斜纹夜蛾核型多角体病毒日本株pif-2基因的克隆及原核表达

为研究斜纹夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera litura muhicapsid nucleopolyhedrovirus．SpltMNPV）侵染规律,根据SphMNPV中国株（G2）ORF135基因序列设计引物,经PCR扩增,从SpltMNPV日本株（B）基因组中克隆了pif-2基因。核苷酸序列分析表明,该基因是甜菜夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus,SeMNPV）pif-2的同源物,读码框含1278bp,编码425个氨基酸的蛋白质,推定分子量为48．6kD。与其他杆状病毒的同源物比对显示．SpltMNPV-JP-B PIF-2蛋白中14个Cys残基高度保守。联配分析表明,SphMNPV-JP-B pif-2的核苷酸序列与其他13种核型多角体病毒的同源性有较大差异。将pif-2克隆至原核表达载体pET32a（＋）,经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中获得了融合表达,SDS-PAGE分析表明在约69kD处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。     

真菌碱性丝氨酸蛋白酶及其制备方法和应用

(专利申请号:03117932)该发明涉及一种真菌碱性丝氨酸蛋白酶及其制备方法和应用,属生物技术领域。该真菌碱性丝氨酸蛋白酶来源于微生物粉红粘帚霉(G liocladium roseum)G R8;粉红粘帚霉G R7菌株通过液体发酵后提取纯化碱性丝氨酸蛋白酶。该酶能降解线虫体壁的蛋白质,具有杀线虫活性,可以用于植物寄生线虫生物防治领域。也可作为洗涤剂和去污剂生产的添加用酶,应用于洗涤剂和去污剂的生产上。该产品具有酶活力高,对线虫固定效果好,酶学性质特征优越等优点。真菌碱性丝氨酸蛋白酶及其制备方法和应用$云南省知识产权局…     

西准噶尔克拉玛依OIB型枕状玄武岩地球化学及其地质意义研究

克拉玛依西山的枕状玄武岩与浊积岩-凝灰岩共生，厚度大于400米的枕状玄武岩层被火山角砾岩-安山岩-硅质岩．凝灰岩覆盖。岩枕之间充填着硅质泥岩。锆石SHRIMP定年结果表明，枕状玄武岩可能在早寒武世形成（〉517Ma，这套地层曾经一直被认为属于石炭系）。枕状玄武岩的稀土元素含量（117．4×10^-6～153．6×10^-6）和配分模式与洋岛玄武岩（OIB）基本一致。枕状玄武岩中大离子亲石元素（Cs、Rb、Ba、K、Pb和Sr）的含量变化较大（明显偏离OIB），高场强元素（Nb、Ta、Zr、Hf、Ti和P）相对OIB和原始地幔没有表现出明显异常[e．g．，（Nb／Ta）PM=0．92-O．98，（Zr／Hf）PM=1．08-1．18]。西准噶尔地区存在这套OIB型海相火山．沉积建造说明古亚洲洋在西准噶尔地区于寒武纪就已经存在。这套海相玄武岩岩枕中存在大量古元古代一新太古代（1883—2536Ma）岩浆锆石的事实说明，早古生代洋岛玄武岩岩浆源区存在古老大陆地壳物质。     

细胞酶研究将导致更好的心脏病和中风治疗

加拿大女王大学的研究揭示了人体内一种细胞酶对心脏病发作和中风之后组织损坏的影响。这一发现将有助于开发新的药物疗法,帮助心脏病发作和中风后恢复,同时可减少阿尔茨海默氏症和其他神经变性疾病的影响。在细胞生长和运动所需的重塑蛋白中．人体细胞使用钙蛋白酶（Calpain）来帮助其与其他蛋白质分离。钙离子浓度的异常增高可激活钙蛋白酶。而在心脏病发作和中风时．细胞的血液供应中断．当再度供血时．大量涌入的血液使得细胞内钙离子达到危险的浓度．使钙蛋白酶活性增强．结果给组织造成了很大伤害。     

印度河脚本确实是文字

尽管在过去存在着争议,但现在研究人员说,印度河地区人的古代脚本（目前尚未破译）确实应该归属为一种人类的语言。它在结构上与DNA序列、电脑程序语言或其他的符号系统不同。在一篇文章中．Rajesh Rao及其同事介绍了他们是如何对该印度河书写文本与其他的语言学（如苏美尔文字、古泰米尔语、黎俱吠陀梵文、英文等）,非语言学（如人类的DNA序列和细菌的蛋白质序列）及人造系统（如Fortran电脑语言）进行了符号序列统计结构方面的比较的。     

医药科学

人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2N端片段的原核表达;急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的脑电图分析;基于压力波的人体脉搏波传播速度无创检测研究;院前紧急气管插管与机械通气24例临床分析;胰腺十二指肠同源框1基因在大鼠骨髓间充质干细胞向胰岛素分泌细胞定向分化过程中的作用;     

