商陆金属硫蛋白基因PaMT的表达分析

从商陆抑制性消减杂交文库中获得金属硫蛋白PaMT,基因全长141 bp,编码46个氨基酸,等电点和分子量分别为3.85和4.7 kD,具有12个半胱氨酸残基:具有典型的金属硫蛋白结构(CXC结构). 进化树和蛋白结构分析表明它属于金属硫蛋白家族. PaMT主要在根中表达,且受重金属胁迫上调其基因表达. 蛋白融合表达表明,PaMT可以提高大肠杆菌对重金属离子的耐受力.     

锌诱导对力竭运动大鼠金属硫蛋白的影响及其对心肌的保护作用

通过预先用锌诱导后大鼠做力竭性运动,来观察锌诱导金属硫蛋白(MT)合成对心肌的保护作用及其可能机制.方法:选用健康雄性SD大鼠30只,体重220～250 g,随机A、B、C分为3组,即:A组为对照组;B组为一次性力竭运动组;C组为锌 一次性力竭运动组,每组10只.满8周后,测定其心肌组织中的MT含量、组织中钙的含量、巯基(-SH)和丙二醛(MDA)含量、以及心肌中的谷胱甘肽过氧化物酶(CSH-px)和Na -K -ATP酶的活性.结果:1)与对照组相比,力竭运动组大鼠心肌组织中MT的含量较对照组显著降低(P＜O.05);心肌组织中MDA含量和总钙量显著增高(P＜0.05);-SH含量以及GSH-px活性和Na -K -ATP酶的活性显著降低(P＜O.05).2)与力竭运动组相比;锌 力竭运动组大鼠心肌组织中MT含量较力竭运动组显著增高(P＜O.05);心肌组织中MDA含量和总Ca2 量显著降低(P＜0.05);-SH含量及GSH-px活性和Na -K -ATP酶的活性显著增高(P＜0.05).结论:预先用锌诱导可减少力竭运动后心肌组织中MT含量的显著下降,降低心肌组织脂质过氧化水平,提高抗氧化酶的活性,防止钙超载,对力竭运动后心肌细胞的损伤具有保护作用.MT和金属锌密切相关,二者的相互作用可能共同参与保护力竭运动后机体组织的损伤,并促进损伤组织的快速修复.     

金属硫蛋白生理功能的研究进展

金属硫蛋白是一类富含巯基与金属的低分子蛋白质,化学结构特殊,可被不良刺激、金属、激素等诱导合成。对金属硫蛋白的解毒;消除自由基和抵抗脂质过氧化;抗电离辐射;增强机体的应激能力和在机体微量原素的储存、运输和代谢中的作用等方面的研究进展作了综述,并对金属硫蛋白在临床医学、功能食品等方面的应用前景进行了分析。     

锌铅暴露条件下菲律宾蛤仔消化腺和鳃内金属和金属硫蛋白的变化

通过慢性暴露实验研究了菲律宾蛤仔在锌(Zn²⁺),铅(Pb²⁺)单一胁迫及联合胁迫下,消化腺和鳃内富集Zn²⁺和Pb²⁺及其金属硫蛋白水平随Zn²⁺、Pb²⁺暴露浓度的变化规律.结果表明, Zn²⁺50μg/L、Pb²⁺25μg/L联合胁迫时,消化腺和鳃内重金属的富集低于Zn²⁺、Pb²⁺单一胁迫,表现为拮抗作用;MT含量随着Zn²⁺、Pb²⁺暴露质量浓度变化而变化,比较发现消化腺中MT含量随Pb²⁺暴露质量浓度的变化最显著(p<0.01).     

