蛋白激酶Cα-EGFP及其突变体真核表达载体的构建和在C2C12细胞中的表达

目的研究PKCα结构与转位的关系.方法用PCR的方法构建了4个PKCα突变体,在DNA连接酶的作用下与pEGFP-N1结合后转移至质粒中,构建PKCα突变体-EGFP真核表达载体.观察它们在C2C12细胞中的表达及转位情况.结果pPKCα-EGFP-N1转染C2C12肌细胞24h后,细胞内表达的PKCα-GFP融合蛋白主要定位于细胞浆,细胞核中未见分布.pPKCα-βI-EGFP-N1、pPKCβI-α-EGFP转染C2C12细胞24h的表达产物集中在胞浆.pPKCα(-)-EGFP-N1、pPKCα(m)-EGFP-N1转染C2C12细胞24h的定位与野生型明显不同.结论PKCα的调节区(C1V1C2)尤其是RACK结合区(C2)、PKCα的催化区(C3V4C4)尤其是ATP结合位点与PKCα的转位密切相关.     

优化的TTF-1核心启动子驱动miRNA-7表达有效抑制人非小细胞肺癌细胞的生长（英文）

靶向基因治疗是一种很有前景的肺癌治疗方法。在前期工作中,我们报道了由甲状腺转录因子-1(TTF-1)启动子调控微小RNA-7(miR-7)的靶向表达可在体外和体内抑制人肺癌细胞的生长,但干预效率有待进一步提高。在本研究中,我们通过5’缺失分析鉴定了TTF-1的核心启动子(从-1299 bp到-871 bp),并筛选出潜在的结合转录因子核因子-1(NF-1)和激活蛋白-1(AP-1)。进一步分析的结果表明：NF-1的表达水平,而非AP-1的表达水平,与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中TTF-1核心启动子的活性呈正相关。此外,NF-1的沉默可以降低由TTF-1核心启动子调控的miR-7的表达。重要的是,我们在TTF-1核心启动子的序列上优化了四个不同的序列(称为^optTTF-1启动子)以形成额外的NF-1结合位点(TGGCA),并通过电泳迁移率实验(EMSA)分析验证了NF-1对^optTTF-1启动子的结合效率。通进一步研究,结果显示^optTTF-1启动子可更有效地驱动miR-7表达并在体外抑制人NSCLC细胞的生长,同时...     

冠心病患者树突状细胞功能状态分析

通过分离CHD患者及健康体检者外周血单个核细胞(PBMC),在含粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素4(IL-4)的培养条件下制备树突状细胞(DC),并应用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子CD86(B7-2)的表达、混合淋巴细胞反应(MLR),检测DC对同种异体淋巴细胞的刺激能力,分析评价冠心病(CHD)患者DC的功能状态,结果表明,CHD患者DC处于激活状态,此可能是CHD发病机制之一.     

PCNA在恶性肿瘤中的研究进展

增殖细胞核抗原 (Proliferatingcellnuclearanti gen ,PCNA)是在细胞周期S期广泛表达的一种核蛋白 ,是一种仅在增殖细胞中合成和表达的 36KD多肽 ,PCNA阳性表达说明该细胞正处于增殖状态。因此 ,PCNA作为一项评估细胞增殖状态的指标不仅用于病理学研究 ,而且近年来在肿瘤研究中的应用日渐增多。本文就PCNA的概况及在恶性肿瘤中的研究进展综述如下。1　PCNA的概况PCNA又称周期蛋白 (cyclin) ,是一种核内蛋白质 ,由 2 6 1个氨基酸组成 ,是DNA聚合酶δ的辅助蛋白 ,参与调节DNA的合成 ,与细胞的增殖周期密切相关。人类的PCNA基…     

CBR1基因启动子在猪子宫内膜细胞的功能研究（英文）

目的:研究CBR1基因启动子在猪子宫内膜细胞的表达调控机制。创新点:发现CBR1基因启动子在猪子宫内膜受到炎性因子核转录因子kappa B(NF-κB)成员p65调控。p65对该启动子具有正向调节作用,但是对于CBR1基因的表达并不是必需的。方法:通过双荧光素酶报告基因载体确定CBR1基因启动子转录活性区,通过染色质免疫沉淀(Ch IP)技术确定p65能够结合CBR1基因启动子,通过超表达和干扰表达实验证实p65对CBR1基因启动子的调控作用。结论:猪CBR1基因启动子-1640/-647区对于其转录活性是必需的,在-1545/-1531区存在p65的结合位点。p65在猪子宫内膜细胞中促进了CBR1基因mRNA的表达,但是干扰p65则不会造成CBR1基因mRNA表达量下降,推断p65不是CBR1基因表达的必需因素。     

