5-羟甲基胞嘧啶生物学功能研究进展

最近的研究发现,DNA胞嘧啶5号位上能发生羟甲基化修饰形成5-羟甲基胞嘧啶,这种修饰对于基因的表达和调控有着重要的影响,本文对这方面的研究进展作一介绍.     

口服补液盐泡腾片中5-羟甲基糠醛含量检测

本研究采用高效液相色谱法,测定口服补液盐泡腾片中有关物质5-羟甲基糠醛含量,以乙腈-水(1:20,V/V)为流动相,使用Luna C18柱为色谱柱,检测波长为284 nm,采用本法检测5-羟甲基糠醛精密度、稳定性良好,平均回收率为98.396%(n=3)、RSD为0.77%,最低检测限为1.5ng/m L。5-羟甲基糠醛含量测定方法操作简便、结果准确可靠,可用于口服补液盐泡腾片的质量控制。     

5-羟甲基胞嘧啶pKa值的理论研究

采用两种不同动力学循环方案,在B3LYP/6-311++G(d,p)+ZPE和B3LYP/aug-ccp VTZ//B3LYP/6-311++G(d,p)+ZPE水平上,同时考虑PCM和CPCM模型对5-羟甲基胞嘧啶(5-HMe Cyt)中N3、N4、O2不同位点质子化的p Ka值进行计算研究.结果表明:采用经验值法,5-HMe Cyt中N3位置质子化的p Ka值最大;采用质子交换法,以N3质子化的胞嘧啶为参考酸,发现CPCM模型计算结果对计算方法的依赖性较大.     

美科学家绘制出小鼠大脑中5-羟甲基胞嘧啶随基因组变化的分布图

据2011年11月1日《科技日报》援引美国物理学家组织网2011年10月31日(北京时间)报道,最近,美国埃默里大学医学院和芝加哥大学研究人员合作,绘制出了小鼠大脑中5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)的图谱,揭示了该碱基在小鼠从发育到老化的生命过程中随基因组变化而变化的分布方式。图谱表明,5-羟甲基胞嘧啶不只是一种中间状态的分子结构,其在干细胞和脑细胞中还有着特殊的平衡功能,     

抑癌基因WWOX在结直肠癌中的表达

检测WWOXmRNA及其编码蛋白在结直肠癌中的表达,分析其临床病理学意义。用半定量RT-PCR方法定量和免疫组化染色(EliVision plus法)分析45例结直肠癌、45例结直肠腺瘤及20例正常组织中WWOXmRNA及其编码的蛋白质表达量,并比较两者在不同组织中的表达差异。半定量RT-PCR和免疫组化结果显示,45例结直肠癌组织中WWOXmRNA表达水平低于结直肠腺瘤组及正常结直肠组,差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明,WWOX的低表达与结直肠癌的发展、生物学行为和预后有相关性。     

RhoC和MMP-9蛋白在结直肠癌中的表达及意义

探讨RhoC和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白在结直肠癌发生发展中的作用。选取新鲜结直肠癌标本作为实验组,正常新鲜结肠粘膜组织作为对照组,应用流式细胞术分别检测RhoC和MMP-9的表达,检测其在不同临床病理特征之间的关系。结果表明,RhoC和MMP-9在结直肠癌组织中高表达(P<0.05),且其表达均与Dukes分期、浸润深度及炎细胞浸润相关(P<0.05),MMP-9的表达与结直肠癌的淋巴结转移密切相关(P<0.05),RhoC和MMP-9在结直肠癌中的表达呈正相关(r=0.3430,P=0.0420)。流式细胞术联合检测RhoC和MMP-9蛋白的表达有望成为判断预后的重要指标。     

HER-2高表达与结直肠癌生存期关系的meta分析(英文)

研究目的:探讨人类表皮生长因子受体2(HER-2)的高表达与结直肠癌患者术后生存期的关系。创新要点:采用meta分析的方法,精确地探讨HER-2高表达与结直肠癌患者生存期的关系,解决不同研究产生不同结论的矛盾。研究方法:系统收集近20年来所有与HER-2表达和结直肠癌生存期关系相关文献,提取数据并计算与癌症或总体生存时间对应的危险比及其95%可信区间。重要结论:HER-2高表达可能与结直肠癌患者术后生存时间无关(见图2)。     

