高寒植物长鞭红景天抗氧化系统对季节性极端低温环境的应答机制

本研究旨在探索高寒植物长鞭红景天抗氧化系统对季节性极端低温环境的应答机制,通过西藏色季拉山长鞭红景天的膜脂过氧化水平和抗氧化系统对季节性气温的响应进行追踪研究,结果得到,长鞭红景天在生长期内膜脂过氧化水平指标(MDA的含量)和抗氧化系统指标(SOD、POD和CAT的活性以及AsA的含量)均达极显著水平,即P0.01,而且各项指标与季节性温度存在一定正或负相关性,但三种抗氧化酶都表现出不同程度的滞后现象。研究结果表明,在生长期内季节性气温对长鞭红景天膜脂过氧化水平和抗氧化系统都产生了极显著的影响,同时也表明长鞭红景天抗氧化系统通过各种抗氧化酶之间以及与抗氧化剂之间相互补偿的机制度过低温不良环境,这套积极、有效的适应机制很可能是长鞭红景天对极端低温环境经过长期的自然选择和适应而建立的。     

长鞭红景天的研究概况

红景天（Rhodiola L）是继人参（Panax ginseng）、刺五加（Acanthopanax senticosus）之后,发现的第三种具有“适应原样”的药用植物,对于该属植物的研究多集中于化学成分和药理学方面。在本文中,对长鞭红景天（Rhodiola fastigiata）的分类、分子鉴定、生物学、组织及细胞培养、化学成分和毒理学等研究方面进行了归纳分析,为进一步研究长鞭红景天的种群生态学、生存机制及资源开发利用奠定基础,最后结合在西藏色季拉山对红景天的调查情况,对在研究与利用过程中存在的问题进行了分析讨论。     

浅析西藏色季拉山长鞭红景天生物量与气象条件的关系

西藏色季拉山海拔4350m以下地区,红景天地上总生物量随着海拔高度的升高而减少,平均每升高100m,生物量减少0.66g/m2;海拔4350～4620m区域,红景天生物量与海拔高度呈二次曲线关系,随着海拔的升高生物量在减少,当海拔在4500m左右,生物量降至最低,之后随海拔高度升高有所增加。海拔4350m以下地区的红景天生物量与气象要素关系不密切,而4350～4620m的生物量与生长季平均气温、20cm平均地温存在显著的2次曲线关系,与日照时数、降水量也存在显著的负相关。从综合影响来看,海拔4350～4620m区域的长鞭红景天主轴和地上总生物量主要与生长季平均气温、日照时数关系最为密切,气温的贡献略大于日照时数的贡献。     

蔺草基因组DNA提取条件的优化研究

以来自宁波高桥种质资源圃中的15个蔺草样品为材料,进行了基因组DNA提取条件的优化研究,结果表明：加入Proteinase K后,DNA的浓度普遍在600μg/mL以上,A260/A280值在1.8-2.0之间,浓度随加入量的增加呈递增状态,在加入量为6μL时提取效果最好。Proteinase K水浴温度与时间的条件优化试验中发现,最佳的水浴温度为65℃,水浴时间以30 min,离心条件在转速10,000 r/min,时间8 min时获得的DNA质量较好。加入RNase A后,A260/A280值在1.8-2.0之间,随加入量的增加纯度也增大,加入量以3μL为宜;RNase A水浴时间在10 min时A260/A280值普遍最接近1.8,浓度也较高。应用所获得的优化提取条件对宁波市高桥镇种植的15个蔺草样品进行提取DNA测试,电泳结果表明所有品种都出现了特异性DNA条带。由此,在进行蔺草实生苗基因组DNA提取时,建议采用如下条件：Proteinase K加入量6μL,水浴温度为65℃,时间为30 min;第一步DNA沉淀的离心转速为10,000r/min,离心时间为8 min。RNase A加入量3μL;RNase A水浴时间10 min。     

