神奇的干细胞

干细胞(Stem cell)是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,可在生命生长发育中起“主干”作用的原始细胞。它的神奇之处在于:可诱导分化成为全身各种类型细胞,具有自我更新能力(Self-renewing),能够产生高度分化功能的细胞,由此带来基因治疗、器官移植等革命性进展。 1.干细胞的种类 干细胞按照生存阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。 (1)胚胎干细胞(Embryonic StemCell,ES细胞) 当受精卵分裂发育成囊胚时,内层细胞团(Inner Cell Mass)的细胞即为胚胎干细胞。胚胎干细胞具有全能性,可以自我更新并具有分化为体内所有组织的能力。早在1970年ManinEvans已从小鼠中分离出胚胎干细胞并在体外进行培养。而人的胚胎干细胞的体外培养直到最近才获得成功。     

绿色荧光蛋白探针标记的MIM-I-BAR基因构建和表达（英文）

为制备可视化的转移消失蛋白(MIM)的I-BAR结构域重组体,克隆了顺联绿色荧光蛋白(GFP)探针编码序列的MIM-I-BAR基因.在6xHis标签原核表达质粒上成功构建了DNA序列.同时,实现了未标记荧光探针基因的MIM-I-BAR质粒的构建以作实验对照.成功转染至BL21(DE3)大肠杆菌细胞后,GFP偶联的MIM-I-BAR(MIM-I-BAR-GFP)蛋白表现出很强的可视荧光,该表达产物可方便的通过目测、荧光显微镜、免疫印迹和紫外可见分光光度计等多种手段进行检测.此外,在考察不同条件下的蛋白表达效率过程中发现,带有GFP探针的MIM-I-BAR重组蛋白在温度为10℃时产率最高,而并非37℃.这一特征与非荧光标记的MIM-I-BAR明显不同.研究证实该最佳表达温度条件适用于重组蛋白产品中量制备.所开发的带有荧光探针的MIM-I-BAR蛋白产品及其制备工艺在科学研究、生物医学应用以及药物开发过程中均有较高的应用价值.     

大鼠骨髓源内皮祖细胞分离和培养

目的:研究大鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)分离、培养以及诱导向内皮细胞分化的方法。方法:采用密度梯度离心法从大鼠骨髓中分离单个核细胞,经贴壁后定向诱导培养2周。以CD34、CD133、VEGFR-2、vWF免疫细胞化学、荧光染色法以及Dil-acLDL结合FITC-UEA-1双荧光染色法鉴定EPCs。结果:贴壁细胞经培养诱导后3d开始伸展,4~7 d形成细胞集落,10~21 d增殖加速呈典型的“鹅卵石“样外观,并出现条索状结构且呈“微血管样“排列生长。细胞免疫荧光染色鉴定CD34、CD133、VEGFR-2、vWF阳性,Dil-acLDL联合FITC-UEA-1双染阳性。结论:从大鼠骨髓中分离单个核细胞,体外诱导培养后可以表现出部分内皮细胞的特征。     

在猜测试探中解题

猜想与实验是科学进步的阶梯,猜测与试探是数学解题取得进展的手段,对解题,我们首先要有积极乐观的心态,善于观察、敢于猜测、勤于试探,消极等待是不会成功的,猜了又猜,试了又试,才有希望逐步找到解法.例1分解因式x3-x2 x-6.猜想x3-x2 x-6=(x a)(x2 bx c).由于ac=-6,又可猜想a=±1,±2,±3,±6.如果a=1,就要试探原式是否有因式(x 1),而x3-x2 x-6=x2(x 1)-2x(x 1) 3(x-2),没有因式(x 1)!通过试探,可知(x-1),(x 2)也都不是原式的因式.让我们继续试探(x-2)是否是原式的因式:x3-x2 x-6=x2(x-2) x(x-2) 3(x-2),试探成功!所以,x3-x2 x-6=(x-2)(x2 …     

nm23在胚胎组织和肺癌组织中的表达研究

目的:探讨nm23蛋白(nm23-H1)在胚胎组织和肺癌组织中的表达.方法:对SD大鼠、人体肺癌组织、人体胚胎组织实施nm23(nm23-H1)蛋白免疫组化检测.结果:胚胎发育期器官形成以及各种上皮组织的分化与nm23蛋白(nm23-H1)积聚相互一致,对于正常的胚胎组织而言,只有具备了一定的器官结构,发育到了一定的时期,nm23蛋白(nm23-H1)才会稳定积聚.原发瘤灶与转移癌灶nm23蛋白(nm23-H1)阳性率比较P0.05,且在肺癌原发病灶中,nm23蛋白(nm23-H1)阳性组与nm23蛋白(nm23-H1)阴性组的淋巴结转移率比较P0.05.结论:肺癌组织、胚胎组织器官样化结构的分化与nm23蛋白(nm23-H1)在肺癌组织和胚胎组织中的积聚具有密切关系,nm23蛋白(nm23-H1)不能直接抑制肺癌细胞的转移,并且nm23蛋白(nm23-H1)对上皮组织结构的稳定具有调节作用.     

