人电损死后心肌中纤维连接蛋白表达的实验观察

[目的]研究人电击死后心肌组织中纤维连接蛋白(Fn)的表达,为电击死和电损伤的法医学鉴定提供一定依据。[方法]取2006年中山大学法医鉴定中心电击死亡案例15例作为实验组,重度颅脑损伤致死案例15例作为对照组。对实验组与对照组迸行常规HE染色和免疫组化染色进行观察。[结果]实验组心肌内出现纤维连接蛋白表达阳性,与对照组差别有意义(P<0.01)。[结论]心肌组织中纤维连接蛋白的强阳性表达对电击死的法医学鉴定有一定参考价值。     

针刺预处理对全脑缺血大鼠微血管损伤及脑水肿的保护作用

[目的]针刺预处理对全脑缺血大鼠微血管损伤及脑水肿的保护作用.[方法]采用四动脉阻断法制作大鼠全脑缺血模型,针刺预处理组:术前给予针刺,针刺7 d后给予全脑缺血10 min,干湿法测脑组织水含量,应用HE染色、TUNEL染色及透射电镜技术,观察大鼠脑缺血后,组织病理学及超微结构改变.[结果]与脑缺血组相比,针刺预处理组不引起明显的神经元损伤,全脑缺血10 m in后72 h,微血管损伤及脑水肿明显减轻,血管内皮细胞凋亡减少.[结论]针刺预处理能够通过减轻微血管损伤及脑水肿对脑缺血产生保护作用.     

苏木素碱性品红苦味酸染色对大鼠缺血再灌注心肌的观察

目的探讨苏木素碱性品红苦味酸（HBPF）染色对诊断缺血/再灌注心肌缺血缺氧程度的价值.方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支,心肌缺血15min,再灌1h制作缺血-再灌注模型.用HBPF染色观察心肌形态学改变,同时与苏木素伊红（HE）染色比较.结果HBPF染色在大鼠心肌缺血再灌注1h心肌明确显示心肌细胞红染呈灶状分布,而HE染色无改变.结论HBPF染色对心肌缺血再灌注损伤程度有诊断意义。     

配制苏木素染液时媒染剂用量的探讨

苏木素-伊红染色(HE)在组织学、病理学、细胞学及病理诊断、科研和教学中有着十分重要的意义。HE染色的好坏与细胞核着色有着十分密切的关系。目前多采用Harris(1900)氏法配制苏木素染液,该方法存在着媒染剂析出结晶多,染液表面有亮膜污染切片及氧化程度不易控制等缺点。针对上述缺点,我们对媒染剂铝明矾的用量进行了改进,经两年的实际应用,其染色效果与原配制方法相同,现介绍如下。1 材料与方法1.1 材料 苏木素为北京化学试剂公司进口     

超声靶向击碎微泡技术介导P-选择素靶向阳离子超声微泡改善人血管内皮生长因子165基因转染缺血心肌的实验性研究（英文）

目的:构建一种靶向阳离子微泡,探讨其提高超声靶向击碎微泡技术(TCUMGT)介导的体内基因转染效率及治疗效果。创新点:提出运用TCUMGT介导的基因转染技术,利用微泡的携基因和靶向定位释放双项功能来上调缺血区的人血管内皮生长因子165(hVEGF_(165))的表达水平,发挥其成血管作用,从而改变缺血心肌的存活性。方法:通过聚乙二醇40硬脂酸酯、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、pcDNA_(3.1)-hV EGF165和抗P-选择素单克隆抗体等制备P-选择素靶向阳离子微泡。微泡分成四组:(1)仅微泡(MB);(2)微泡+P-选择素(MB+P);(3)微泡+pcDNA_(3.1)-hVEGF_(165)质粒(MB+VEGFp);(4)微泡+P-选择素+pcDNA_(3.1)-hVEGF_(165)质粒(MB+P+VEGFp)。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示:TCUMGT成功转染hVEGF_(165)基因,并且通过P-选择素为靶点可以提高转染效率。另外与其他组相比,MB+P+VEGFp组的心肌血管密度增加和心功改善最为明显。结论:本研究表明,通过TCUMGT技术,靶向超声微泡可以有效识别缺血心肌,释放pcDNA_(3.1)-hVEGF_(165)重组质粒,提高心肌微环境,促进心肌功能的恢复。     