SDS法提取青稞叶片总DNA的改进方法

二十一世纪是生物技术的世纪。在西藏自治区内建立的第一个分子生物学实验室内，在前人研究的基础上。针对高原环境的特殊性，在现有条件下，改进操作程序，积极探索了青稞总DNA的提取方法，其纯化后的DNA经电泳，紫外吸收光谱仪检测，证明为高分子量、高纯度的DNA，可用于分子遗传学研究。     

SDS法和CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA用于SSR分析

选用8个西藏黄籽油菜干种子作材料,分别采用SDS和CTAB的微量法提取基因组DNA,取适量的该DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用uv1100型紫外分光光度计测定所提取的DNA在260nm、280nm的光密度值及比值,并进行SSR标记。结果表明,2种方法均能从西藏黄籽油菜干种子中提取出一定量的比较完整且纯度较高的DNA,用琼脂糖凝胶检测时,表现带型清亮,每个样品带型较一致,利用SDS法CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA,均适用于SSR分析。但用CTAB法提取的干种子DNA的纯度更高、量多、质量更好,更适于制备SSR分子标记的模板DNA。     

近亲幽灵蛛基因组DNA提取方法的优化

蜘蛛基因组DNA的提取是对蜘蛛在分子水平上进行研究的关键。本实验通过酚抽提法与仲丁醇浓缩法结合;酚抽提法与醚抽提法结合将酚抽提法进行优化,从而提高DNA的提取效率和纯度。为开展包括蜘蛛在内的节肢动物的分子生物学研究提供了基础实验依据。     

红景天根中总黄酮的提取工艺及含量测定研究

以芦丁为对照品,用紫外一可见分光光度法测定红景天粗提物中总黄酮的含量,回归方程为:y=33.074x,r=0.9999,回收率为97.3%,相对标准偏差小于2.00%.恒温超声波法提取30min与回流法提取6h的效果相当,提取快速而且节省溶剂.与前两者相比,高压法避免了超声波对人体的伤害,速度快,提取率高,更加适用于工业化生产.     

大黄鱼基因组DNA的提取及其RAPD分析条件的探索

通过实验筛选出一种快速、简便提取大黄鱼基因组 DNA的方法 .以该法提取的大黄鱼基因组 DNA为模板 ,对大黄鱼 RAPD分析中的 DNA模板浓度、镁离子浓度、d NTPs浓度、引物浓度和 Taq酶浓度进行了研究 ,初步确定了适于大黄鱼 RAPD分析的最佳反应体系 :2 5μL反应体系中 ,含模板 DNA2 5 ng,1 0× PCR缓冲液 2 .5μL,d NTPs1 0 0μmol/L,Mg Cl2 2 .5 mmol/L,引物 0 .2μmol/L,Taq DNA聚合酶 1 .0 μmol/min.     

植物基因组DNA提取及酶切技术的初步探讨

随着基因工程等分子生物学技术的迅速发展及广泛应用,人们经常需要提取高分子量的植物DNA,用于构建基因文库、酶切及克隆等,这是研究基因结构和功能的重要步骤。本研究通过用机械方法使组织和细胞破碎,然后加入离子型表面活性剂,溶解细胞膜和核膜蛋白,细胞膜和核膜破裂,进入细胞核内的表面活性剂解聚核中的核蛋白并与蛋白质形成混合物,用CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）在低盐浓度下加入酚和氯仿等表面活性剂使蛋白质变性,通过离心得植物总DNA溶液的过程总结CTAB 提取DNA 的方法,进一步了解DNA 的性质。     

华南远志DNA提取方法的比较研究

以华南远志干叶为材料,采用琼脂糖凝胶电泳的方法,比较研究CTAB法、高盐低pH法和SDS法3种方法对样品DNA提取。结果表明：改良的CTAB法所提取的DNA条带清晰,无明显降解,可供进一步的分子生物学研究使用。     

快速精制红景天口服液的新工艺研究

本文在考察红景天有效成分提取文献的基础上,系统研究了不同溶剂对红景天苷提取率的影响,确定水提法提取红景天更适合现代工业生产需要。以红景天苷为考察指标,用正交试验对提取和精制工艺进行优化,发现壳聚糖和明胶(3:1)混合组成的复合絮凝剂可快速精制红景天的提取液。     

三抗牌氧宝红景天胶囊提高缺氧耐受力的试验研究

分别以133、266、533mg/kg BW(分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍)剂量的三抗牌氧宝红景天胶囊连续给小鼠灌胃30天,结果能够延长小鼠在亚硝酸钠中毒后的存活时间、延长小鼠在急性缺血性缺氧(断头)后张口喘气时间,具有延长小鼠因缺氧而死亡的时间,对小鼠的体重无影响,提示该产品具有提高缺氧耐受力功能.     

