猪干扰素基因的克隆与原核表达载体的构建

干扰素(Interferon)是一种广谱抗病毒剂,具有抗肿瘤、抗病毒和免疫调节等多种作用而被广泛应用于病毒性疾病的预防和治疗。本实验以猪肝脏组织为材料,提取猪肝脏组织DNA,根据Gen Bank收录的猪干扰素基因序列设计特异性引物,以猪肝脏DNA为模板进行高保真扩增得到IFN基因的ORF片段,然后进行了T载体克隆。再利用引入Eco RⅠ、SalⅠ酶切位点的特异性引物对IFN成熟肽段的基因进行亚克隆,经双酶切、连接、转化后,成功构建了p ET28a-ifn原核表达重组质粒,为干扰素基因的原核表达奠定了基础。     

甘蔗SPSⅢ基因启动子5’侧翼缺失的GUS表达载体构建

蔗糖磷酸合成酶是调节植物蔗糖合成的关键酶之一。本研究根据该段序列上预测的顺式作用元件将SPSⅢ5＇侧翼序列不同长度的片段与GUS基因融合,成功构建了3个缺失表达载体,为进一步的甘蔗SPSⅢ启动子活性区域鉴定提供基础。     

猪生长激素基因研究进展

生长激素基因是一个重要的功能基因。本文主要就猪生长激素基因的序列分析、多态性位点及各多态性位点同生产性能的关系进行了阐述。     

带植物内含子的GUS基因强表达载体的构建

从质粒pCAMBIA 1301上切下带植物内含子的GUS基因,置换质粒pMB 200上的fad2基因,用fad2基因的双增强启动子和终止子,通过酶切和PCR鉴定,得到了以NPT II基因为选择标记基因且串联有带内含子的GUS基因表达载体。     

含有Etp28基因昆虫杆状病毒表达载体的构建

以含有柔嫩艾美耳球虫（广东株）子孢子折光体抗原Etp28基因的重组质粒pGEM－T－Etp28为材料，分别构建了可表达GST／6×His－Etp28融合蛋白和Etp28非融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体质粒pAcGHLT－A－Etp28和pSXIVVI＋X3-Etp28，并探讨了两种重组转移载体质粒的特点和应用前景．     

L-ficolin突变体原核表达载体的构建及表达产物的鉴定

目的构建L-ficolin突变体的原核表达载体，为研究L-ficolin的糖结合位点奠定基础。方法设计L-ficolin突变体基因上、下游引物，分别引入EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点。以插入L—ficolin M2（Val144Phe）和M6（Glu 307Asp）点突变的完整编码区基因的质粒pCDNA3-L-ficolin为模板，通过PCR扩增获得突变体的基因片段，将其克隆入原核表达载体pGEX—KG．然后通过酶切和序列测定对其进行鉴定；将此表达载体转化入表达菌BL21（DE3）pLvSs诱导表达。并采用SDS—PAGE对表达产物进行鉴定。结果经酶切及序列分析表明．成功地构建了重组原核表达载体pGEX-KG—L—ficolin—M2、pGEX-KG-L-ficolin—M6，SDS—PAGE显示目的蛋白大量表达。结论L—ficolin突变体融合蛋白可以在大肠杆菌中大量表达。为研究L-ficolin的糖结合位点打下基础。     

植物基因工程研究进展 --目的基因的克隆与载体构建

20世纪80年代以来．基因工程技术在农业上的应用取得了斐然成果，植物基因工程已成为农业绿色革命的最重要技术手段，为此对植物基因工程中目的基固的克隆，载体构建的研究进展作了综合评述．     

通过载体进行的植物基因转移技术

本文就植物基因工程中，通过土壤农杆菌、CaMV和脂质体介质的转基因技术作了较为详细的介绍。     

反义bcl-2逆转录病毒表达载体的构建

凋亡是一种不同于坏死且受基因控制的主动性细胞自我消亡过程,亦是许多抗癌药物作用的主要机理之一。Bcl-2是一种凋亡负控制的重要基因,其蛋白产物能抑制细胞的凋亡或程序性细胞死亡过程。我们构建了反义bcl-2逆转录病毒表达载体导入多发性骨髓瘤细胞株来调节Bcl-2基因表达,从而诱导细胞凋亡或增加细胞对凋亡诱导剂的敏感性,来探讨与多发些骨髓瘤的关系。     

植物表达双价抗虫载体pCAMBIA3300-bt-pta的构建

本研究将苏云金芽孢杆菌（bt）与半夏凝集素抗虫基因（pta）两类抗虫基因连接到具有高效性的植物表达载体pCAMBIA3300中,重组表达质粒分别经过ApaⅡ单酶切及xhoⅠ和KpnⅠ双酶切鉴定、分析后,实验结果表明含有双价抗虫基因pCAMBIA3300-bt-pta的植物重组表达质粒已构建成功。     

软盘BOOT区病毒的清除

通过对传染DOS引导区病毒检测的讨论,给出了清除引导区病毒的几种方法．     

ACE基因多态性与有氧耐力运动关系研究

目前普遍认为ACE(血管紧张素转换酶)的水平和心血管的形态、功能密切相关。ACE基因的多态性是人耐力素质优劣的决定性因素之一。为了解运动员血管紧张素转换酶(ACE)基因插入或缺失(I/D）多态性情况，探讨ACE基因多态性与有氧耐力可能的关系，用聚合酶链反应(PCR)技术检测20例运动员和20例健康对照者的ACE基因多态性。结果位于ACE基因16内含子的L／D多态性经PCR扩增后呈三种基因型：纯合子插入型(II）、纯合子缺失型(DD)和杂合子插入或缺失型(ID)。耐力运动员组Ⅱ基因型和Ⅰ等位基因频率显著高于健康对照组。结果表明ACE基因可能在运动员的有氧耐力中起重要作用。     

