基因疗法：从第一代走向第二代

基因疗法是通过对病人异常的致病基因进行剪接,然后用正常的基因修补致病基因,达到治愈疾病的目的。如果仅从基因疗法的方法上来区分,可以把今天的试验性基因疗法分为第一代和第二代。第一代基因疗法是利用无害的病毒（一般是腺相关病毒）作为载体,把正常基因运载到异常基因部位,以取代或纠正异常基因。     

基因治疗中基因导入的病毒载体

DNA或 RNA瘤病毒能将其遗传物质转入宿主细胞而引起细胞转化 ,这种能力使有关研究者们想到以它们作为基因治疗的基因载体。虽然确定其安全性难度很大 ,但重组病毒法在实验室里行之有效。转基因效能较高 ,只要解决了其安全性问题 ,将在基因治疗中起到重要作用。本文概述了几种主要病毒载体及其特点。1　逆转录病毒载体逆转录病毒包括一大类基因组 ,长约 1 0 Kb的单链 RNA的有被病毒 ,病毒生活史中 ,其 RNA逆转录成双链 DNA整合到宿主细胞基因组内长期表达。病毒基因组有 gag,pol,env三个结构基因和长末端重复序列 ( LTR) ,包装信号 (…     

基因工程疫苗

基因工程疫苗是用基因工程方法或分子克隆技术。分离出病原的保护性抗原基因,将其转入原核或真核系统使表达出该病原的保护性抗原,制成疫苗,或者将病原的毒力相关基因删除掉,使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗。包括多肽或亚单位疫苗、颗粒载体疫苗、病毒活载体疫苗、细菌活载体疫苗、基因重配疫苗以及基因缺失疫苗如乙肝疫苗等。     

并购重组与民营经济绩效的实证研究——以江浙沪民营上市企业为例

本文以特定区域、特定类型企业为研究重点,通过构建理论模型探讨了民营企业并购重组前后的绩效。以2001-2007以来在沪深A股市场发生并购重组的125家江浙沪地区民营上市公司为样本,采用因子分析、Wilcox-on秩检验和多元线性回归分析研究民营企业重组前后绩效变化状况。实证结果表明:民营上市企业重组在重组当年绩效便显著下降,持续性明显不足;同时交易类型、交易双方关联性、第一大股东持股比例、股权制衡度等影响因素均与重组绩效直接相关。最后本文提出了通过并购重组改善江浙沪地区民营企业综合绩效的相关措施。     

基于信息构建理论的图书馆业务流程重组

本文以信息构建理论为指导,在比较分析的基础上,对图书馆的传统业务流程进行了重组,提出了一个以用户为中心的重组模型,并进行了相关分析.     

非病毒CRISPR-Cas9递送系统在疾病治疗中的应用

目的 分析、探讨CRISPR-Cas9体外和体内非病毒递送系统及其在疾病治疗中的应用。方法 选取非病毒CRISPR-Cas9递送系统为本次分析对象,对比分析非病毒载体相较于病毒载体的优缺点;探讨现有非病毒递送系统,主要包括：脂质纳米颗粒、聚合物纳米颗粒、金纳米粒子、细胞穿透肽、丙烷甜菜碱诱导转导离子、黑磷和外泌体等在疾病治疗中的应用。结果 通过对非病毒CRISPR-Cas9递送系统分析发现,基于非病毒载体介导的CRISPR RNP递送系统显示出了诸多优势,且具备低脱靶效应、低免疫原性以及较高安全性、递送效率、靶向性和稳定性等。结论 非病毒CRISPR-Cas9递送系统的持续优化将加速CRISPR-Cas9技术在遗传病、癌症等疾病治疗中的临床转化与应用。     

动物实验

正心脏再生新机制上海科技大学生命科学与技术学院助理教授张辉课题组和中国科学院上海生化细胞所研究员周斌课题组合作,发现新生小鼠心脏损伤后存在成纤维细胞衰老现象,并利用药物清除衰老细胞、基因敲除和腺相关病毒敲低基因等技术手段,证明了细胞衰老的发生机制以及细胞衰老有效促进了新生小鼠的心脏再生。研究论文发表于Circulation。成年哺乳动物心脏再生能力     

马传染性贫血病毒gp90蛋白的表达及其在诊断中的潜在应用

以质粒pVRCSV1.0-syn-gp90,利用PCR扩增马传染性贫血病毒外膜蛋白基因(gp90),构建了原核表达质粒pET-28a(+)-gp90,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导表达并纯化该重组蛋白,ELISA和Westem blot证明马的阳性血清可以识别该重组蛋白.以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,测定的效价为1:13,000.     

科技短波

正我国新冠病毒灭活疫苗进入临床试验国家卫生健康委副主任曾益新表示,目前,已有一项腺病毒载体重组新冠病毒疫苗和四项灭活疫苗项目相继获得国家药监局批准开展临床试验。如果一切顺利,以上项目将在今年7月陆续完成二期临床试验。截至5月13日,这五个疫苗项目已接种2575名志愿者。其中,一期临床试验累计完成539名志愿者的接种,有的已获得初步安全性和保护性抗体产生的数据;二期临床试验累计完成2036名志愿者的接种,正在逐步完成全部的第二或第三针的接种,并开展安全性、有效性监测和评价。     

高致病性禽流感:不见硝烟的阻击战

遥远的东北,伴随2005年初冬的第一场雪,高致病性禽流感的来势似乎比寒流更猛一些,以H5N1型病毒为主的禽间疫情高度活跃,抗原变异重组,对人群构成严重威胁,全球迄今已确诊150多例H5N1病例,死亡高达51%。病毒随候鸟迁徙,穿城越国地远程飞散似乎刚刚拉开序幕,一场严峻的病毒阻击战,虽不见硝烟,却异常艰难。     