绿色荧光蛋白基因在转基因金鱼中的整合与表达

通过分子克隆技术将鲤鱼β-肌动蛋白启动子(carpβ—actin promoter A)与编码绿色荧光蛋白(GFP)的cD-NA融合构建成能在真核生物体内表达的质粒载体pAGFP。质粒pAGFP经Pvu线性化后采用显微注射法导入金鱼受精卵，在胚胎发育初期，经紫外光激发能观察到少数胚胎发绿色荧光。在通过PCR实验检测出的5个阳性个体染色体DNA中，经点杂交实验证实有2个个体染色体基因组上整合了GFP基因。     

高压静电法制备微胶囊化人视网膜色素上皮细胞

目的:探索用高压静电法制备人视网膜色素上皮细胞(human retinal pigment epithelial cell,hRPE)海藻酸钠- 壳聚糖- 海藻酸钠(alginate-chitosan-alginate,ACA)微胶囊.方法:用自制的高压静电微胶囊发生装置制备包被hRPE 细胞的ACA 微胶囊,并观察所得细胞微胶囊在培养液中培养1 周的细胞总数及存活率.结果:制备出直径为(400±13) μm 的hRPE 细胞ACA 微胶囊.d 1～d 3 微胶囊内细胞总数及存活率变化不显著,而培养到d 7 后总数显著上升,存活率降低,但总的活细胞数增加.结论:用自制的高压静电微胶囊发生装置能成功制备出hRPE 细胞的ACA 微胶囊;包被在微胶囊中的细胞培养1 周后,细胞增殖显著.     

关于细胞分化、癌变、衰老和死亡的一组例题解析

例 1　细胞分化达到最大限度的时期是 (　　 )A .受精卵时期　　　B .胚胎时期C .有丝分裂时期　　D .细胞的增殖时期解析　细胞分化是生物界中普遍存在的一种生命现象。在个体发育中 ,相同细胞的后代 ,在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程 ,叫做细胞分化。细胞分化是一个渐变过程 ,是一种特久的稳定变化 ,这与细胞分裂不同 ,因其不具有周期性 ,是不可逆的。一般多细胞生物体的发育起点是一个细胞 (受精卵 ) ,细胞分裂只能繁殖出许多相同的细胞 ,只有经过细胞的分化才能形成胚胎、幼体 ,并发育成成体。故而在胚胎时期是细胞分化…     

人胎盘AC133+造血干/祖细胞的集落形成能力

探究了人体胎盘组织AC133+造血干/祖细胞(HSPC)的集落形成能力.选用新鲜的人胎盘组织制成单个细胞(有核细胞)悬液,经流式细胞术(FCM)分析其AC133+造血干/祖细胞的纯度,采用免疫磁性分选法(MACS)分选AC133+和AC133HSPC,分别进行粒-单集落形成单位(CFU-GM)、红系集落形成单位(CFU-E)、混合集落形成单位(CFU-Mix)培养,以评价其增殖分化能力.结果显示胎盘组织AC133+细胞百分率为4.11％,其细胞亚群集落培养形成CFU-GM的集落数为(37±3)/1×103;形成CFU-Mix的集落数为(34±5)/1×103;形成CFU-E集落数为(33±4)/1×103.胎盘AC133细胞未见集落形成.结论:人胎盘组织含HSPC,AC133+细胞具有分化为CFU-GM、CFU-Mix、CFU-E的能力;AC133膜抗原可作为胎盘HSPC的分选标志.     

