细胞癌细胞系的建立与生物学特性的关联研究

目的以原代培养的喉鳞状细胞癌组织细胞为例,观测细胞癌细胞系的生物学特性。方法通过组织块培养法,体外原代培养喉鳞状细胞癌组织细胞,细胞传代超过25次时,观察细胞的样态、细胞角蛋白的组织化学染色、检验细胞增值周期、培养法检验支原体、聚合酶链反应法(PCR法)鉴别细胞种类、STR-短串联重复序列基因分型。结果新建立一株喉鳞状细胞癌细胞系,定名为TR-LCC-1,其大多数形态为多边形细胞,铺路石样变异、叠层生长,除了形态区别于其他细胞外,其体积也比较大。细胞角蛋白的组织化学染色呈阳性。繁衍30代之后,细胞群体倍增时间提高到201.2小时。对细胞间期进行检验,发现DNA合成前期(G1期)占51.71%,DNA合成期(S期)占44.56%,DNA合成后期(G2期)占2.28%。培养法检验支原体,未发现污染。聚合酶链反应法(PCR法)鉴别TR-LCC-1种类属于人来源细胞。对STR-短串联重复序列进行检验,发现P26与P6一致,异于已知细胞的短串联重复序列。结论人来源喉鳞状细胞癌的细胞系TRLCC-1,可以作为样本以研究喉鳞状细胞癌的特性。     

细胞癌细胞系的建立与生物学特性的关联研究

目的以原代培养的喉鳞状细胞癌组织细胞为例,观测细胞癌细胞系的生物学特性。方法通过组织块培养法,体外原代培养喉鳞状细胞癌组织细胞,细胞传代超过25次时,观察细胞的样态、细胞角蛋白的组织化学染色、检验细胞增值周期、培养法检验支原体、聚合酶链反应法(PCR法)鉴别细胞种类、STR-短串联重复序列基因分型。结果新建立一株喉鳞状细胞癌细胞系,定名为TR-LCC-1,其大多数形态为多边形细胞,铺路石样变异、叠层生长,除了形态区别于其他细胞外,其体积也比较大。细胞角蛋白的组织化学染色呈阳性。繁衍30代之后,细胞群体倍增时间提高到201.2小时。对细胞间期进行检验,发现DNA合成前期(G1期)占51.71%,DNA合成期(S期)占44.56%,DNA合成后期(G2期)占2.28%。培养法检验支原体,未发现污染。聚合酶链反应法(PCR法)鉴别TR-LCC-1种类属于人来源细胞。对STR-短串联重复序列进行检验,发现P26与P6一致,异于已知细胞的短串联重复序列。结论人来源喉鳞状细胞癌的细胞系TRLCC-1,可以作为样本以研究喉鳞状细胞癌的特性。     

中美科学家成功分化生成星形胶质细胞

复旦大学上海医学院解剖与组织胚胎学系长江学者、著名干细胞专家张素春教授与美国威斯康星大学麦迪逊分校经长达5年多的合作研究,近期在一项干细胞研究中,首次成功地利用人类多能干细胞,分化生成了星形胶质细胞,该成果对脑组织、脑器官的再生、修复和脑部疾病治疗有重要应用价值。这项研究成果发表在国际著名学术期刊《自然·生物技术》杂志上。     

NK细胞在传染性疾病中免疫调控机制的研究——中科院微生物研究所研究员方敏博士成果展示

中科院微生物研究所研究员方敏博士长期从事病毒免疫学的研究,其主要研究领域为病毒感染后机体的免疫系统是如何作用来控制病毒的感染,以及基于免疫学方面的亚病毒疫苗的研究。近年来,方敏博士的研究主要集中在NK细胞领域,她研究揭示了NK细胞在抗痘病毒感染中的分子识别机制与免疫调控功能,并发现NK细胞功能随年龄的增长而下降从而导致小鼠丧失抵抗病毒感染的能力,这对于人们认识免疫衰老的机制有重要推动作用。     