糖尿病并发视网膜病变患者血小板参数、CD62p及高敏C反应蛋白的表达及临床意义

目的:研究糖尿病视网膜病变患者血小板参数、CD62p及hs-CRP水平,探讨这些指标的意义.方法:流式细胞技术测定100名糖尿病患者CD62p,免疫比浊法测定hs-CRP,SysmexXE2100测定血小板参数,并与正常对照组比较.结果:T2DM组MPV、PDW明显增大,PLT计数降低,CD62p表达明显增强,高敏C反应蛋白水平增高(P＜0.05).PDR组MPV、PDW、CD62p、高敏C反应蛋白水平均高于NPDR(P＜0.05).结论:糖尿病患者在高糖作用下血管内皮的损伤而引起血小板过度活化加速血管病变、炎症反应.     

芪蚣抗纤方对免疫性肝纤维化大鼠肝组织病理形态的影响

目的:通过用芪蚣抗纤方(QF)对免疫损伤性肝纤维化大鼠治疗前后肝组织病理结构变化的观察,进一步阐明QF抗免疫性肝纤维化机理.方法:采用猪血清腹腔注射法持续8周诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,然后应用QF灌胃治疗四周,第十二周起,分批处死动物,取肝组织,常规制备石蜡切片和超薄切片,并对石蜡切片进行HE染色、胶原纤维特殊染色(Mallory)和免疫组织化学染色.光镜及透射电镜观察.结果: QF高低剂量治疗组较模型组肝细胞损伤都有不同程度好转,胶原纤维明显减少.结论:QF可能有保护和修复受损的肝细胞,抑制胶原纤维的形成,具有抗免疫损伤性肝纤维化作用.     

肥胖儿童OX-LDL及CD62P的研究

目的氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)被认为是动脉粥样硬化形成的重要病理因素[1,2],而血小板活化(CD62P)则是引起心脑血管梗塞的致病因素[3],本研究对单纯性肥胖儿童OX-LDL和CD62P测定来为预防心脑血管疾病提供资料.方法OX-LDL采集抗凝静脉血(有抗氧化剂),取血浆采用ELISA法测定;CD62PEDTA抗凝血,去血浆多聚甲醛固定15min,PBS洗涤后重悬取100ml细胞悬液加20ml荧光抗体标记15min,离心洗涤后加PBS悬液,用流式细胞仪测定.结果肥胖儿童同对照组儿童相比,OX-LDL和CD62P均有显著升高,P＜0.01,且与TG,TG一致,肥胖儿童中主要以TG高为主,LDL-C水平与对照组相比略有差异(P＜0.05).结论单纯性肥胖儿童血浆OX-LDL水平明显高于同龄组儿童,肥胖儿童CD62P也显著升高.     

复方金银花、茵陈五苓注射液对家兔内毒素性肾衰组织结构影响

目的:研究复方金银花和茵陈五苓两种注射液对内毒素所致家兔肾衰中肾脏组织结构的保护作用。方法:将重量2.5±0.25kg的健康雄性家兔32只,随机分为对照组、模型组、复方金银花组和茵陈五苓组,每组8只。模型组、复方金银花组、茵陈五苓组家兔一次性静脉注射大肠杆菌O111B4内毒素生理盐水,剂量为100ug/kg。两保护组家兔注射内毒素24h后静脉注射剂量为100ug/kg的中药注射液。模型组家兔静脉注射同容积的生理盐水。对照组家兔静脉注射与内毒素溶液和中药注射剂等体积的生理盐水。静脉注射内毒素及生理盐水后第7h处死。取肾组织标本,Bouns液固定,石蜡切片,HE染色,显微观察并摄影。结果:模型组肾脏肾小体血管球肿胀,有血栓形成,肾小囊壁层内皮细胞脱落,肾小囊腔变小,肾小管内皮细胞脱落。复方金银花组、茵陈五苓组肾脏的肾小体血管球略有肿胀,肾小囊的内皮细胞较完整,肾小囊腔较对照组稍变小。结论:复方金银花与茵陈五苓对家兔因内毒素所致肾衰中肾脏组织结构有确实的保护作用。     