包被脂肪颗粒的膜对葡萄糖具有选择透过性吗——对2016年高考江苏卷第2题的探讨

<正>1试题下列关于生物膜透性的叙述,正确的是(C)A.核糖体合成的分泌蛋白能够自由透过高尔基体膜B.细胞质中合成的光合作用相关蛋白需通过内质网输入叶绿体C.子叶细胞中包被脂肪颗粒的膜对葡萄糖具有选择透过性D.细胞外高浓度的超氧化物歧化酶可以自由扩散进入细胞2疑问牛延琴[浙江省长兴县金陵高级中学(313100)]包被脂肪颗粒的膜上有葡萄糖载体吗?葡萄糖进入     

杨树叶绿体分离及叶绿体DNA提取方法的研究

利用高盐低pH值法对杨树叶绿体及其DNA进行分离与提取，经匀浆一差速离心一裂解一纯化，可获得完整的叶绿体和纯度较高的叶绿体DNA（chloroplast DNA，cpDNA），DNA平均产率0．64ug／g．本方法快速简便、省去传统的蔗糖密度梯度离心和氯化铯密度梯度离心等昂贵、耗时的步骤，对仪器的要求不高，成本低，适用于实验教学和科研活动。     

Human bone marrow-derived mesenchymal stem cells transplanted into damaged rabbit heart to improve heart function

INTRODUCTION Congestive heart failure is the end stage of manycardiovascular diseases. Myocardial infarction (MI)is a life-threatening event that may cause suddencardiac death and heart failure. Despite considerableadvances in diagnosis and treatment of heart disease,cardiac dysfunction after MI is still the majorworldwide cardiovascular disorder. Damaged myo-cardium after acute MI is gradually replaced by fi-brotic noncontractile cells to form scar tissue. Thedeveloping ventricul…     

Gene transfer into primary cultures of fetal neural stem cells by a recombinant adenovirus carrying the gene for green fluorescent protein

Objective: To evaluate the transduction efficiency of a recombinant adenovirus carrying the gene for green fluorescent protein (Ad-GFP) into the primary cultures of fetal neural stem cells (NSCs) by the expression of GFP. Methods: The Ad-GFP was constructed by homologous recombination in bacteria with the AdEasy system; NSCs were isolated from rat fetal hippocampus and cultured as neurosphere suspensions. After infection with the recombinant Ad-GFP, NSCs were examined with a fluorescent microscopy and a flow cytometry for their expression of GFP. Results: After the viral infection, flow cytometry analysis revealed that the percentage of GFP-positive cells was as high as 97.05%. The infected NSCs sustained the GFP expression for above 4 weeks. After differentiated into astrocytes or neurons, they continued to express GFP efficiently. Conclusion: We have successfully constructed a viral vector Ad-GFP that can efficiently infect the primary NSCs. The reporter gene was showed fully and sustained expression in the infected cells as well as their differentiated progenies.     

年龄相关性白内障的进展程度对角膜内皮细胞的影响的临床观察

目的观察双眼进程不同的年龄相关性白内障患者角膜内皮细胞密度及形态学变化,探讨白内障进展程度对角膜内皮细胞的影响。方法选取视力一眼≤0．2,另一眼≥0．6年龄相关性白内障患者100例,视力≤0．2眼为A组,视力≥0．6眼为B组,分别对其双眼的角膜内皮细胞密度、细胞大小变异系数（CV）及六角形细胞比例进行检查。结果A组角膜内皮细胞密度2297．65±364．66（cells／mm^2）,变异系数（56．65±7．28）％,六角形细胞比例（35．06±5．45）％;B组角膜内皮细胞密度2570．46±340．25（cells／mm^2）,变异系数（47．59±7．03）％,六角形细胞比例（41．97±5．19）％．A,B两组比较,角膜内皮细胞密度、角膜内皮细胞大小变异系数（CV）及六角形细胞比例差异有显著性（P〈0.05）。结论随着年龄相关性白内障进展程度的加重,患者角膜内皮细胞密度降低、细胞大小变异系数增大、六角形细胞比例减少,显示角膜内皮细胞的损伤凋亡可能与白内障的进展有相关性。     

玉米新品种郑单958高产栽培密度技术效应研究

通过对郑单958密度技术效应系统研究，密度与产量回归方程为：Y=0．296x-0．002x^2-0．885，干物质积累、根系伤流液与生长动态密切相关，又受密度大小影响．在每公顷产量1．1万公斤以上的栽培条件下，郑单958适宜密度为7．5万株／ha，适宜叶面积系数为5-6。     