富Zn小麦品种中优耐受和富集Zn的机理研究

以富Zn小麦品种"中优"为研究对象,采用水培方法,研究不同浓度梯度的Zn处理下幼苗根系细胞凋亡情况,以及地上部Zn的累积对叶片中抗氧化酶（SOD,POD,APX）活性的影响。通过RACE技术克隆到小麦HMA1（重金属ATPase1）基因的部分序列,并利用实时荧光定量PCR技术分析HMA1、HMA2、PCs（植物络合素）和MT（金属硫蛋白）基因对Zn胁迫的响应。结果如下：1）富Zn品种"中优"具有快速的向地上部转运和累积Zn的能力;2）Zn毒害导致根毛区细胞的凋亡,抑制叶片中SOD酶的活性,增加POD和APX的活性;3）HMA1,HMA2和PCs基因都受到Zn诱导表达,可能参与了Zn的吸收及向地上部的累积。     

褪黑素经MT受体介导在运动改善SHR动脉内皮功能中的作用

摘要：目的：探讨褪黑素（melatonin, MT）在有氧运动改善自发性高血压大鼠（SHR）肠系膜动脉功能中的作用及可能的外周血管机制。方法：选用雄性SHR 16只,随机分为高血压安静组（SHR-SED）和高血压运动组（SHR-EX）,后者进行8周有氧跑台运动。另选用同龄雄性WKY大鼠8只作为正常血压对照组。8周后,取肠系膜动脉,采用离体微血管环实验测定二级肠系膜动脉的舒缩特性、western blot和免疫荧光共染法检测肠系膜动脉的褪黑素受体MT1、MT2和eNOS蛋白的表达和分布。结果：1）SHR-SED组基础收缩压（SBP）显著高于WKY组,经过有氧运动训练后SBP显著下降;2）有氧运动可增加肠系膜动脉对乙酰胆碱（ACh）的舒张反应,其pIC50值为WKY>SHR-EX>SHR-SED; MT (10?4 mol/L)预孵育微血管环20 min,可明显增加ACh（10-9～10-5 mol/L）的舒张反应,但对外源一氧化氮供体硝普钠（SNP,10-9～10-5 mol/L）诱发的舒张反应无明显效果; 且MT1/MT2非选择性拮抗剂luzindole（2×10?6 mol/L）预孵育微血管环20 min,可阻断MT对ACh舒张反应的加强效果;3）SHR-EX组MT1、MT2和eNOS表达均显著高于SHE-SED组,有氧运动显著抑制MT1、MT2和eNOS表达的下调;4）免疫荧光共定位检测MT2蛋白位于整个肠系膜动脉内,包括细胞外膜、血管平滑肌细胞层和内皮细胞层,eNOS蛋白主要存在于肠系膜动脉的内皮细胞层,MT2和eNOS蛋白二者共定位于肠系膜动脉的内皮细胞层。结论：长期有氧运动可有效降低SHR的基础血压,增强肠系膜动脉血管舒张作用,其中褪黑素是其重要机制之一。褪黑素可能是通过血管褪黑素受体及内皮途径起作用。     

2,4-D对小麦胚愈伤组织诱导及其形成的影响

为建立有效的小麦细胞诱导再生培养体系,以中梁22小麦幼胚和成熟胚为材料,分别在含不同浓度2,4-D的HB和MS培养基上进行组织培养,研究其对小麦幼胚和成熟胚愈伤组织形成的影响.结果表明：不同浓度2,4-D的处理之间存在显著差异,浓度为0.5mg/L的2,4-D的诱导率最高达到78.6%,有利于形成胚性愈伤组织;不同培养基之间差异显著,HB培养基的诱导率高于MS培养基;不同外植体之间差异不显著.     

基于一氧化氮和天然抗氧化剂的新配方的心肌保护作用

研究一种以一氧化氮合酶底物L-精氨酸和山楂提取物、虾青素和知母宁等天然抗氧化剂为主要成分的配方产品ZPF1对心肌的保护作用.发现,ZPF1显著促进大鼠心肌细胞H9C2细胞增殖,减少苯肾上腺素诱导的活性氧.在异丙肾上腺素（ISO）诱导小鼠心肌肥厚的模型中,喂食100 mg/（kg·d）的ZPF1显著抑制ISO引起的心肌肥厚和功能失常,其机制与上调SERCA2a蛋白有关.这些事实说明,一氧化氮和天然抗氧化剂的组合产品ZPF1对心力衰竭有较好的防治作用.     