从反应类型看二语心理词汇的重组

本研究通过对不同语言水平的英语学习者进行的词汇联想测试,探讨二语心理词汇的发展是否经历了重组以及重组的过程。统计结果表明,二语心理词汇的发展经历了一定的由语音聚类到语义相关的重组过程,以逐渐达到类似于母语者的语义网络。     

大鼠脑源性神经营养因子的体外表达

目的构建复制缺陷型含大鼠脑源性神经营养因子基因的逆转录病毒,进行体外包装并检测病毒的表达,探讨神经损伤修复中的新途径。方法用体外连接的方法将脑源性神经营养因子基因和逆转录病毒pLXSN的酶切产物连接成重组逆转录病毒。利用脂质体转染法将重组逆转录病毒导入PA317包装细胞系中获取高滴度的分泌脑源性神经营养因子的病毒,检测病毒滴度并观察BDNF在鼠成纤维细胞中的表达情况。结果经PCR、酶切鉴定,脑源性神经营养因子基因已导入PA317细胞,并可在鼠成纤维细胞中表达。结论制备了含脑源性神经营养因子的重组逆转录病毒,为进一步研究脑源性神经营养因子治疗神经损伤性疾病奠定基础。     

活病毒直接转化为预防、治疗双功能疫苗研究进展

疫苗是目前预防病毒感染最有效的方法之一。以流感疫苗为例,目前临床使用的流感疫苗种类包括减毒、灭活、亚单位、载体疫苗等。本研究团队以流感病毒为模型,成功研发了预防和治疗双功能的"复制缺陷型活病毒疫苗"制备技术。该方法彻底突破了现有的疫苗研制手段,利用基因密码子拓展技术,通过将病毒基因组中的一个或多个三联遗传密码子突变为终止密码子的方式,使病毒在宿主体内的正常繁殖复制的机制失效,同时又保留了病毒完整的结构和感染力,使其成为能够高效刺激机体产生免疫应答,甚至是具有治疗前景的抗病毒药物。     

致力于基因药物研发与产业化——中山大学黄文林教授

黄文林教授长期从事基因治疗和肿瘤新型药物研究,在病毒基因表达调控、病毒与宿主相互作用、新型载体及基因治疗药物转化研究等方面做出了引人注目的成绩。他发现了腺病毒基因表达调控和病毒与宿主相互作用的重要机制,获得了基因治疗优于蛋白质药物的系统实验证据,研制出了一种低免疫原性和3种肿瘤靶向性基因治疗载体,建立和规范了基因治疗药物临床前、临床研究标准,并进行了2种基因治疗药物的临床转化研究。黄文林教授的工作有效地促进了我国基因治疗药物的研发和产业化实施进程。     

利用ilasⅡ系统进行数据库重组和压缩重组

分析了ilasⅡ系统在应用中需要进行数据库重组和压缩重组的故障,并提出了进行数据库重组和压缩重组的方法及相关问题。     

新研究确认H7N9禽流感病毒源自家鸡

中外研究人员最新发现，H7N9病毒很可能是由不同的病毒在家鸡体内通过基因重组而生成，同时产生的“副产品”是此前未了解的H7N7病毒。香港大学研究人员与英美两国同行在21日的新一期《自然》杂志网络版上报告了这项发现。     

PHD类转录因子GmPHD2和Bar基因的植物表达载体的构建

利用高保真PCR酶从克隆载体pMD18T-GmPHD2中扩增出大豆PHD类转录因子GmPHD2,并于基因上下游分别引入XbaI和XhoI酶切位点;然后通过TA克隆、载体双酶切、连接、转化等技术手段,将其连入植物表达载体pBA002,构建了含GmPHD2和抗除草剂筛选标记Bar基因的植物表达载体pBA002-GmPHD2。重组质粒经PCR检测、双酶切及测序验证,表明GmPHD2基因已被完整、正确的插入到pBA002载体中,之后通过冻融法将重组质粒pBA002-GmPHD2成功导入农杆菌EHA105,利用此农杆菌不仅可以介导转化大豆,而且可以转化非同源的其他作物,为进一步开展植物抗逆性的基因工程研究提供了新基因资源。     

电子商务的发展与企业流程的重组

信息技术是企业流程重组的推动力,企业流程与企业的运行方式、组织的协调合作、人的组织管理、新技术的应用与融合等紧密相关,因而,企业流程的重组不仅仅涉及到技术,也涉及人文因素,包括观念的重组、流程的重组和组织的重组,以新型企业文化代替老的企业文化,以新的企业流程代替原有的企业流程,以扁平化的企业组织代替金字塔型的企业组织。     

腺病毒介导重组hKGF基因转染HaCat细胞及其表达

将PCR扩增到的人角质细胞生长因子（hKGF）基因片段插入穿梭载体pAdTrack-CMV,产生重组质粒pAdTrack-CMV-hKGF,经Pme 1线性化后,通过电转法导入含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183进行同源重组,得到重组腺病毒质粒pAdEasy-hKGF,     

社科文摘

流感流行的警戒级别目前,世界卫生组织将流感大流行预警分为6个级别。第一级,流感病毒在动物中传播,但没有人因此感染。第二级,已知的家畜或野生动物中流行的病毒传染了人类,存在潜在的大流行威胁。第三级,动物病毒或人类与动物的流感重组病毒在人群中造成零星病例或小规