何杰金氏病肿瘤细胞生物学特征研究

目的对何杰金氏病肿瘤细胞进行形态学观察和免疫表型研究.材料方法福尔马林固定,石蜡包理的何杰金氏病组织12例(NSHL6例,MCHL5例,LDHL1例)进行HE染色和CD30、CD15、CD20、CD45RO、Ki-67抗原免疫组化在肿瘤细胞和背景成分中的表达情况.结果(1)R-S细胞有各种变体形式.(2)各型HL具有不同的背景成分和组织学特征.(3)NSHL肿瘤细胞表达CD30(6/6)、CD15(1/6),不表达CD20(0/6).MCHL肿瘤细胞表达CD30(5/5)、CD15(0/5),LDHL肿瘤细胞表达CD30(1/1).CD30阳性率明显高于CD15(0.01＜P＜0.025).结论(1)NSHL中纤维组织增生形成结节,瘤细胞以陷窝细胞为主;MCHL中诊断型R-S细胞及其它变体细胞数量较多;LDHL以淋巴细胞减少为其特征.均以表达CD30为其特征.(2)在何杰金氏病鉴别判断中一定要应用免疫组化.CD30、CD45RO、Ki-67、CD20一般为一线抗体.     

不同组织中PAS染色的特点

PAS染色定位准确,但不同组织中,PAS着色不同,现介绍如下。收集肝组织、肾穿刺组织、含粘液成分组织及含霉菌成分组织各10例。石蜡切片2~4μm,常规脱蜡至水,0.5%高碘酸作用10 m in,无色品红封闭染色5~20 m in,0.5%偏重亚硫酸钠1~2 m in,Mayer苏木素复染20~40 s,1%盐酸酒精脱水片刻,温水返蓝,透明,封片。讨论:组织质地不同,切片厚度和染色时间亦不同。肝组织的糖原成分遇水易分解丢失,因此处理组织时忌过度冲洗,无色品红着色一般3~5 m in,Mayer苏木素复染15~20 s即可。肝脏的切片厚度一般在3μm为宜,组织太厚或太薄均不利于观察细胞内空泡状结构。肾穿刺组织切片一定要薄,厚度控制在2μm,无色品红的染色时间一般在15~20m in之间,Mayer苏木素复染则应在40 s左右。含粘液成分的组织和含霉菌成分的组织切片厚度一般在4μm以内,品红着色5~10 m in,Mayer苏木素复染25~30 s之间即可。(本文编辑:朱佩筠)不同组织中PAS染色的特点@王珏$郧阳医学院形态学实验室!湖北十堰442000$郧阳医学院附属太和医院病理科!湖北十堰442000 @王...     

优化葡萄膜色素性肿瘤标本脱色素及免疫组化处理方法的探索

结合1例色素浓重的脉络膜恶性黑色素瘤合并黑色素细胞瘤样本,对优化葡萄膜色素性肿瘤样本脱色素及免疫组化染色处理的方法进行探索。临床获得的脉络膜恶性黑色素瘤合并黑色素细胞瘤石蜡组织标本,分别使用不同浓度的高锰酸钾/草酸溶液进行脱色素处理,并进行Ki67免疫组化检测。结果表明:标本切片脱蜡后使用多聚甲醛或福尔马林后固定,再以质量分数为1%高锰酸钾/质量分数为2%草酸溶液进行脱色素处理能得到满意的HE(苏木素-伊红)染色结果;在脱色素之前进行抗原修复,继而经后固定后进行脱色素处理的组织切片,脱色素结果较好且保持了组织的抗原性。对于色素沉重牢固的葡萄膜色素性肿瘤,在脱色素处理前或者抗原修复后,增加后固定步骤,并使用较高浓度的高锰酸钾/草酸溶液,能得到较好的脱色素效果,且可保持组织的抗原性和切片的完整。     

MMP-9和CD15s与胃癌血管生成的相关性研究及其临床意义

目的:探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)和唾液酸化Lewis X(CD15s)抗原与胃癌侵袭转移的相关性。方法:采用CD105,MMP-9,CD15s进行免疫组化S-P法染色,对47例胃癌根治性切除手术标本病理组织切片进行标记,检测CD105的微血管密度(MVD),并对MVD与MMP-9、CD15s的关系进行统计分析。结果:MMP-9、CD15s表达都呈阳性的胃癌组织微血管密度高于MMP-9和CD15s单阳性及二者均阴性的胃癌组织。结论:MMP-9高表达有利于癌组织局部浸润,CD15s高表达有利于癌细胞血行转移,MMP-9及CD15s检测对临床诊治胃癌及判断预后具有一定意义。     

CD105的基本功能和临床应用

Endogl in(CD105)是一种细胞膜表面的糖蛋白,属于转化生长因子β超家族成员,是最近多数学者确定的一种最理想的人类内皮细胞增殖的指示剂.CD105被发现在血管生成组织的脉管内皮上过表达,已经提示出一些临床前的研究设计去进一步理解CD105在血管发生上的作用以及评价其最适当的临床应用:诊断、随诊、转移、预后以及作为治疗的靶目标.针对肿瘤(或其他疾病)相关的血管系统抗体作为靶目标的治疗是人类肿瘤中最有前景的治疗方法.     

