壳聚糖固定化As1.398中性蛋白酶稳定性的研究

研究了以中空球形壳聚糖固定As1 .398中性蛋白酶的方法 ,分析了戊二醛浓度、给酶量对固定化的影响 ,并对固定化酶的性质进行了讨论 ,实验结果显示 ,戊二醛质量浓度为 4 % ,每克载体给酶量 2 5mg时 ,酶活力回收为 65 .4% ,固定化酶的热稳定性、pH稳定性及乙醇的稳定性均高于游离酶     

壳聚糖微球制备及其固定化β-甘露聚糖酶研究

以脱乙酰度91%的壳聚糖为材料,采用两种不同的方法制备壳聚糖微球,利用扫描电子显微镜观察了壳聚糖微球形态与结构,筛选出具有较好形态及表面结构的壳聚糖微球固定化β-甘露聚糖酶,以酶活回收率为参考指标确定了固定化该酶的最佳条件。结果表明:当采用透平油为分散介质,壳聚糖浓度2.5%、戊二醛浓度为0.42%时,固定化酶的酶活回收率最高,达到63%。     

固定化扁桃酸消旋酶的制备及其性能

为克服游离扁桃酸消旋酶的稳定性差、不易回收等缺陷,以镍离子螯合的琼脂糖微球为载体,对扁桃酸消旋酶进行固定化实验.由SDS-PAGE电泳显示,镍离子螯合的琼脂糖微球能专一性地从粗酶液中吸附扁桃酸消旋酶.以偶联效率、蛋白结合率、相对活力和活力回收等为指标,考察给酶量的影响,结果显示：当给酶量为12 mg蛋白/g微球时,固定化效果最佳;固定化酶最佳的反应温度为30℃、pH为8.0、底物浓度为80 mM;与游离酶相比,固定化酶对温度和底物的耐受性均有提高;固定化酶操作稳定性好,在循环使用30批次后,残余酶活为首次固定化酶酶活的60%左右.     

固定化细胞产壳聚糖酶条件的研究

采用L9(34)正交试验法,探讨了海藻酸钠浓度、CaCl2浓度、壳聚糖含量和包埋菌量对固定化细胞产壳聚糖酶的影响.实验结果表明,海藻酸钠浓度是影响固定化细胞产壳聚糖酶的重要因素;最终确定的最佳组合为A1B3C3D3,即海藻酸钠浓度2%、CaCl2浓度4%、壳聚糖含量1.5%和包埋菌量6%.     

IMMOBILIZED ASPERGILLUS ORYZAE CELLS AND THEIR ACTIVITIES

采用戊二醛－明胶－乙二胺将氨基酰化酶交联固定在米曲霉细胞上，应用正交实验设计优选出相应的固定化条件，制备出具有较高反应活性和稳定性，适用于拆分ＤＬ－氨基酸的固定化细胞，并就ｐＨ、温度、离子浓度、底物浓度等因素对固定化细胞反应活性的影响进行了实验研究．分别在固定化细胞柱（ＩＣＣ）和新型固定化细胞－膜耦联反应器（ＣＩ－ＣＢＭＲ）中进行了连续光学拆分Ｎ－乙酰－ＤＬ－丙氨酸的实验研究，结果表明该固定化细胞具有良好的工业应用前景．     

褐色高温单孢菌PE-211纤维素酶的纯化及固定化研究

本研究望能为其在工业、农业、轻工业等方面的应用提供一定的理论依据。研究方法如下：利用摇瓶培养基进行培养,经硫酸铵盐析、2LSephadexG-100柱纯化,用壳聚糖进行固定化。结果是粗酶液被纯化,以戊二醛为交联剂制备固定化酶,得出结论：褐色高温单孢菌PE-211纤维素酶经硫酸铵盐析、2KSephadexG-100柱纯化,粗酶液被纯化47．5倍．比活力为54．15[U／rag,以戊二醛为交联剂制备固定化酶。酶动力学研究表明,固定化酶的最适pH为8．5,最适温度为70℃,且固定化酶在60℃～80℃活力较高;该酶的耐热性很强．而固定化酶的热稳定性比原酶强;以羧甲基纤维素钠为底物。固定化酶的Km为7．19mg／ml,Vmax为0．132mz／ml·min。     

壳聚糖固定化果胶酶的制备及其酶学性质研究

以1%壳聚糖与5%戊二醛交联8h制得交联壳聚糖载体,1g载体固定10mg的果胶酶,载体先与酶液缓慢振荡混合30min后,在固定化体系(pH3.4,4℃)中固定反应12h,该条件下制得的固定化酶强度大韧性好,酶活力回收率高达56.31%;固定化酶的最适温度50℃,最适pH3.4,Kmapp值为5.42mg·mL-1,连续使用7次后,酶活力还保留70.45%以上,具有较好的操作稳定性。     

大豆磷脂酶D的固定化及其催化功能

目的:单因素试验研究大豆磷脂酶D(phospholipase D,PLD)的固定化工艺以及固定化PLD催化合成大豆磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)的最佳工艺。方法:首先通过非极性溶剂辅助St9ber法制备纳米级介孔二氧化硅作为固定化酶的载体,通过吸附-沉淀-交联方式将PLD固定,单因素试验优化固定化条件,并对固定化后的PLD进行结构表征和热稳定性及贮存稳定性研究;然后利用固定化PLD以大豆卵磷脂和L-丝氨酸为底物催化合成PS,并通过单因素试验确定最佳合成工艺;最后对固定化PLD的循环使用性能进行研究。结果:非极性溶剂辅助St9ber法制备的介孔二氧化硅BET比表面积为948 m²/g,气孔体积为1.35 cm³/g,孔径为8.20 nm,平均粒径为335.10 nm,扫描电镜确定载体的形貌为近球形结构;当加入5.00 mL乙醇、1.00 mL酶液(温度为35℃、pH为6.50)、0.40 mL戊二醛时,固定化PLD的相对酶活达到最大值(88.39%±1.00%),蛋白固定化率为80.76%±1.30%;70℃时游离...     

海藻酸钠固定化菌株JY03及其降酚特性分析

以海藻酸钠作为包埋载体,对苯酚降解菌株JY03进行细胞固定化,并对降解条件进行了优化分析.通过单因素试验确定了合适的固定化条件为:海藻酸钠浓度2.5%,CaCl_2浓度3.0%,包埋菌体量0.3 g,钙化时间8 h.固定化细胞降解苯酚的最适条件为:温度32℃,pH值6.5,接种量30 g,对苯酚浓度800 mg/L降解36 h,其降解率达到88%以上.菌株JY03通过海藻酸钠固定化对苯酚的降解能力与耐受能力均大于游离细胞,这将为进一步采用固定化微生物方法处理含酚废水提供了试验依据.     

固定化木瓜蛋白酶的研究

近年来,国内外学者对固定化酶的载体和固定化方法进行了大量的研究,取得了一定的成果,有些成果已应用于工业生产。本实验直接利用包埋凝胶法,以海藻酸钠为载体,对木瓜蛋白酶的固定化条件,以及固定化酶的动力学性质进行了初步的研究。实验对载体的浓度、载体与酶的比例,以及固定化酶颗粒大小等诸方面对固定化酶的影响进行了比较。实验确定了固定化酶的最佳固定化条件。并对固定化酶的催化特性进行了初步的研究,测定了固定化酶的最适pH值,最适温度和米氏常数Km;同时还对固定化酶的热稳定性,固定化酶的酶活性等问题进行了研究。