感染新疆甜瓜的南瓜花叶病毒的鉴定

从感染病毒病的新疆甜瓜中分离到一株属于豇豆花叶病毒科的球形病毒，该株病毒在人工接种条件下可经汁液传播侵染属于3科的9种草本植物，但仅在葫芦科植物上才引起较为严重的系统侵染症状；该病毒可经叶甲以非持久性方式传播，但经桃蚜则不能传播，且染病组织粗汁液和提纯病毒制备物在SDS双向免疫扩散试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)南瓜花叶病毒抗血清发生强烈的免疫反应；该病毒的病毒粒子为直径28～30nm的球形病毒粒子，以差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯了该病毒，纯化病毒的A260／A280为1．60；用提纯病毒制备了ELISA试验效价为1：10^11的兔子抗血清；该病毒可经染病甜瓜和西葫芦果实的种子分别以2．0％和2．6％的种子带毒率传播．该株病毒被证明应属于南瓜花叶病毒的一个株系，建议将此株病毒称为南瓜花叶病毒新疆株(Squash mosaic virus-Xingjiang，SqMV-XJ)抗血清；该病毒可经染病甜瓜和西葫芦果实的种子分别以2．0％和2．6％的种子带毒率传播，证明该株病毒被应属于南瓜花叶病毒的一个株系，建议将此株病毒称为南瓜花叶病毒新疆株(Squash mosaic virus-Xinjiang，SqMV-XJ)。     

略论校园文化基因的识别与分析

《基础教育课程改革纲要》指出,教师应是教育教学的研究者,那么教师就必须从知识的传授者、道德的师范者这一传统角色中挣脱出来,向学习型、研究型教师发展。眼下,新课程正改变着教科书一统课堂的局面,教师不再只是传授知识,教师个人的知识被激活,师生互动产生的新知识的比重大大增加。为此,在当前的高三语文教学中,应努力让全新的教育理念走入课堂,让大语文教学的观念牢牢地扎根于我们的教学实践。     

《基因工程》精品课程的建设与实践

基因工程是生物工程专业的主干课程,必须以培养学生创新精神和实践能力为核心,重点培养学生综合素质和能力。为此,我们构建了理论和实践教学体系,优化课程教学内容,加强实践教学环节,充分运用现代化多媒体教学手段,加强网络课程建设,改进教学方法等为内容的教学改革。既注重传授学生专业知识,更注重传授学会“学习”的方法,旨在提高基因工程课堂教学质量,从而满足生物工程专业和21世纪人才培养要求。     

古村落文化景观的基因表达与景观识别

采用“景观基因法”研究传统聚落景观的内在特质、外在表达及其传承特点，是对文化地理学关于“文化景观”理论的发展。各地古村落景观之所以千差万别、多姿多彩，其根本原因在于影响景现形成的文化基因的不同，尤其是传统的原始图腾、民间傩戏、宗教信仰以及地方文化等因素对景观基因的形成有重要影响。在掌握聚落景观要素的基本构成的基础上，建立区域聚落景观的识别系统，有助于区域景观建设和文化多样性保护。     

抑制转录后基因沉默的病毒蛋白及其抑制机制

植物中存在天然的转录后基因沉默机制来消除病毒对其的危害,而病毒也进化出不同的对策来逃避甚至消除这种抑制机制;目前研究发现黄瓜花叶病毒(CMV)的2b蛋白及马铃薯丫病毒(PVY)的HC蛋白等植物病毒蛋白能抑制植物转录后基因沉默,对它们相应的抑制机理已了解。研究转录后基因沉默抑制蛋白不仅有助于阐明RNA沉默的具体过程,也为未来的转录后基因沉默甚至RNAi的调控提供研究工具和思路。     

β3整合素酵母双杂交载体的构建及鉴定

根据Genebank，设计β3膜外区引物，通过RT—PCR方法扩增β3片段，然后克隆入RRS酵母双杂交载体——pYesM△playA中，构成猎物．限制性内切酶酶切鉴定表明载体构建正确，β3整合素测序正确．表明成功扩增出人β3整合素基因胞外区，构建获得郎β3-pYesM△playA酵母表达载体．用乙酸锂法，将重组子转染至酵母温度敏感株cdc25—2，检测其对RRS系统的激活作用．自激活试验为阴性表明郎整合素不能自激活cdc25—2在36℃生长，表明该载体可用于酵母双杂交检测β3整合素与汉坦病毒受体结合蛋白（VAP）间相互作用．为进一步研究β3整合素在病毒感染中的作用奠定了基础．     

个人U盘系统的构建与U盘病毒防治方法

随着USB接口的普及和闪存芯片价格的急剧下滑,U盘以其读写速度快、存储容量大、保存时间长、可重复擦写、耐高低温、不怕潮、不怕摔、体积小、便于携带等诸多特点,成为计算机用户对文件进行移动存储的首选设备.U盘作为一种输入输出设备,也难以避免病毒的入侵和潜伏.文中主要介绍如何利用便携式的U盘构建U盘系统以及U盘病毒的防治方法.     

对虾白斑综合症病毒囊膜蛋白Vp28基因的克隆、表达及蛋白纯化

以对虾白斑病毒DNA为模板扩增出Vp28基因,经限制性内切酶（SmaI,Not I）酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌,经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认,证实成功地构建了Vp28基因原核表达载体．转化菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示有与预期大小约52kD相吻合的融合蛋白带,18℃诱导24h后获得了可溶性表达的目的蛋白,采用Glutathione Sepharose 4B亲和层析对重组蛋白进行纯化,获得了纯度很高的目的蛋白．