人肝癌细胞总RNA电转染树突状细胞对T细胞的激活效应

目的:采用Trizol一步法提取人肝癌细胞总RNA电转染人外周血树突状细胞(Dendritic Cell,DC),观察其对混合T淋巴细胞的体外激活效应。方法:通过密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,用细胞因子体外培养诱导其成为DC。Trizol一步法提取人肝癌细胞总RNA。通过电转染法将人肝癌细胞总RNA导入DC内;通过混合淋巴细胞实验,获取DC激活的特异性效应T细胞。用MTT法测定效应T细胞的增殖率。结果:电转染方法可将人肝癌细胞总RNA导入DC;电转染前后DC分子表达无显著差异。转染了人肝癌细胞总RNA的DC可特异的激活T细胞且增殖率明显增强(P<0.05)。结论:电转染为人肝癌细胞总RNA导入DC提供技术上的可行性;转染了人肝癌细胞总RNA的DC可特异激活T细胞。     

关于DioPhantine方程Xy-(X±1)z=1

证明了方程xy-(x+1)z=1仅有正整数解(x,y,z)=(2,2,1);方程xy-(x-1)z=1仅有正整数解(x,y,z)=(1,s,t),(2,1,t),(r,1,1)和(3,2,3),其中r,s,t为任意正整数且r≥3,这一结果推广和改进了文献[4]中的结论.     

孕妇外周血分离胎儿有核红细胞与FISH分析技术在无创性产前诊断中的应用分析

目的探讨孕妇外周血分离胎儿有核红细胞与FISH分析技术在无创性产前诊断中的应用。方法选取于2018年1月至2019年1月期间,20例11~24周妊娠高危孕妇,对外周血均按照常规密度梯度法,对单个核细胞进行分离,并选择红细胞特异性抗体CD71,HbF结合运用流式细胞仪设备行FACS分选富集NRBC,并行FISH分析技术。结果完成20例孕妇的外周血标本NRBC分选,达100%的分选率,其中CD71及HbF双阳性细胞(3.46±1.65)×10-2;对其中18例孕妇运用FISH分析技术均成功分析,未发现任何异常问题。结论经孕妇外周血内分离富集所得胎儿有核红细胞,运用FISH分析技术对胎儿特定染色体进行检测,能够实现无创性产前诊断及时发现遗传性疾病,可为临床改善母婴分娩预后结局提供指导。     

Proliferation of endothelial cell on polytetrafluoroethylene vascular graft materials carried VEGF gene plasmid

Objective： To investigate whether vascular endothelial growth factor （VEGF） gene plasmid carried by polytetrafluoroethylene （PTFE） vascular graft materials could transfect endothelial cells （ECs） and promote their growth. Methods： PTFE vascular graft materials carried with pCDI-hVEGF121, pCDI or pEGFP were incubated in Tris-buffer solution and the values of optical density of 260 nm at different time were plotted, then the DNA controlled release curve was made. ECs derived from human umbilical vein were seeded on the pCDI-hVEGF121/pCDI/pEGFP-PTFE materials or tissue culture plates, ECs numbers were counted and VEGF protein concentrations at different time were measured by enzyme-linked immunoadsorbent assay method. Green fluorescent protein （GFP） expression in ECs on pEGFP-PTFE materials was examined with fluorescence mi- croscopy. Results： The controlled release curve showed that the gene released from PTFE materials was rapid within 8 h, then slowed down and that the gene released continuously even after 72 h. At 24, 72 and 120 h, ECs number and proliferation rate of pCDI-hVEGFI21-PTFE materials were higher than those ofpCDI or pEGFP-PTFE materials （P〈0.05）. VEGF protein concentration of pCDI-hVEGF121-PTFE materials was higher than that of pC DI or pEGFP-PTFE materials at 6, 24, 72 and 120 h （P〈0.01）. GFP expression in ECs on the pEGFP-PTFE materials could be detected by fluorescence microscopy. Conclusion： PTFE graft can be used as a carrier of VEGF gene plasmid, VEGF gene carried by PTFE can transfect ECs and promote ECs growth.     

Dose requirements of continuous infusion of rocuronium and atracurium throughout orthotopic liver transplantation in humans

INTRODUCTION Rocuronium bromide is a new steroidal nonde- polarizing neuromuscular blocking drug that has a faster onset of action than other nondepolarizing neuromuscular blocking drugs. The liver is the major route for its elimination. On the other hand, impaired liver function does not alter either atracurium’s elimination or plasma clearance (Ward and Neill, 1983; Pitter et al., 1990). The exclusion of the hepatic circulation and function during the anhepatic phase of orthotopic liv…