细胞外钙离子对人成骨样细胞 MG-63分化的影响

研究不同浓度钙离子对人成骨样细胞MG-63分化的影响.结果表明, 5.0mmol/L Ca2+促进 CaSR、ALP、OC、Runx 2、IGF-1和BMP2 mRNA表达,而加入CaSR和ERK抑制剂后,则下调 ALP、OC、Runx 2、IGF-1和BMP2 mRNA表达.不同浓度Ca2+处理后,磷酸化-ERK(p-ERK)蛋白表达明显增加.因此,5.0mmol/L Ca2+通过上调CaSR基因的表达,激活ERK通路,促进MG-63成骨样细胞的分化.     

三维标准件库的建立及其在教学中的应用

以三维参数化设计软件Solid Edge为平台,在对软件系统各组成模块及其提供的各种二次开发工具熟悉和掌握的基础上,采用编程和三维造型相结合的方法,利用VB的ActiveX技术建立了标准件的三维参数化图形库并将其应用到机械教学中。     

细胞反应器技术及其在生物制药领域的应用

1962年生物反应器动物细胞培养的浪潮席卷全球,其可以作为生物工厂进行外源蛋白的大规模生产。目前,生物反应器技术在全世界范围内发展较为迅速,并在生物制药领域有了较好的应用前景。     

平台分化、交叉平台效应与平台竞争——以淘宝网的分化与竞争为例

我国B2C与C2C电子商务平台市场近年来发展迅猛.具有纵向差异的综合电子商务平台在潜在竞争压力下会趋于分化.双寡占模型中提供高质量产品的潜在进入者将较之提供低质量产品的在位者获取更高的市场份额与利润.低质量产品供应平台商倾向于选择平台分化.平台分化导致垄断模型中平台间竞争趋于内部化,从而削弱了不同子平台间均衡价格差异.具有纵向差异的子平台间存在交叉平台效应,该效应影响平台提供商的均衡价格与利润.在子平台后向兼容假设下,交叉平台效应将提高提供高质量产品的子平台的价格与利润,提高市场集中度.     

我国现阶段经济利益分化及其向经济利益和谐转化的对策研究

和谐社会并不是没有利益矛盾和冲突的社会,而是一个有能力解决利益矛盾和化解利益冲突,并由此实现经济利益和谐的社会。本文在分析我国现阶段经济利益分化现状的基础上,提出实现经济利益和谐的对策建议。     

应用RAPD技术研究阿尔卑斯山黄花茅居群内的遗传分化

应用RAPD技术,沿一个海拔梯度研究了阿尔卑斯山黄花茅自然居群的遗传变异和分化。实验 表明,虽然在亚居群间有很少的亚居群独有遗传标记的存在,但通过RAPD资料的聚类分析、主因子分  析以及相关分析观察到遗传分化沿海拔梯度发生,而且亚居群间的遗传分化和它们的海拔高度(地理距  离)呈有意义的正相关。研究结果暗示,在阿尔卑斯山的高山-亚高山过渡区,亚居群间的海拔高度差别  可能导致黄花茅开花和生长物候期的变化,而后者限制了亚居群间的基因流,从而引起居群内的遗传分化。     

高效液相色谱法检测细胞能量代谢物质的方法建立与应用

建立高效液相色谱法(HPLC)测定细胞中ATP、ADP和AMP含量的方法,以比较高糖培养的MRC-5细胞和D-半乳糖诱导的拟衰老MRC-5细胞能量代谢水平。体外培养的细胞经高氯酸裂解后,用反向HPLC法检测两组细胞ATP、ADP和AMP的含量。HPLC系统采用Ecosil C18反相柱(4.6*250mm 5μm pH 2～8),流动相为15mM磷酸二氢钾缓冲液和10%甲醇,流速0.5mL/min,紫外检测波长为254nm;检测温度为25℃,进样量20μL。以标准曲线法计算ATP、ADP和AMP含量,并计算腺苷酸能荷(EC)。结果显示拟衰老细胞的ATP含量及EC较对照组显著降低,而AMP含量明显升高,差异具有统计学意义(p<0.05),但两组之间的ADP含量没有明显差别。结果表明高效液相色谱法可检测出不同状态细胞能量物质的差异,其具有操作简便、快速、重现性好等特点,可以作为线粒体能量代谢功能的评估方法之一。     