二硫键并非蛋白质一级结构内容

二硫键(-S-S)又称二硫桥或硫硫桥,是指两个硫原子之间的化学健,其键能较大(30—100千卡/摩尔),因而是一种很强的化学键.蛋白质分子中的两个半胱氨酸残基的巯基氧化可形成二硫键,它可以将不同的肽链或同一条肽链的不同部分连接起来.一般来说,由一条多肽链组成的小分子蛋白质(如:核糖核酸酶、溶菌酶)二硫键的比例较大,尤其是存在于组织的胞外蛋白质,如:牛血清清蛋白,二硫键含量特别高(66500的分子量,含7对二硫键),在r-球蛋白中也是如此(160000分子量含有16对二硫键).当然,并非所有的蛋白质都具有二硫键,特别是那些带有许多亚基的大分子蛋白质,则根本不含二硫键(如血红蛋白,胶原以及许多大分子酶).但就含有二硫键的蛋白质而言,它的存在对于蛋白质结构的稳定有着重要的意义.     

思茅松成熟胚的离体培养

以思茅松(Pinus kesiya var.langbianensis)成熟胚作为培养材料,培养室温度为23±2℃,以1/2MS为培养基,培养基的蔗糖浓度为3%,在6-BA0.3-0.7mg/L+NAA0.5-1mg/L的激素配比范围内,诱导离体胚产生愈伤组织、不定芽和不定根。结果表明,愈伤组织分化率为95.3%;不定芽分化率为46.5%;不定根分化率为4.65%。     

非洲菊外植体褐变相关因子研究

通过改变相关培养条件,研究非洲菊组织培养过程中的外植体褐变因素.结果表明:适宜其离体芽诱导分化的培养基为MS+NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L;采用较嫩外植体茎段、接种前对外植体再剪切、降低细胞分裂素的浓度、对外植体勤继代及培养基中加入活性炭等措施可以在一定程度上减轻非洲菊组培过程中外植体的褐化程度,从而提高其组培的成功率.     

实时BIA技术对蛋白A与免疫球蛋白G相互作用的研究

应用实时BIA技术,探讨了蛋白A与小鼠免疫球蛋白G (MIgG)之间的相互作用,求出相互作用的动力学速率常数ka=5.07×10⁴ (mol/L)^-1s^-1,kd=9.65×10^-5(s^-1),结合常数KA=5.25×10⁸(mol/L)^-1.同时使用蛋白A固定的传感片用于MIgG浓度的检测,在 0.64～ 12mg/L浓度区间内,MIgG的响应值与其浓度有非常好的线性关系.     

观察二氧化硫对植物影响的实验改进

人教版高中生物（必修）第二册学生实验十二“观察二氧化硫对植物的影响”实验中,我们使用的玻璃罩,除去栽培植物幼苗的纸杯及泥土的体积,所剩容积约3．6L。按课本中要求,二氧化硫的浓度是14mg／m^3、28mg／m^3。经计算,所需的亚硫酸钠分别是0．img、0．2mg,这种数量无法用感量只有0．1g的托盘天平称出。假定课本中与亚硫酪铀后击的;     

GST-β-catenin-His双标签融合蛋白的原核表达、纯化及鉴定

应用RT-PCR技术扩增β-catenin的cDNA序列,并且在基因下游引入6×His标签序列,克隆至表达载体pGEX-4T-1. 经测序鉴定后,将重组质粒转入BL21pLysS感受态细菌,经IPTG诱导表达,采用Glutathione Sepharose 4B和Ni柱分步纯化GST-β-catenin-His融合蛋白. 所得产物经SDS-PAGE检测,在114 kDa处显示特异条带,与GST-β-catenin-His融合蛋白预期分子量相符. 经Western Blotting鉴定,所纯化蛋白能被β-catenin抗体、GST抗体和His抗体识别,为进一步研究β-catenin的功能提供了基础和前提.     

洱海北岸弥苴河水质沿程变化特征研究

在弥苴河全程设置12个固定点位对其水质进行逐月监测,结果显示:弥苴河全年的TN年均浓度为0.899 mg/L,水质类别为地表水Ⅲ类;TP年均浓度为0.080 mg/L,水质类别为地表水Ⅱ类;CODC年均浓度为12.2 mg/L,水质类别为地表水Ⅰ类,其总体水质基本达到水功能类别Ⅲ类要求.     