SMN2基因甲基化与中国儿童型脊肌萎缩症疾病严重程度的相关分析（英文）

目的:分析我国脊肌萎缩症(SMA)患儿SMN2基因甲基化水平与其转录水平,并初步探讨该基因的甲基化修饰是否影响我国儿童型SMA疾病的严重程度。创新点:首次在中国儿童型SMA人群中分析SMN2基因甲基化状态,提示该基因的甲基化模式在不同人种间具有一定保守性,而甲基化单元的甲基化状态可能具有种族差异。本研究也初步提示SMN2基因甲基化水平除了可能影响该基因的转录,还可能影响基因的可变剪接。方法:应用MassA RRAY的方法检测35例SMA患儿(SMN1基因纯合缺失,SMN2基因3拷贝)外周血细胞中SMN2基因甲基化状态;应用实时聚合酶链反应(real-time PCR)的方法检测SMN2基因不同转录本的表达水平;分析SMN2基因甲基化与该基因的转录以及SMA疾病严重程度的关系。结论:位于甲基化岛1的两个甲基化单元(nt-871和nt-735)和位于甲基化岛4的nt+999甲基化单元的甲基化水平在III型患儿中显著低于II型和I型患儿;nt-871和nt-290/-288/-285甲基化单元的甲基化水平与SMN2基因全长转录本(SMN2-fl)的转录水平呈负相关。此外,nt+938甲基化单元的甲基化水平与SMN2基因全长转录本与跳跃外显子7转录本的比值(fl/?7)呈负相关,但与SMN2的转录水平无关。因此,我们初步得出SMN2基因甲基化可能通过调控其转录而影响我国儿童型SMA的疾病表型。     

一种黄酮磺酸盐的合成与表征

以5-甲基-7-甲氧基异黄酮为先导化合物在浓硫酸中进行磺化,得到其磺化产物:5-甲基-7-甲氧基异黄酮-4’-磺酸钠,极大的改善了水溶性。采用1H NMR、13C NMR和元素分析对磺化产物的结构进行了表征,并对磺化条件进行了优化。确定了其磺化反应的最佳实验条件是:5-甲基-7-甲氧基异黄酮与浓硫酸比值(g/mL)为1:6,反应时间为10h,反应温度为100℃。     

HSP70和MGMT在乳腺肿瘤中的表达和意义

目的:探讨乳腺肿瘤组织中热休克蛋白HSP70和DNA修复酶O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methyguanine-DNA methytransferase,MGMT)的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学SABC法检测65例乳腺肿瘤组织中HSP70和MGMT的表达情况。结果:乳腺肿瘤中HSP70的阳性率为80.00%(52/65),MGMT的阳性率为60.00%(39/65),二者呈中度相关性(r=0.46)。其中,有淋巴结转移组的阳性率高于无转移组(P<0.05)。结论:HSP70和MGMT的表达率与淋巴结转移情况有关。检测HSP70与MGMT对乳腺肿瘤预后和化疗方案的选择有指导意义。     

p62/SQSTM1与自噬在胃癌组织中表达及临床意义

观察p62/SQSTM1 (简称p62)在胃癌组织中的表达水平,探讨p62与自噬的关系及临床意义。采用免疫组织化学检测胃癌石蜡标本中p62的表达情况,并分析p62与临床病理资料及预后的关系,同时检测胃癌和癌旁新鲜组织中p62 mRNA及蛋白的表达水平。结果,190例胃癌石蜡标本中p62阳性率高于癌旁正常组织(P <0. 05); p62的表达与浸润深度、淋巴结转移、临床分期有关(P <0. 05); p62阳性患者5年生存率为33. 2%,低于p62阴性患者的55. 3%(P <0. 05);在新鲜胃癌组织中,p62 mRNA和蛋白的表达水平显著高于相应癌旁正常组织。结果表明:p62促进胃癌的发生发展及转移,是评估胃癌术后患者预后的一个重要标志。     

一种新型吡啶盐染料的合成、晶体结构及光学性质

以1,3-丙磺酸内酯、4-甲基吡啶、N-甲基-N-羟乙基胺基苯甲醛为原料,合成一种新型有机染料反式4-[4′-(N-甲基-N-羟乙基胺基)苯乙烯基]-N-(3-丙磺酸)吡啶盐(1),并用红外光谱、元素分析和单晶X射线衍射进行表征.研究表明,该化合物属于单斜晶系,P2(1)/c空间群.晶胞参数:a=1.830 26(16)nm,b=1.196 78(9)nm,c=0.961 10(8)nm,β=96.066 0(10)°,Z=4,F(000)=920,最终R=0.07,w R=0.152 4.此外,还研究该化合物的光学性质.     