全面认识转基因技术引起的分化、对立和冲突

2003年,瑞士苏黎世联邦理工学院社会科学系托马斯·伯纳尔教授出版了《基因、贸易和管制：食品生物技术冲突的根源》。在该书中,他以社会学家的使命感,从政治学、经济学和国际贸易的角度,对转基因技术在欧盟、美国和其他国家中的发展情况,     

器官发育与再生的细胞谱系建立机制

在第198期双清论坛上,专家围绕"器官发育与再生的细胞和分子基础"这一主题,从分子机制、技术方法应用、学科交叉等不同层面、角度探讨了器官发育与再生相关的细胞谱系的研究背景、主要进展、现阶段的主要瓶颈及新技术与新方法对推进细胞谱系研究的作用等重要内容。与会专家一致认为细胞谱系研究是器官发育与再生的研究核心,利用新技术和新方法推进细胞谱系研究对于器官发育与再生研究领域意义重大。论坛主要从以下6个方面凝练了器官发育与再生研究领域关键科学问题:(1)细胞谱系示踪和实时追踪新方法与新模型的建立;(2)器官发育的细胞谱系图谱绘制;(3)器官发育的细胞谱系建立机制;(4)器官发育异常的细胞谱系建立缺陷及病理机制;(5)器官再生的细胞谱系建立及其调控机制;(6)植物器官发育与再生中位置效应调控细胞谱系及机制。在现有的研究基础上,通过发挥国内多学科交叉的优势组织协同研究,并在新技术与新方法方面大力创新,必将进一步推进器官发育与再生研究领域的进展,为最终探明器官发育与再生的分子机理、预防和治疗临床相关疾病、造福人类社会提供坚实保障。     

浅谈企业标准化表格库的建立和应用

如何做好项目管理,提高企业管理绩效,已经成为许多企业的研究课题。本篇将重点阐述标准化工作表格库的建立和应用对提升企业管理水平的推进作用,介绍一种方法和工作理念,为各类工程公司和生产企业的精细化、标准化管理提供参考。     

TRAIL受体及其对细胞凋亡的调控

TRAIL(TNF related apoptosis inducing ligand)是新发现的肿瘤坏 死因子家族（TNF）成员，能够诱导多种肿瘤细胞凋亡，其中受体决定着TRAIL的生物学功能 ，在TRAIL诱导的细胞凋亡中发挥着重要作用，随着研究的不断深入，发现其受体的结构组 成与功能比原先所认识的更为复杂，并且在组成结构与功能上存在不一致性，提示TRAIL受 体对TRAIL功能的调节具有系统性，尚有许多待认识和研究的地方，本文仅对TRAIL受体的研 究新进展进行综述。     