鼻息肉上皮中血管活性肠肽和P物质表达的初步研究

目的:探讨人鼻息肉组织中SP和VIP的表达及意义.方法:采用HE染色、PAS染色和免疫组化方法检测人鼻息肉组织的病理变化及SP和VIP表达.结果:鼻息肉黏膜均有不同程度的改变,实验组与对照组相比基膜明显增厚(P＜0.01);A、C组差别显著(P＜0.05).实验组黏液腺面积与对照组相比差别显著(P＜0.01).SP和VIP免疫反应阳性结构均呈棕黄色,二者在实验组与对照组分布相似.SP阳性纤维分布于血管、腺体周围,可见散在的圆形或椭圆型阳性细胞,部分黏膜下腺体上皮细胞也呈SP阳性;但实验组阳性纤维和细胞明显稀疏.VIP阳性纤维和细胞位于黏膜腺体、血管周围以及部分黏膜上皮和黏膜下腺上皮细胞胞质中,但实验组中VIP阳性纤维着色较深,密度增加.结论:SP和VIP在鼻息肉形成中具有重要的作用.     

电热损伤法建立新西兰大白兔宫腔粘连模型（英文）

目的:目前宫腔粘连(Intrauterine adhesion,IUA)发病机制及治疗方法仍未明确和统一,建立一个稳定有效的宫腔粘连动物模型是开展相关研究的前提和基础。本文旨在利用电热损伤法构建兔IUA模型,观察和评估该方法的建模效果。创新点:首次提出利用电热损伤法建立兔宫腔粘连模型,并得出在损伤后7~14天内建立的兔IUA模型是有效的结论。方法:将21只成年雌性新西兰大白兔一侧子宫内膜用医用多功能高频电刀电灼损伤模拟宫腔粘连形成(A组,n=21),另一侧子宫不做处理作为自身对照(B组,n=21)。分别在损伤后7、14和28天收集兔双侧子宫组织,行苏木精-伊红染色法(HE)和Masson染色观察两侧子宫内膜病理改变,并对两侧子宫内膜的腺体个数和内膜纤维化面积比进行统计学分析和比较。另外,将损伤后7天的雌兔与成年雄兔合笼,14天后观察比较两侧子宫胚胎个数。结论:病理组织学观察显示,损伤后7和14天,A组子宫内膜腺体数量较B组减少,差异均有统计学意义(P0.05);而损伤后30天,A组子宫内膜腺体数量与B组相比差异无统计学意义。损伤后7天,A组内膜纤维化面积较B组增大,差异有统计学意义(P0.01);A组子宫胚胎个数较B组减少,差异有统计学意义(P0.01)。综上所述,采用电热损伤法建立的兔宫腔粘连模型在损伤后7~14天是稳定有效的。     

优生素对草杂鸡淋巴器官发育的影响

本试验研究了优生素对雏鸡淋巴器官发育的影响.试验选用100只1日龄草杂雏鸡,随机分为两组,即对照组和试验组,50只/组.基础日粮相同,优生素按照500g/t添加到基础日粮中.试验结束时,每组取10只鸡解剖采取胸腺、腔上囊、脾脏等样品置于Bouin固定液中,制作组织切片,HE染色,奥林巴斯显微镜观察拍照.结果表明,试验组鸡的胸腺小叶皮质增厚,胸腺小体增多;腔上囊皱襞发达,退化延缓;脾动脉周围淋巴鞘增厚,脾小结体积大.结论,优生素可促进胸腺和腔上囊的早期发育,延缓腔上囊的退化,增强脾的免疫应答反应.     