稻瘟病菌MoYpt7互作蛋白和点突变的研究（英文）

目的:研究MoYpt7与MoGdi1的互作关系以及定点突变体MoYpt7N125I的生物学功能。创新点:补充了MoYpt7在稻瘟病菌致病过程中的生物学功能。方法:采用双分子荧光互补和免疫共沉淀的方法检测MoYpt7与MoGdi1的相互作用。利用点突变的方法,分析MoYpt7的鸟嘌呤二核苷酸磷酸(GDP)结合形式的生物学功能。结论:MoYpt7与Rab-GDP解离抑制因子的一个同源物MoGdi1相互作用,获得了MoYpt7的GDP结合形式的过表达突变体。该突变体菌落形态发生变化,产孢能力和致病性显著下降。同时,稻瘟病菌MoYpt7_(N125I)的亚细胞定位发生变化。     

117号元素再次合成成功

俄罗斯杜布纳联合核研究所科学家再次成功合成117号元素。据悉,该研究小组使用粒子回旋加速器,用由20个质子和28个中子组成的钙-48原子轰击含有97个质子和152个中子的锫-249原子,生成了6个拥有117个质子的新原子,其中的5个原子有176个中子,另一个原子有177个中子。2010年该研究所就首次成功合成了117号元素。然而国际理论与应用化学联合会(IU-PAC)要求杜布纳联合核研究所再次合成该元素,     

水稻泛素缀合酶基因OsUbc13的分子特征和蛋白互作研究(英文)

研究目的:通过研究水稻泛素缀合酶基因OsUbc13的序列特征、表达模式、亚细胞定位模式及其互作分子,为深入研究该基因的生物学功能和分子作用机理奠定基础。创新要点:首次对植物Ubc13进行了亚细胞定位研究及蛋白互作研究。研究方法:通过序列比对及聚类分析进行OsUbc13的序列特征研究;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)进行OsUbc13的表达模式分析;通过聚乙二醇(PEG)介导转化烟草BY-2原生质体进行OsUbc13亚细胞定位研究(见图4);通过酵母双杂交进行OsUbc13的蛋白质互作分析(见图5和表1)。重要结论:OsUbc13编码具有153个氨基酸的蛋白质,其推断的氨基酸序列与其它同源序列具有很高的相似性;该基因在水稻各组织中均有表达,其中内稃、雌蕊、雄蕊和叶片中的表达量较高,而根、茎和外稃中的表达量较低;低温、甲基磺酸甲酯(MMS)和过氧化氢(H2O2)胁迫处理使胚性愈伤中OsUbc13的表达量显著上调,甘露醇、脱落酸(ABA)和氯化钠(NaCl)胁迫则使愈伤组织中该基因的表达量降低;OsUbc13与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白表达于质膜和核膜处;酵母双杂交结果表明约有20个蛋白可能与OsUbc13存在相互作用,其中OsVDAC(与细胞凋亡有关)、OsMADS1(与花器官发育有关)、OsB22EL8(与活性氧清除及DNA保护有关)和OsCROC-1(为Lys63聚合泛素链形成及运行无误性DNA损伤耐受机制所必需)四个蛋白经验证确与OsUbc13互作。     

立足核心素养,凸显学科本质——2023年高考山东卷第21题分析

<正>1原题呈现当植物吸收的光能过多时,过剩的光能会对光反应阶段的PSⅡ复合体(PSⅡ)造成损伤,使PSⅡ活性降低,进而导致光合作用强度减弱。细胞可通过非光化学淬灭(NPQ)将过剩的光能耗散,减少多余光能对PSⅡ的损伤。已知拟南芥的H蛋白有两个功能:(1)修复损伤的PSⅡ;(2)参与NPQ的调节。科研人员以拟南芥的野生型和H基因缺失突变体为材料进行了相关实验,结果如图1所示。实验中强光照射时对野生型和突变体光照的强度相同,且强光对二者的PSⅡ均造成了损伤。     