鱼类干扰素系统基因的克隆鉴定及其特征分析

干扰素 (IFN)系统是脊椎动物抵抗病毒入侵的第一道防御系统 .除了哺乳类 ,有关低等脊椎动物的IFN系统基因知之甚少 .在鱼类 ,近 40年来能证明IFN系统存在的证据主要有两个 :一是检测经病毒诱导后的多种鱼类机体和细胞 ,证明能产生类似哺乳类IFN的抗病毒活性物质 ;二是近年来 ,已经证明在少数几种鱼类中存在与哺乳类IFN系统基因Mx同源的基因 .以前的研究结果表明 ,紫外线灭活的草鱼出血病病毒 (GCHV)能够诱导鲤科鱼类培养细胞 ,如鲫鱼囊胚细胞 (CAB)产生类IFN活性物质 ,并建立宿主细胞的抗病毒状态 .为了揭示鱼类培养细胞抗病毒免疫的分子机制 ,首先建立了一个研究鱼类抗病毒免疫相关基因的细胞模型系统 ,通过用灭活GCHV诱导CABIFN并进行理化、生物学特性鉴定的基础上 ,成功建立了一个囊括鱼类细胞抗病毒基因在内的差减cDNA文库 .其次 ,筛选文库揭示了一批与哺乳类IFN系统基因同源以及找不到同源性的EST ,表达分析证实它们也是IFN刺激基因 .再次 ,根据哺乳类IFN系统研究的最新进展 ,从该细胞模型系统中克隆、鉴定了 1 9个IFN系统基因的全长cDNA序列 ,包括鲫鱼IFN基因 ,IFN信号传导通路基因STAT1 ,IFN诱导表达调控基因IRF7,IFN行使抗病毒作用的效应基因Mx1、Mx2、PKR、Viperin、IFI5 6,以及一些功能未知的     

短柄五加种子结构、后熟作用及其细胞化学研究

短柄五加Eleutherococcus brachypus Harms种子为扁肾形,种皮由一层细胞构成。种子脱落时,胚 为心形胚期,胚周围的胚乳细胞解体形成液样囊腔,并包裹胚,胚细胞中存在较多蛋白质,胚乳细胞贮 存大量蛋白质颗粒和脂类,但两者均未见多糖颗粒。有萌发潜能的种子只占全部种子的9.27％。在试 验地种植条件下饱满种子经18～19个月后萌发,出苗率为1．67％,该过程细胞化学特点是胚细胞中蛋 白质含量逐渐减少,并逐渐积累少量多糖颗粒。种子经变温层积处理6个月即可完成后熟过程,其细胞 化学特点是胚细胞中蛋白质含量逐渐减少,但在心形胚后期即已积累大量多糖颗粒,并一直保持至胚 完全发育成熟。经比较短柄五加与刺五加的种子结构、后熟作用及其细胞化学特点,认为短柄五加种子质量差、自然状态下后熟时间长和出苗率低是短柄五加致濒的重要生殖因素,并提出了相应保护方法。     

人Dcp2基因克隆表达、多克隆抗体的制备及其应用

mRNA在细胞质内的稳定性是调控基因表达的重要方式。细胞以mRNA降解的方式对过时的、突变有害的mRNA进行及时清除以保证基因的正确表达和细胞正常的生命活动。其中脱帽酶Dcp1/Dcp2在mRNA降解中起到主要作用，但对其降解mRNA的详细作用机制了解甚少。到目前为止，尚没有该基因市售的抗体出现，阻碍了对该基因机理的研究。本文目的是利用PCR方法，从人的胎肝文库中克隆到Dcp2基因，制备其多克隆抗体血清。实验结果显示，通过溴化氰偶联柱子对该多克隆抗体血清经纯化得到的多克隆抗体，用于Western Blotting 试验，可以检测到该蛋白内源性的表达；用于激光共聚焦定位实验显示该内源性蛋白定位在细胞核内；此抗体同时可用于免疫沉淀实验。因此Dcp2基因和多克隆抗体的获得，为进一步研究该基因的功能创造了条件。     

燃料电池英语语料库的建库及其应用研究

在明确了语料库建库的目的、意义和原则的基础上,探讨了一种基于文本挖掘的建库方法.运用该方法建立燃料电池领域语料库,为专业领域语料库建设提供了理论指导和技术支持,并对领域语料库在构建领域本体方面的应用进行了探讨.     

昆虫抗性基因的克隆、鉴定及其在农药残留降解中的应用

几十年来,杀虫药剂主要是用来防治农业和卫生害虫,长期大量的使用使昆虫对这些杀虫药剂产生了抗药性,也即是在杀虫药剂的汰选之下昆虫体内已经产生了能够降解除杀虫药剂以外的多种化合物的解毒酶,克隆和应用这些降解酶用于清除环境中因防治害虫而残留的农药。