反相高效液相色谱法在降血压肽分离与纯化中应用的研究

本文利用正交实验的方法,选取乙腈浓度、TFA浓度、洗脱速度三个因素,对高效液相色谱法分析降血压肽AHP的工艺条件进行了研究.色谱图显示,最佳分离条件为ACN浓度12%(v/v),TFA浓度0.03%(v/v),洗脱速度0.8 mL/min,保留时间为10.30 min;或ACN浓度12%(v/v),TFA浓度0.05%(v/v),洗脱速度1.0 mL/min,保留时间为11.41 min.高效液相色谱分析条件的优化,有利于AHP的检测和分析,从而帮助分离纯化研究的顺利进行.     

白芷叶总香豆素的大孔树脂纯化工艺

采用单因素与正交试验结合的方法对白芷叶总香豆素的大孔树脂纯化工艺进行研究,发现其优选工艺为:大孔树脂型号为D-101、上柱液的质量浓度为0.2 g/mL、上柱体积为3 BV,上柱液pH为4,上柱液流速为2 BV/h,洗脱用乙醇体积分数为90%,洗脱速度为2 BV/h,洗脱体积为6 BV.采用该纯化工艺,可使白芷叶总香豆素的纯度达到58.3%.     

制备型高速逆流色谱分离纯化水线草中的强极性化合物

首次采用制备型高速逆流色谱仪TBE-300对水线草药材中的强极性化合物进行分离纯化.实验过程中对溶剂和参数条件进行系统的优化,获得较好的分离条件.溶剂系统:正丁醇-乙酸乙酯-水(5:4:10,V/V),上相(有机相)为固定相,下相(水相)为流动相,正相洗脱;进样浓度:12mg/mL;进样体积:20mL;留速900r/min.进一步分离获得三种高纯度强极性类化合物,但结构尚待确定.     

金莲花总黄酮纯化研究

目的:利用正交试验,优选金莲花总黄酮的纯化方法.方法:以总黄酮含量为考查指标,选择大孔吸附树脂、乙醇浓度、上样量、洗脱速度和吸附时间五个实验因素,采用L16(45)正交实验表进行实验,筛选出总黄酮的最佳纯化工艺.结果:影响金莲花总黄酮含量的主要因素是乙醇浓度,其次是大孔吸附树脂的类型.按最佳方案纯化,总黄酮含量可达到69.1%.结论:最佳纯化方法为:采用大孔吸附树脂D-101,以50%乙醇洗脱,最佳上样量10mL,吸附时间20min,洗脱速度2.0 mL·min-1.     

L-脯氨酸在732阳离子交换树脂上的吸附性能研究

通过静态吸附和动态吸附与解吸附试验研究L-脯氨酸在732阳离子交换树脂的最佳吸附条件和影响因素,为L-脯氨酸在732阳离子交换树脂吸附分离提供科学的实验依据.结果表明,静态吸附最佳条件:25℃时,在L-脯氨酸溶液浓度为50μg/mL、体积为150mL、pH为6的条件下,静态吸附平衡时间为15min,吸附率为83.61%,无机盐的存在导致吸附率迅速下降.动态吸附与解吸附的最佳条件:25℃时,在L-脯氨酸上样液浓度25μg/mL、体积20mL、流速1mL/min、pH为6的条件下,吸附率为82.83%;氨水洗脱浓度1.5mol/L、体积50mL、流速3mL/min、pH为6的条件下,解吸率为92.22%.732阳离子交换树脂对L-脯氨酸具有良好的吸附性能.     

大孔吸附树脂分离重楼中偏诺类皂苷的研究

以偏诺类皂苷吸附量为考察指标，对12种树脂进行了筛选，并对选定的树脂进行了吸附与解吸优化条件研究．所选出的LSA-8型大孔吸附树脂，在实验条件下对偏诺类皂苷有很好的吸附分离性能，其吸附分离偏诺类皂苷的最佳条件为：重楼浸膏上样质量浓度66．67g／L，吸附流速5mL／min，洗脱剂为体积分数70％的乙醇，洗脱速度5mL／min．NaCl的加入对重楼中偏诺类皂苷的吸附有抑制作用．     

海带多糖的分离及其体外抗氧化活性的探究

采用大孔树脂法分离海带多糖,并对海带多糖的体外抗氧化进行初步评价。以HZ801、HZ816、HP20、HP100、D3520五种大孔树脂为试样,探究最适分离海带多糖的树脂型号。结果表明,大孔树脂D3520对海带多糖的分离效果最好,其最适吸附条件为流速2BV·h-1、pH 5,吸附率为71.14%;洗脱的最适条件为洗脱剂乙醇体积分数45%、流速2BV·h-1,洗脱率为86.27%。药效学以抗氧化消除·OH自由基的消除率为指标,VC为阳性对照,结果表明海带多糖对·OH的有较明显消除效果,当浓度为2.0mg/mL时,清除率为38.36%,说明海带多糖具有一定抗氧化活性。     