单子叶植物高级分类阶元系统演化：matK、rbcL和18SrDNA序列的证据

基于两个叶绿体基因（matK和rbcL）和一个核糖体基因（18S rDNA）的序列分析．对代表了基部被子植物和单子叶植物主要谱系分支的86科126属151种被子植物（单子叶植物58科86属101种）进行了系统演化关系分析．研究结果表明由胡椒目Piperales,樟目Laurales、木兰目Magnoliales和林仙且Caneliales构成的真木兰类复合群是单子叶植物的姐妹群,单子叶植物的单系性在3个序列联合分析中得到98％的强烈自展支持,     

次指数随机变量和的渐近估计

研究部分和Sn=∑k=1^nxk以及随机和SN（t）=∑k=1^N（t）xk的渐近估计,其中{XK,K≥1}为独立同分布（i．i．d）的非负随机变量序列,其共同的分布函数F属于次指数分布类,并且假设非负整值过程（N（t））t≥0与{XK,K≥1}相互独立。     

银河系可能“由内而外”形成

由剑桥大学天文研究所和西班牙巴塞罗那太空科学研究所等组成的一个国际研究团队,从欧洲空间局（ESO）“盖亚”（Gala）项目的数据中,找到了预测银河系圆盘（即聚集巨大气体云和数十亿颗恒星所形成的“飞碟”状）中恒星的化学构成类别的证据,可为洞察银河系演变提供新的见解。该项研究成果已提交给《天文学与天体物理学》期刊．现发表在1月19日天文数据库Astro—ph网络版上。     

新城疫病毒LaSota疫苗株全基因克隆和序列分析

本文通过RT—PCR的方法对家禽所的新城疫病毒LaSota疫苗株的全长进行分段克隆。通过测序获得全长序列,该病毒全长为15186bp,将全长序列提交到NCBIGenBank中获得序列登录号为JF950510,将其与之前已提交到NCBIGenBank中的LaSota株全长序列（登录号为AF077761）比较,核苷酸序列有135处变异,各个蛋白的氨基酸序列总共有61处变异。全基因克隆和序列分析为下一步研究LaSota株提供一个良好的方法．     

SP在牙周炎中的作用机制

在发生牙周炎时,成龈纤维细胞中的SP（Substance Powder,P物质）呈现高浓度状态。SP引发神经源性感染,增加免疫和炎症应答,抑制成龈纤维细胞的有丝分裂能力和成骨细胞的分化。以上作用,SP是通过调控MMP（matrix metalloproteinases,基质金属蛋白酶）和TIMP（tissue inhibitors of metalloproteinases,金属蛋白酶类组织抑制剂）的表达来完成。     

果蝇基于价值抉择的脑机制研究又获新进展

基于价值的抉择是一种生存能力。上海生科院神经科学研究所郭爱克院士领导的学习与记忆研究组6年前曾发现果蝇具有“趋利避害”的抉择能力。6年来，他们从基因-脑-行为．认知的结合上，将研究聚焦在果蝇抉择的神经环路机制上。采用增强子陷阱和上游激活序列（GAL4／UAS）的二元表达系统的基因操作，在特定的时间阻断果蝇脑的蘑菇体结构和多巴胺神经元的突触递质释放，     

星系研究250年(上)

1750年，英国天文学家赖特（T．Wright）提出，全天的恒星和银河共同构成一个巨大的“磨盘”状的天体系统，它的直径比它的厚度大得多。1755年，德国著名哲学家康德（I．Kant）指出，人们所见的恒星都在以银河为基本平面的两边集中，只有少数恒星远离这个平面，所有这些恒星共同构成了一个巨大的天体系统（现称银河系），在这之外还有无数个类似这样的天体系统。康德还认为，看去呈“云雾状”的星云很可能正是像后者这样的天体系统（现称河外星系或星系）。     

甘草提取物对人毛乳头细胞增殖和分泌血管内皮生长因子的影响

目的：观察甘草提取物对体外培养的人毛乳头细胞增殖和分泌血管内皮生长因子（VEGF）的影响．方法：采用不同浓度的甘草提取物作用于体外培养的人毛乳头细胞72h．用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞增殖活性：ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF蛋白含量．反转录（RT）-PCR半定量检测细胞中VEGFmRNA表达．结果：与对照组相比．甘草提取物对毛乳头细胞增殖无明显影响;加药组浓度为2．5．5．0、10．0、15．0μg／mL时．甘草提取物促进细胞分泌VEGF．增加细胞内VEGFmNA表达,差异有统计学意义．结论：甘草提取物对毛乳头细胞增殖无明显影响．但能显著促进毛乳头细胞分泌VEGF,甘草提取物可能是通过增加毛乳头细胞分泌VEGF来促进毛发生长的。     