忽地笑离体快繁研究

以忽地笑的鳞茎(带鳞茎盘)为材料进行离体培养,同时对PVP防止褐化做了初步研究,结果表明:不定芽诱导的最佳培养基为:MS NAA1.0mg/l BA15mg/l KT0.4mg/l,最佳增殖培养基为:MS BA20mg/l IBA0.5mg/l,较好的生根培养基为:MS NAA1mg/l BA0.1mg/l,不同浓度的PVP对防止褐化的效果不明显;活性炭能够较好解决褐化问题。     

商陆扩展蛋白基因PaEXP1在逆境胁迫下的表达

利用同源克隆的方法,从商陆中克隆得到扩展蛋白基因的全长cDNA序列,命名为PaEXP1(GenBank 登录号为GQ851947).PaEXP1长1128bp,含有759bp的完整开放阅读框,编码252个氨基酸,分子量27.1kD,等电点8.55.PaEXP1氨基酸序列N端含有8个半胱氨酸残基,1个组氨酸(His-Phe-Asp,HFD)域,C末端存在4个保守的色氨酸残基,具有扩展蛋白的典型结构.系统进化树分析表明,PaEXP1属于扩展蛋白的α-扩展蛋白家族.Real time-PCR结果表明,PaEXP1主要在根中表达,低温、盐、重金属和渗透胁迫均强烈地抑制其基因的表达.酵母转化实验表明,转PaEXP1可以提高酵母的平均直径,说明PaEXP1参与细胞壁的松弛扩展和细胞的增大过程.     

KI溶液对冬虫夏草生物量及多糖含量的影响

研究不同浓度KI溶液对冬虫夏草液体发酵液中虫草生物量和虫草多糖含量的影响,筛选出提高虫草生物量及虫草多糖含量的最优KI浓度.将不同浓度的KI溶液添加到虫草液体发酵培养基中,测定虫草生物量,提取虫草多糖,用苯酚-硫酸法对其含量进行检测.结果表明,在冬虫夏草液体发酵液中,添加KI溶液能明显提高虫草生物量及虫草多糖含量,当KI质量浓度为5mg/mL时,虫草生物量质量浓度达31.64mg/mL,菌丝体长势很强,胞内多糖含量为26.4mg/g,胞外多糖质量浓度为3.6mg/mL,为最优浓度梯度.冬虫夏草发酵培养过程中添加KI溶液能明显提高虫草生物量及虫草多糖含量.     

红王子锦带花药诱导再生植株的研究

以红王子锦带花药作为试材,采用离体培养技术,通过对红王子锦带花粉发育的细胞学观测与统计分析,对诱导红王子锦带花粉胚分裂基本培养基、诱导愈伤组织培养基及诱导再生植株培养基等的多种因素进行筛选,建立红王子锦带花药再生植株繁殖体系。结果表明：单核期花药愈伤组织诱导率较高;筛选出最优愈伤组织诱导培养基(MS+2,4-D 0.5 mg·L^-1+KT 2.0 mg·L^-1+蔗糖2%),愈伤组织芽分化诱导培养基(MS+ZT 0.2 mg·L^-1+BA 1.0 mg·L^-1),愈伤组织诱导再生植株诱导培养基(MS+BA 0.5 mg·L^-1+ZT 0.5 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+蔗糖2%),再生植株继代增殖培养基(WPM+BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+蔗糖2%)。通过花粉再生植株的诱导实验研究为锦带花育种及新品种选育奠定基础。     

抗生素对中嘉8号杨叶片愈伤组织诱导和不定芽形成影响

探讨了4种抗生素对中嘉8号杨叶片愈伤组织的诱导及不定芽形成的影响。结果表明:噻孢霉素、羧苄青霉素和链霉素的浓度均为200 mgL-1时,不定芽分化率分别为73.3%、15.6%和6.7%,卡那霉素抑制愈伤组织和不定芽的发生,对芽的生长也有抑制作用。所以噻孢霉素可作为首选抑菌剂。随着卡那霉素浓度的提高,不定芽的存活率逐渐降低。当卡那霉素浓度≥60mg/L时,芽存活率为0。在筛选转化体时,卡那霉素对芽苗使用浓度以40-50 mg L-1为宜。