新城疫病毒通过抑制树突状细胞白介素12的表达抑制抗原递呈（英文）

新城疫病毒作为一种极具潜力的疫苗载体,已被应用于多种疫苗的开发,但目前对于该病毒在抗原提呈中免疫调节作用的研究较少。为阐明新城疫病毒感染的树突状细胞与T淋巴细胞相互作用时的关键抑制因子,本研究将新城疫病毒疫苗LaSota株作为抑制剂对树突状细胞进行预处理,并用细菌脂多糖刺激树突状细胞的活化,通过采用酶联免疫吸附法（ELISA）、流式细胞术、免疫印迹和荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测相关指标的变化。结果表明,新城疫病毒感染通过p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）依赖的方式抑制树突状细胞中白介素12p40(IL-12p40)亚基的表达,从而抑制IL-12的活性单位IL-12p70的合成,致使树突状细胞诱导的T细胞增殖和γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和6型白介素（IL-6）分泌下降。同时,细胞因子的下调促进了新城疫病毒从树突状细胞向T淋巴细胞的传播。此外,不同毒力型的新城疫病毒均表现出抑制活性。综上所述,新城疫病毒可以调节多种免疫细胞互作的强度,从而促进病毒的增殖与传播。因此,本研究揭示了一种新城疫病毒的新型免疫抑制机制,同时也为新城疫病毒载体疫苗的改进提供...     

核能

There was a time when the divisions were simple： nuclear energy was a danger to the world and opposition to nuclear energy was the choice of every environment-loving, green-thinking person.     

奥巴马政府的核政策与朝核问题

第二届首尔核安全峰会的召开,激起国际社会对朝核问题的关注。作为重要的国际核安全问题,朝鲜核问题在美国新的核安全政策中处于何种地位,奥巴马政府将如何处理朝核问题成为国际社会关注热点。本文旨在探讨朝核问题自身的特殊性,分析奥巴马政府核安全政策的本质与内在矛盾,进而揭示美国新的核安全政策仍旧很难解决其在朝核问题上面临的困境。     

2009年核物理与核能研究的几个进展

引子 物理学是探讨物质结构与运动规律的科学.原子核物理学作为20世纪物理学的新的分支,主要研究原子核的组成、结构、相互作用及其转化规律,通常简称为核物理.它是物理学中涉及四种相互作用、包括从少数几个到有限多个相互作用粒子、提供简单两体到复杂多体现象的量子力学研究的独特学科.研究原子核物理,不仅可以了解自然界中元素的起源,而且对宇宙演化也起着重要作用.     

核磁共振理论及应用综述

核磁共振是一种利用原子核在磁场中的能量变化来获得关于核的信息的现代技术,它已在许多领域得到广泛的应用．本文介绍了核磁共振的概念、原理和实验技术,并介绍了有关的一些应用．     

总而言之,核电站欢迎您

<正>听说有一群环保原教旨主义者又在谋划什么行动。什么!他们不是才秘密袭击了一座核能电厂并引起社会骚乱吗?对,那群恐怖分子才不会知道他们袭击的只是一座核聚变反应堆呢。是啊是啊!幸好我们从2013年就成功实施了第一例惯性约束聚变实验,至于托克马克则更久远了。嗯,虽然是秘密袭击,但安保系统第一时间就散布了基     

核军备控制理论中的无核区

无核区作为特定区域内国家核裁军、防止核扩散、建立互信措施的一种安全合作机制,也是一项具体的、操作性强的军备控制措施,或可以说是机制。根据军控理论,无核区属于军备控制的范畴,表现在核裁军与防止核扩散方面,即对核武器的“量”及“使用方式”的控削。     

放射性核素循环、核能开发与核安全

本文对放射性核素及其在生态系统中的循环进行了阐述，从核能开发和核对人体的安全等多个方面进行了探讨，提出了要理性地看待人类对核能的开发及核安全问题。     

朝鲜核问题之研究

朝鲜核问题是国际社会关注的问题之一,而几经周折达成的朝美核框架协议则是关系到朝鲜半岛局势的缓和,东北亚地区的稳定和美国与朝鲜关系改善的重要问题。本文就落实该协议所遇到的各种困难及前景进行了分析。并且指出和平解决朝鲜核问题对朝鲜半岛局势及区域合作将产生积极影响。