苯酚法提取动物全血中基因组DNA的优化方案

通过对《分子克隆实验指南》中以蛋白酶K和苯酚从哺乳动物血液中分离高分子质量DNA的操作步骤进行优化,探讨了不同操作对从冻存家养动物全血中提取DNA质量的影响,为家养动物的分子生物学研究提供参考。     

红景天抗高原条件下家兔肠系膜微循环障碍的实验研究

目的观察藏药红景天口服液在高原条件下对家兔肠系膜微循环障碍的影响。方法观察用药前、后微循环系统毛细血管开放数目、毛细血管血流流态、微血管管径等指标的恢复情况。每隔5min观察一次上述指标的变化。结果藏药红景天口服液在高原条件下可使微血管口径扩大（P〈0．05）;藏药红景天口服液在高原条件下可使微血管开放数目增多（P〈0．05）;藏药红景天口服液在高原条件下可使微血管血液流态改善（p〈0．05）;结论藏药红景天口服液对家兔肠系膜微循环障碍有改善作用。     

提取西藏油菜总DNA的一种方法

以西藏栽培的油菜为材料,采用不同的药品、不同的配方、不同的水浴时间、不同的离心速度等关键的操作程序,筛选出一种提取油菜总DNA效果较佳的方法。此方法提取的DNA纯化后经电泳、紫外吸收光谱检测证明为高分子量、高纯度的DNA,可用于一般的生物化学和分子遗传学的研究。     

红景天提取物对训练小鼠肝SOD、MDA的影响实验研究

本文通过建立小白鼠耐力运动及一次力竭性游泳的疲劳模型来揭示红景天提取物对小鼠肝组织中的SOD活性、MDA含量的影响。结果显示:红景天提取物可提高训练小鼠肝脏过氧化物岐化酶(SOD)活性和降低脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量。提示:红景天提取物是一种抗氧化、清除自由基效果比较明显的中药,这为开发无毒副作用的运动饮料提供科学的实验依据。     

大花黄牡丹总DNA的提取初探

本文经过反复实验摸索,在没有液氮的情况下,改良了常用的总DNA的提取方法～SDS法和CTAB法,用这两种方法成功的提取了大花黄牡丹（Paeonia ludlowii）的总DNA。并通过琼脂糖凝胶电泳、分光光度计进行紫外检测发现,提取到的DNA纯度及含量均适合分子生物学操作的要求,为进一步遗传多样性分析、遗传图谱构建等研究奠定基础：     

DNA的提取及其在猪育种中的应用

本文对原种猪场3头无血缘关系的台系杜洛克种公猪前腔静脉采血,以ACD抗凝,采用4种不同方法(苯酚-氯仿法、改良CTAB法、试剂盒法、Chelex-100法)对采取的猪血基因组DNA进行提取,并以所提取的基因组DNA为模板,采用紫外分光光度计对其进行浓度和纯度的定量检测;采用琼脂糖凝胶电泳法对其进行定性检测;并对RAPD反应体系进行优化设计,用优化后的RAPD体系进行PCR扩增。     

四种从蒙古马全血中提取基因组DNA方法的比较研究

本实验分别采用酚———氯仿抽提法、快速抽提法、胍盐酸提取法和天为时代试剂盒法对蒙古马血样进行基因组DNA的提取,再利用琼脂糖凝胶电泳技术、紫外分光光度计和PCR扩增技术,对提取得到的DNA纯度、浓度及实用性进行检测,从而选择一种高效、快速、经济的从蒙古马血液中提取基因组DNA的方法。