喉癌患者癌组织与癌旁正常组织之间蛋白磷酸酶2A及其相关分子标志物表达水平的比较研究（英文）

目的:探讨喉癌患者组织样本中蛋白磷酸酶2A及其相关蛋白在癌组织与癌旁组织之间的表达差异,建立可用于临床进行喉癌患者预后分层的多指标预测体系。创新点:以蛋白磷酸酶2A为核心,探讨系列肿瘤转移相关指标参与喉癌发生发展的分子机制。方法:收集2012～2015年间浙江大学医学院附属第二医院耳鼻咽喉科28例喉鳞状细胞癌患者的临床组织样本,提取总蛋白后进行免疫印迹分析。结论:与癌旁正常组织相比,喉癌组织中phosphoPP2A/C(Y307)、α4、CIP2A、Akt、ezrin、phosphoezrin(T567)、14-3-3以及FAK蛋白水平均显著升高,而phospho-Akt(T308)蛋白水平则显著降低。     

长白山区不同海拔森林湿地土壤碳氮磷生态化学计量学特征

以长白山区不同海拔森林湿地为研究对象，研究土壤有机碳、全氮和全磷含量及其生态化学计量比的空间分布特征与海拔和土壤盐度的关系.结果表明：土壤有机碳含量在550～815 m低海拔湿地含量较高，在847～1 280 m高海拔湿地含量较低，土壤全氮含量随海拔的升高呈逐渐下降的趋势，海拔550 m的湿地含量最高；土壤全磷含量呈波动变化，海拔1 280 m含量最高.各海拔湿地土壤有机碳、全氮含量以0～5 cm土层积累较多，且随土层深度的增加而递减.C/N比值随海拔升高呈先增加后降低的趋势，海拔815 m处比值最高.C/P、N/P比值随海拔升高呈先降低后升高再降低波动变化，C/P比值在815 m海拔处最高，N/P比值在550 m海拔处最高，各海拔有机碳、全氮、全磷含量及生态化学计量比空间变异均较大.相关性分析表明：海拔与土壤C、N、N/P具有极显著的相关关系，土壤盐度与C/P、N/P有极显著相关关系、与C、N、P有显著相关关系.说明，海拔和土壤盐度是影响长白山森林湿地土壤C、N、P含量，以及生态化学计量学特征的主要环境因子.     

靶向TRMT5抑制HIF-1α信号通路调控肝癌进程（英文）

越来越多研究表明转运RNA(t RNA)修饰与肿瘤进程有关。本研究首次探索了线粒体t RNA G37位甲基化修饰酶TRMT5(t RNA甲基转移酶5)在肝细胞癌发生发展中的作用。生物信息学和临床分析发现TRMT5在肝癌组织中高表达且与预后不良相关。体内外实验表明TRMT5敲低可诱导肝癌细胞代谢重编程,减弱肝癌细胞的增殖和转移能力。进一步研究发现TRMT5敲低降低了肝癌细胞内缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的稳定性,进而抑制肝癌细胞生长与转移。此外,TRMT5敲低还导致肝癌细胞对阿霉素的敏感性增加。综上所述,本研究表明靶向TRMT5可以抑制肝癌进程并提升肝癌细胞对化疗药物的敏感性。因此,TRMT5是一个新的致癌候选基因,可以作为肝癌治疗的潜在靶点。     