大孔树脂纯化银杏叶中总黄酮的工艺研究

目的：研究不同型号大孔树脂纯化银杏叶总黄酮的工艺条件及参数。方法以静态饱和吸附量、洗脱量、静态洗脱率考察指标,比较了5种大孔树脂,以总黄酮的含量为指标对树脂吸附工艺条件进行了筛选。结果所比较的8种大孔吸附树脂中,D101树脂具有最佳的吸附及洗脱参数,在上样液浓度为4.0 mg·mL-1条件下,上样体积为35mL,用70%的乙醇作为洗脱剂,洗脱流速为3 mL·min-1,得到总黄酮含量为56.89%。结论 D101树脂综合性能较好,可有效地用于银杏叶黄酮的分离富集。     

人参发酵产物中总皂苷的纯化研究

以人参总皂苷为评价指标,考察洗脱液体积、上样液质量浓度、上样液体积等因素,测定纯化过程的最佳参数。结果表明,最佳的提纯工艺是采用D101大孔树脂,湿法填装,药液的质量浓度0.8 g/mL,上样时所用的速度2 BV/h,静置1 h吸附药液,洗脱时先用蒸馏水将未吸附杂质洗去,再用5 BV的75%乙醇溶液洗去有效成分。最终确定的纯化工艺既简单又高效,可以适用于大生产。     

大孔吸附树脂分离纯化异黄芪甲苷的工艺

以异黄芪皂苷含量为指标,高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）为检测方法,系统研究了D101大孔吸附树脂分离纯化异黄芪甲苷的吸附性能和洗脱参数.当上样液浓度为1 g.mL-1,上样体积（mL）∶树脂量（g）为3∶1时,D101大孔吸附树脂可100%吸附异黄芪甲苷;流速为5.0BV/h,4BV体积的蒸馏水、30%乙醇、50%乙醇和70%乙醇梯度洗脱时,70%乙醇洗脱液中异黄芪皂苷洗脱率达93.14%.实验结果表明D101大孔吸附树脂对异黄芪甲苷有较好的吸附和解吸性能,适合于异黄芪皂苷的分离纯化,可为大规模制备异黄芪甲苷提供参考.     

阻抑甲基橙褪色催化动力学光度法测定痕量钴(Ⅱ)

在稀HNO4介质中,Co(Ⅱ)对高碘酸钾氧化甲基橙褪色反应具有阻抑作用,且阻抑反应的强弱与加入Co(Ⅱ)离子浓度成正比,由此建立了阻抑甲基橙褪色催化动力学光度法测定痕量Co(Ⅱ)的新光度分析方法。研究了最佳实验条件,吸光度为502nm处,阻抑反应吸光度(A)与非阻抑反应吸光度(A0)的差值△A与钴(Ⅱ)质量浓度在0.003-1.0μg/25 mL范围内有良好的线性关系,检出限为1.0981×10-10g/mL。测定了动力学参数,反应为准一级反应,表观活化能为63.24 kJ/mol,在80℃下反应的表观速率常数为6.70×10-4/s。该方法可用于药用VB12针剂中痕量Co(Ⅱ)测定,回收率在97~102%之间,符合痕量分析要求。     

离子色谱法测定黑炭标志物苯多羧酸的含量

基于苯多羧酸的阴离子特性,建立了离子色谱电导检测器测定黑炭标志物——苯多羧酸含量的方法。采用IonPac AS11-HC阴离子色谱柱(4×250 mm),以KOH为淋洗液进行梯度洗脱,进样量为25μL、流速1.0 mL/min的条件下,测定热解碳经硝酸氧化后的产物中苯多羧酸的含量。结果表明6种苯多羧酸质量浓度在0.1～40.0 mg/L内线性良好,r~2≥0.997 9,检测限在0.016 50～0.069 08 mg/L之间,加标回收率在75.2%～101.0%,方法准确可靠。     

镧、钐、钬、铒与铁的D301萃取色谱法分离研究

D301树脂作为固定相,萃取色谱法探讨了稀土元素——镧、钐、钬、铒和铁的分离条件.静态法研究了pH值、稀土浓度等因素对D301树脂吸附稀土的影响,动态法研究了不同的淋洗液对解吸稀土的影响.结果表明,pH为4.04、稀土浓度为2×10-3mol/L时,其吸附效果最好;采用0.25 mol/L HCl作为淋洗液时,镧、钐、钬、铒的始漏体积均大于80 ml,而铁的始漏体积为50 ml,淋洗液体积在70 ml时铁的回收率为97.7%;据此实现了铁和4种稀土的分离,稀土的回收率为99.2%.     