草鸡白血病部分内脏肿瘤的病理学观察

通过对疑似白血病草鸡部分内脏肿瘤宏观和微观的病理学观察,为该病的诊断和防控提供依据。采用宏观解剖学观察结合微观病理组织学观察的方法对来安县某鸡场一批200日龄疑似禽白血病的蛋种草鸡群进行初步诊断。宏观采用解剖直接观察法,微观采用病理学组织切片观察法,取病变部位组织,4%多聚甲醛固定,制作组织切片,HE染色,光镜下观察病变组织结构。宏观变化:肝脏,脾脏和肾脏显著肿大,为正常体积的2~3倍,表面可见大小不一的灰白色肿瘤结节,肿瘤结节与周围组织分界清楚;微观变化:空肠、肝脏等组织中有大量淋巴细胞散在或呈团块状增生,肿瘤细胞向外增生扩张呈膨胀性生长,挤压并破坏正常组织,严重的发展为坏死性肿瘤病灶。以上结果初步证实,该蛋鸡场存在禽白血病的感染。     

CD31、MMP2、MMP9、CathepsinD对小鼠黑色素移植瘤血管生成拟态中作用的研究

目的:利用小鼠移植瘤模型动态观察CD31、MMP2、MMP9、CathepsinD在恶性黑色素移植瘤血管生成拟态形成中的作用.方法:采用B16黑色素瘤细胞株制作小鼠恶性黑色素移植瘤动物模型,成瘤后根据随机数字表每天随机抽取一只小鼠处死,共12d,获得肿瘤样本114例;HE染色、CD31、CathepsinD、MMP2、MMP9、HMB45免疫组织化学染色和PAS染色;分别计数血管生成拟态周围及远离血管生成拟态区域肿瘤细胞中阳性细胞百分率;内皮依赖性血管周围及远离内皮依赖性血管区域肿瘤细胞中阳性百分率;连续计数10个高倍视野并取其均值.结果:在恶性黑色素移植瘤形成的第1～8天,肿瘤组织内存在血管生成拟态;第9～12天移植瘤中的血管生成拟态被内皮依赖性血管替代;血管生成拟态周围肿瘤细胞中CD31、MMP2阳性细胞百分率高于远离血管生成拟态区域的阳性细胞百分率;内皮依赖性血管周围肿瘤细胞CD31阳性细胞百分率与远离内皮依赖性血管区域的阳性细胞百分率之间存在明显差别;血管生成拟态周围肿瘤细胞MMP9阳性细胞百分率高于内皮依赖性血管周围的阳性细胞百分率;血管生成拟态密度与血管生成拟态周围肿瘤细胞CD31、CathepsinD、MMP2阳性细胞百分率之间存在相关,与肿瘤细胞中MMP9阳性细胞百分率之间不存在相关;内皮依赖性血管密度只与内皮依赖性血管周围肿瘤细胞中CD31阳性百分率之间存在相关,与CathepsinD、MMP9、MMP2之间不存在相关.结论:恶性黑色素瘤移植瘤中血管生成拟态与内皮依赖性血管共存,且与内皮依赖性血管之间存在一定的时空变化规律.CD31、CathepsinD、MMP2、MMP9、HMB45等参与了黑色素瘤血管生成拟态的形成,其中CD31、MMP2作用尤其重要.     

Fn、HSP70在冠心病猝死心肌中表达的诊断意义

目的：探讨冠心病猝死心肌组织Fn、HSP70染色改变，为法医学鉴定冠心病猝死提供客观依据。方法：选择35例冠心病猝死案例、30例冠心病死亡案例以及32例非冠心病死亡案例．用免疫组化方法对比检测纤维连接蛋白（Fibronectin Fn）和热休克蛋白70（heat shock protein70 HSP70）的表达。结果：纤维连接蛋白在35例冠心病猝死案例、冠心病死亡案例以及非冠心病死亡案例中均有不同程度的阳性表达．且冠心病组的表达水平明显高于冠心病猝死组和非冠心病死亡组（P〈0．05）；冠心病猝死组的表达水平明显高于非冠心病死亡组（P〈0．05）；HSP70在冠心病猝死案例、冠心病死亡案例组呈阳性表达．冠心病组表达水平明显高于冠心病猝死组（P〈0．05）．非冠心病死亡组均呈阴性表达；Fn在冠心病猝死组中的表达与HSP70呈明显正相关（P〈0．05）。结论：纤维连接蛋白和HSP70的阳性表达是心肌缺血和损伤的灵敏指标，对推断冠心病猝死具有一定的实际应用价值。