散发性乳腺癌细胞14-3-3σ异常甲基化及其蛋白表达的关系

目的:探讨散发性乳腺癌癌变过程14-3-3σ基因启动子异常甲基化状况及其与转录表达的关系。方法:用甲基化特异PCR方法对散发性乳腺癌病人癌组织及正常组织进行14-3-3σ异常甲基化检测;用免疫组织化学测定14-3-3σ蛋白表达。结果:68例散发性乳腺癌组织中,14-3-3σ基因启动子异常甲基化率为90%(61/68),部分不典型增生病例检出异常甲基化18%(2/13),而正常组织未检出。14-3-3σ基因启动子异常甲基化与患者居住地、组织分型、分级和淋巴结转移相关(P&lt;0.05)而与年龄无相关性(P&gt;0.05),14-3-3σ基因甲基化与其蛋白表达下降呈良好的一致性(P&lt;0.05)。单变量分析发现,淋巴结转移与预后明显相关(风险指数为:5.0,P=0.02)。14-3-3σ基因甲基化与否并不影响乳腺癌的五年生存率(P&gt;0.05)。结论:14-3-3σ基因异常甲基化参与乳腺癌癌变过程,是其蛋白表达下降的重要原因之一,但不影响乳腺癌的生存率。     

P53、C-myc蛋白在睾丸肿瘤中的表达及意义

目的:探讨P53、C-myc蛋白在睾丸肿瘤中的表达及其临床价值.方法:应用免疫组化技术法检测47例睾丸肿瘤P53、C-myc蛋白阳性表达水平.结果:发现P53、C-myc蛋白表达阳性率分别为44.7%(21/47)和51.1%(24/47),其阳性率与肿瘤临床分期呈显著正相关(P<0.05),P53蛋白阳性表达与C-myc蛋白阳性表达呈高度正相关(P<0.05).结论:联合检测P53、C-myc蛋白有助于判断睾丸肿瘤的恶性程度及患者的预后.     

以Ag作为构筑单元的二维配位聚合物的合成与表征

配住聚合物[Ag(L)2ClO4]是以N,N-(2-吡啶)-(4-吡啶甲基)胺和AgClO4为原料,通过水(溶剂)热法合成.X单晶结构解析显示N,N-(2-吡啶)-(4-吡啶甲基)胺通过2-吡啶和4-吡啶甲基的N原子桥联Ag,形成菱形网格,配体N,N-(2-吡啶)-(4-吡啶甲基)胺的两个苯环互相垂直,并以Ag和分子间氢键为中心.化合物晶体数据单斜晶系,C2/c空间群,晶胞参数a=0.848 31(6)nm,b=1.725 4(1)nm,c=1.669 9(1)nm,β=99.677(6)°.V=2.559 4(1)nm3.     

新型超支化聚合物的合成与表征

以乙醇胺和丙烯酸甲酯为原料合成N-羟乙基-3-胺基-N,N-二丙酸甲酯单体,然后以此单体、丁二酸酐等为原料制备1~5代酯端基超支化聚(胺-酯);采用FT-IR表征了产物的结构.超支化聚(胺-酯)具有良好的溶解性和热稳定性,分解温度高于150°C;合成物粘度较低,且随着代数(聚合度)的增加有较小幅度增大.     

5-甲酰基胞嘧啶修复机理的理论探究

5-甲酰基胞嘧啶(5-formylcytosine,5-fC)是胞嘧啶的主要氧化损伤之一,其形成对基因的表达具有显著影响.本文采用量子化学密度泛函理论(DFT)对5-fC的修复机理进行了理论研究.所有反应物、中间体、产物和过渡态的构型均采用B3LYP/6-311++G(d,p)方法进行全优化.该修复机理分为六步:首先,咪唑提供质子使5-fC的N_3原子质子化,随后为巯基乙醇对C_6原子的亲核加成和水分子对C_5-甲酰基C=O的亲核加成,然后依次为C_5-脱甲酸,C_6-脱巯基乙醇和N_3-去质子化反应.计算结果表明:咪唑对5-fC上N_3原子的质子化破坏了嘧啶环上的共轭,增大了C_6原子的电荷密度,有利于随后巯基乙醇的亲核进攻;巯基乙醇的亲核加成为无能垒的自发放热过程,而脱巯基乙醇为吸热反应; C_5-脱甲酸反应为整个反应的决速步骤,活化能为47. 7 kcalmol~(-1).该研究从电子水平上解释了5-fC修复的本质,完善了DNA碱基氧化损伤的修复机理.