离子交换树脂层析纯化菜籽卵磷脂的工艺研究

探讨以菜籽水化脱磷油脚为原料,通过离子交换树脂层析纯化菜籽磷脂酰胆碱(PC)的工艺过程,对工艺条件进行优化。首先通过丙酮、石油醚等溶剂萃取工艺,制备出菜籽粉末磷脂,然后利用离子交换树脂纯化PC。确定高效液相检测方法为PC的定量、定性分析方法,对柱层析工艺进行优化。结果表明,柱层析的最佳工艺条件为：单位树脂上样量0.08 g·mL^-1;流速3.0 mL·min^-1;上样浓度0.1 g·mL^-1;高径比10∶1;前300 mL用95%乙醇洗脱,后150 mL用含异丙醇40%的异丙醇/水溶液洗脱。经HPLC-ELSD定量分析,产品纯度和回收率分别为72.3%和72.6%。     

紫薯花青素提取工艺的研究

采用盐酸-乙醇混合液为溶剂,研究了紫薯中花青素的提取工艺。经单因素实验和L9(34)正交实验(提取剂的酸醇比、料液比、提取温度、提取时间),得到最佳提取工艺参数为:浓度为1.0mol/L的HCl和体积分数95%的乙醇的混合液为溶剂,酸醇比为7∶3,提取料液比为1∶15,提取温度为60℃,提取时间为60 min。依此工艺,紫薯花青素的提取最佳得率为51.38mg/100g鲜重。     

高效液相色谱法快速测定饮料中苯甲酸的方法研究

采用反相高效液相色谱法(HPLC)测定了饮料中的苯甲酸含量,建立了快速测定苯甲酸的方法.色谱条件为:流动相体系为甲醇与乙酸铵溶液(0.02mol/L),体积比为5:95,流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为230 n m,柱温为25℃,进样体积为10μL.采用外标法定量,在5～100μg/ml范围内,回归方程相关系数为0.99999,检出限为0.38μg/mL.饮料中苯甲酸的加标回收率在97.80%～102.41%.按上述色谱条件平行测定样品5次,峰面积相对标准偏差(RSD)为0.1357%.说明方法的精密度高,重现性良好.     

甲基吡啶的解离萃取分离实验研究

应用解离萃取分离合成吡啶产生的3-甲基吡啶(3-MPD)与4-甲基吡啶(4-MPD)的混合物(φ(3-MPD)＝68.472 2%;φ(4-MPD)＝26.517 6%),对影响解离萃取分离的6个因素萃取剂、萃取剂的浓度及投料量、有机溶剂及投料量,以及分离温度进行了研究.选取了各因素的不同水平进行了六因素五水平的正交试验,以有机相两甲基吡啶的体积比为主要考查对象,筛选出了解离萃取分离甲基吡啶混合物的最佳工艺条件:当甲基吡啶的混合物为24 mL时,以浓度为2 mol/L的对甲基苯磺酸为萃取剂,用量为40 mL,正庚烷为溶剂,用量为48 mL,温度为0 ℃时分离效果最好.通过重复性实验,分离效果得到明显提高,说明此法具有工业化潜力.     

HPLC-ELSD法测定壳寡糖酸降解液中氨基葡萄糖含量探索

目的:探索并建立一种简便、有效、准确测定壳寡糖酸降解液中氨基葡萄糖盐酸盐含量的方法.方法:采用Shodex NH2P-50 4E色谱柱(4.6×250 mm,5 μ m),以乙腈:水(梯度洗脱)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为35℃;使用蒸发光散射检测器,载气流速为1.5L/min,漂移管温度为60℃;进样...     

HPLC-DAD法测定复方氨酚烷胺片中的咖啡因

建立了高效液相色谱（HPLC）测定复方氨酚烷胺片中咖啡因的方法。在流动相为甲醇-水（体积比为70：30）、检测波长为270 nm、流速为1.0mL/min、柱温为30℃、进样量为20μL的色谱条件下对药品中的咖啡因含量进行测定。实验测得咖啡因浓度在12~240μg/mL范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999）,加标回收率为100.61%,相对标准偏差RSD小于1%。用该方法测定复方氨酚烷胺片中的咖啡因,操作简单、快速、准确,结果令人满意。     

GC测定风油精中薄荷脑含量的实验教学设计

设计用GC测定风油精中薄荷脑含量的药物分析实验.用乙酸乙酯为溶剂提取样品,HP25毛细管柱(530μm X 30 m,1μm)及氢火焰离子化检测器;载气为高纯氮,栽气流速2 mL/min,进样口和检测器温度均为250 ℃.标准曲线方程为A=0.008C-0.0286(R2=0.9999,n=5),在0.375～6g/L线性关系良好.高(6g/L)、中(1.5g/L)、低(0.375g/L)3个浓度的日内、日间变异均＜3%;3个浓度的加样回收率依次为99.10%、104.52%、97.30%;最低检测浓度为0.25g/L.筛选出了合适的处理样品的溶剂和最佳的GC分离条件,考查了方法的精密度和回收率,最终确定了稳定的实验条件.