“基因工程的原理及技术（含PCR）”。这一调整明确了PCR技术为考试范围。PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。其本质是模拟生物体内DNA复制的过程。然而,必修二课本中DNA的复制过程和选修三中的PCR扩增DNA过程有诸多不同。教材内容跨越很大。第一,PCR技术中两条链延伸方向不同,必修二并未提及;第二,PCR中说的引物又是怎么回事;     

PCR技术研究进展

PCR技术是近年发展起来的一种体外特异性扩增DNA片段的新技术,在分子生物学检测与研究中得到广泛应用.本文扼要介绍了PCR技术的基本原理,对PCR技术的方法及特点作了详细阐述,特别是PCR技术在分子生物学的理论研究,遗传病的产前诊断、突变基因的检测、法医学鉴定以及病毒和癌症检测等应用研究的新进展作了综述.预测PCR技术在分子生物学的各个领域的应用具有广阔的前景.     

快速诊断小鹅瘟PCR方法的优化建立

为建立快速诊断小鹅瘟的PCR方法,根据已发表的GPV主要结构蛋白VP3基因序列,经多序列比对和Oligo6．0软件分析设计特异性PCR引物。以微量法提取病鹅肝组织DNA,优化PCR反应引物退火温度、循环次数和鉴定其特异性,并与酚氯仿法和煮沸法进行同步对比研究。结果显示,建立的PCR检测方法能够特异性检测病鹅肝组织中GPV的核酸,其扩增片段大小为343bp,最佳退火温度为58℃,最佳循环次数为35次。微量法提取的病毒核酸PCR检测灵敏度分别是酚氯仿法的50倍和煮沸法的2500倍。该PCR检测方法不与鹅副黏病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、鸭瘟病毒以及健康鹅肝组织发生交叉反应。本研究建立的GPVPCR检测方法能够快速诊断小鹅瘟。     

那比水电站水库水温计算分析

文章对广西田林县那比水电站库区水温进行了计算,找出其变化规律,为碾压混凝土在施工期和运行期的温度场和温度徐变应力的仿真计算分析提供重要的数据。从而采取合理的碾压混凝土坝体降温措施。     

福建崇武底栖海藻的月变化研究

研究了崇武沿海底栖海藻的种类、繁殖、生物量、垂直和平面分布诸方面，都有明显的月变化。5月、6月是重要的月份，波浪和底质主导海藻的垂直和平面分布，此外还调查出蕴藏量大的海藻种类，供开发利用参考。     

Simplification and Experimental Verification for Temperature and Humidity Field Coupling Model of Conservatory Soil

Based on the surface energy balance model which is widely used abroad, a temperature and humidity field coupling model of conservatory soil without crop vegetation in full illumination was established. Considering the relatively closed environment in conservatory, weak solar radiation and little surface evaporation of soil, the daily variation of water content in different soil layers may be neglected, then the temperature and humidity field coupling model was simplified to a one-dimensional thermal diffusion model. The simplified model and the temperature and humidity field coupling model adopted the same computational method of soil physical parameters and discrete format of heat diffusion differential equations, and were applied to the continuous simulation of temperature field in conservatory soil without crop vegetation in full illumination. Through the comparison between simulation results and experimental data, the precision of the simplified model was verified. The typical rule of soil heat flux variation in a 24 h cycle was also obtained.     

钦州湾表层海水温度盐度及pH值时空变化

根据2009年春夏秋冬4个季节调查资料,分析钦州湾表层海水温度、盐度及pH值的季节变化和分布特征。结果表明：钦州湾海水平均温度春季20．4℃,夏季30．1℃,秋季16．0℃,冬季14．6℃,变化特征与气温的季节变化相同,空间分布为夏秋季河口区的水温都略高于湾口区,而春冬季则相反。海水平均盐度春季20．067,夏季17．975,秋季23．864,冬季23．660,表现为秋季〉冬季〉春季〉夏季,各季节空间分布总体表现为河口区低,湾口区高的趋势。海水pH平均值春季7．82,夏季8．11,秋季8．01,冬季8．10,全年空间分布高值区均出现在大风江口外海域。钦州湾海水比较适宜大蚝、对虾、文蛤等广温广盐性品种的海水养殖。     

硅基铜膜屈服强度的实验研究

采用光学方法,测量了硅基镀铜膜的应力随厚度及温度变化关系。实验结果表明与弹性理论一致,屈服强度与膜厚的倒数近似成正比,且应力与温度相关。     

Photocatalytic activity of lanthanum doping TiO2

The photocatalytic activity of the mixtures of TiO₂ with the rare earth oxide La was investigated. The study on the effect of the rare earth oxide content, calcinating temperature and calcinating time on the performance of the mixture revealed that sample treated under higher temperature and longer time had higher photoactivity than pure TiO₂. The experimental results of polycrystalline X-ray diffraction showed that the extent of the lattice expansion varied with the variation of calcinating temperature of time. It is suggested that this might be due to the variation of La content diffused into the TiO₂ lattice. The La in the lattice may inhibit the recombination of photogenerated electron-hole pairs and thus enhance the photoactivity.     

PHOTOCATALYTIC ACTIVITY OF LANTHANUM DOPING TiO_2

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＯｖｅｒｔｈｅｐａｓｔ 1 0ｙｅａｒｓ,ｔｈｅｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒＴｉＯ2 ａｓａｐｒｏｍｉｓｉｎｇｐｈｏｔｏｃａｔａｌｙｓｔｈａｓｂｅｃｏｍｅｔｈｅｆｏｃｕｓｏｆｎｕｍｅｒｏｕｓｓｔｕｄｉｅｓｏｗｉｎｇｔｏｉｔｓｓｔａｂｉｌｉｔｙｉｎｖａｒｉｏｕｓｓｏｌｖｅｎｔｓｕｎｄｅｒｐｈｏｔｏｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ ,ｓｕｉｔａｂｌｅｒｅｄｏｘｐｏｔｅｎｔｉａｌａｎｄｍａｎｙｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌａｐｐｌｉｃａ ｔｉｏｎｓ,ｓｕｃｈａｓｓｏｌａｒｅｎｅｒｇｙｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ…     

葡萄酒控温发酵实验研究

葡萄酒发酵过程放热量大,会使发酵介质的温度升高而影响酒的质量,因而控温发酵是酿造高品质葡萄酒的一项重要技术措施。为此,对红葡萄酒发酵过程的发热特性进行了实验研究。首先在无温控状况下进行自然发酵,研究发热量的变化关系,确定发酵过程中变化的内热源项。随后进行控温发酵实验,得到控温条件下的发酵介质温度变化曲线,并分析了控温范围等因素对发酵过程传热的影响。     

Prediction and analysis model of temperature and its application to a natural ventilation multi-span plastic greenhouse equipped with insect-proof screen

INTRODUCTION The use of plastic greenhouses is rapidly ex-panding in China with multi-span greenhouses being the most common type. For all these greenhouses, ventilation performance is a major factor in produc-tion, influencing both climatic control and yield quality over much of the year. Natural ventilation uses very little external energy as compared with forced ventilation, but it increases the complexity ofgreenhouse structures and makes climate control more difficult. Natural venti…