新城疫病毒Mukteswar疫苗株全基因组序列分析

通过PCI％的方法对一市售的新城疫Muktesw＆r疫苗株的全长进行分段克隆,通过测序获得全长序列,该病毒全长为15186bp,将全长序列提交到NCBIGenBank中获得序列登录号为JF950509．将其与之前已提交到NOBI GenBank中的Mukteswar株全长序列（登录号为EF201805）比较,核苷酸序列有59处变异,各个蛋白的氨基酸序列总共有16处变异。序列的测定为进一步对Mukteswar抹的研究提供一个良好的平台。     

贵州桐梓天花粉rDNA ITS序列分析

目的：对贵州桐梓天花粉rDNA ITS序列（包括ITS1、5．8S和ITS2）进行序列测定与分析,为其基源鉴定和品质评价提供分子依据。方法：采取改良CTAB法提取天花粉总DNA,PCR扩增ITS序列后直接测序,在GeneBank将测序结果进行同源搜索,再将同源序列用MEGA5．1软件进行变异位点分析、遗传距离测定及同属植物ITS序列系统发育树的构建。结果：贵州桐梓天花粉ITS序列与GeneBank三组同源序列存在变异位,点107个、遗传距离范围在0．0252到0．0597之间、物种间亲缘存在较明显的远近关系。结论：ITS序列可以有效地鉴别贵州桐梓天花粉,ITS序列分析技术对近缘种类群间系统学研究及品种鉴定具有较大的意义,同时为进一步利用分子生物学技术鉴定中药材奠定了基础。     

鸡白细胞介素18全长基因的克隆、表达及分子进化分析

根据鸡白细胞介素18（IL-18）cDNA基因序列设计了1对特异性引物,应用RT-PCR技术,从脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激的我国地方品种萧山鸡原代鸡脾细胞中扩增并克隆鸡IL-18全长基因（Genbank accession,AY628648）。扩增片段全长591bp,共编码197个氨基酸的前体蛋白,其中含有表达完整功能蛋白所必需的起始密码子和终止密码子。该序列与国外报道的鸡IL-18全长基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性为98．99％。只在引导序列中出现两个氨基酸残基的缺失,分子进化分析表明萧山鸡IL-18基因与火鸡以及家鸭基因形成一个独立的分支。将萧山鸡IL-18成熟蛋白序列插入pGEX-4T-2载体并在Ecoli中得到表达,获得45kD的GST-IL-18融合蛋白。经纯化后用于制备多克隆抗体。本研究对萧山鸡白细胞介素18的全长基因进行了克隆及表达,并对其分子进化进行了分析。为深入研究其功能奠定了基础。     

大蹼铃蟾皮肤白蛋白的胰蛋白酶抑制活性研究

通过离子交换层析和凝胶过滤层析,在大蹼铃蟾(Bombina maxima)皮肤中得到其白蛋白。该蛋白有强烈抑制胰蛋白酶水解小肽底物的活性,但对其它丝氨酸蛋白酶如凝血酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶及枯草杆菌蛋白酶无抑制。它以1∶1摩尔比同胰蛋白酶形成稳定结合的复合物。经测定发现,该蛋白对温度、pH值及还原剂二硫苏糖醇的耐受性较强,三种因素对其胰蛋白酶抑制活性影响不大。说明大蹼铃蟾皮肤白蛋白具有稳定的胰蛋白酶抑制活性,可能在大蹼铃蟾防御天敌捕食的过程中发挥重要作用。     

三种百合线状病毒的外壳蛋白抗血清制备

设计3对表达引物分别扩增侵染了百合无症病毒（lily symptomless virus,LSV）．百合斑驳病毒（lily mottle virus,LMoV）和百合X病毒（lily virus X,LVX）的外壳蛋白基因,并在大肠杆菌BL21（DE3）plysS中原核表达。目的蛋白切胶后免疫小鼠制备多克隆抗体。Western blot检测表明3种病毒抗血清分别与目的蛋白起特异性反应．但与阴性对照无反应。3种病毒间无交叉血清学反应。对田间栽种的百合样品间接ELISA检测表明．LMoV和LSV均有发生,但没有检测到LVX。     

时间序列预测的状态空间方法

时间序列预测的状态空间方法张世英，王艳晖，杨尊琦（天津大学３０００７２）Ｐ，ＣＹｏｕｎｇ和Ｎ，Ｃ，Ｎｇ开发的状态空间预测方法［１］实现了模型参数估计的递推计算，并完全摆脱了Ｂｏｘ一Ｊｅｎｋｉｎｓ时间序列建模的困难，具有很大优点。在Ｐ．Ｃ．Ｙｏｕｎｇ等...