反义RNA

反义RNA是指核苷酸序列与其所调控的RNA序列互补的RNA片断。反义RNA最初在原核生物中发现,后来在真核细胞中也发现有反义RNA系统的存在。反义RNA的发现,为人工控制基因表达提供了一个更为直接而有效的方法,对于基因治疗和基因功能的分析具有重要意义。一、反义RNA作用原理反义RNA是通过碱基配对,特异性地与RNA(主要是靶mRNA)结合,由此形成的     

小RNA研究中的有关概念

小RNA是近年来发现的一类长度在21-28nt的调控RNA分子,分为小干涉RNA(siRNA)、微RNA(mi RNA)和其他小RNA,与基因表达、细胞周期乃至个体发育过程密切相关,是对中心法则中RNA中介角色的重要补充。     

不同温度和不同放置时间对总RNA提取浓度和纯度的影响

目的:探索一种提高总RNA提取浓度的方法。方法 :用Trizol方法分别提取乳腺癌细胞和心肌组织中的总RNA。在提取过程中,分别把加入异丙醇后的混合液8等份,其中4个样品管分别在室温、4℃、-20℃、-80℃下放置10min,另外4个样品管在-80℃冰箱中分别放置0.5、1、2、4h;然后检测提取到的总RNA质量浓度、纯度及完整性。结果:均放置10min时,提取的总RNA质量浓度随放置温度的降低而增加(P≤0.01);放置于-80℃时,随放置时间的增加,提取的总RNA浓度增加(P≤0.01)。两种条件下提取的总RNA的纯度均无显著性差异(P>0.05),其完整性也无明显影响。结论:不同的放置时间和温度会影响RNA提取的质量浓度,但对RNA纯度和完整性无明显影响。     

RNA干涉技术在基因功能研究中的应用与展望

RNA干涉是由双链RNA诱导的基因沉默现象,具有高特异性、高效性等优势,因而作为一种反向遗传技术广泛地应用于基因功能的研究.本文就近年来RNA干涉技术在基因功能研究中的应用作一综述.     

脊柱侧凸患者髂骨松质骨总RNA提取方法

为了创建一种高效提取人体骨组织总RNA技术,分别采用Trizol、RNeasy lipid kit及改良CTAB提取人体松质骨总RNA,并分别用核酸蛋白检测仪、1%琼脂糖凝胶电泳和荧光Real-time PCR检测3种不同方法提取的总RNA质量。结果显示,3种方法中,Trizol方法提取的总RNA纯度最差,RNeasy试剂盒提取的总RNA纯度得到提高,但完整性差,改良的CTAB方法提取的总RNA纯度和完整性符合分子生物学实验要求。改良的CTAB法是从骨组织中提取总RNA高效便捷的方法,适于临床骨组织基因表达的研究。     

核糖体RNA的转录与调控

核糖体是细胞生长所需的蛋白质合成的动力工厂,每一个核糖体的大小为4兆而顿,有18S、5．8S、28S和5S四种RNA及80S等蛋白质组成,细胞中约有50％的RNA是核糖体RNA,这些RNA直接或间接地参与形成数百万的核糖体,因此,核糖体RNA基因的转录调控机制一直是细胞生长和细胞周期调控研究的热点,细胞通过进化已经形成一套完整的配合RNA聚合酶共同完成的核糖体RNA转录调控机制。本文从核糖体RNA基因结构出发,就染色质重塑、组蛋白乙酰化及细胞周期三个方面探讨核糖体RNA转录调控机制。     

RNA干扰作用的特点

RNA干扰是双链RNA介导的特异性基因表达沉默的现象,是生物界一种古老而且在进化上高度保守的基因表达调节机制,具有普遍性、高效性、浓度依赖性、高度特异性、可遗传性、可传播性、位置效应、时间效应、多基因参与和ATP依赖性等特点。     

一种安全快速提取植物RNA的方法

本文介绍了一种安全高效的植物RNA提取方法.利用改良的Trizol法从番茄中提取RNA,所需实验器具灭菌后即可使用,操作简便安全.经实验提取得到的RNA经核酸蛋白测定仪检测,OD260/OD280在2.0左右,琼脂糖凝胶电泳清晰可见28S和18S,且28S的亮度约为18S的2倍.所提取的RNA可直接用于后续的反转录、cDNA文库构建等分子生物学实验.     

核糖体RNA的转录与调控

核糖体是细胞生长所需的蛋白质合成的动力工厂,每一个核糖体的大小为4兆而顿,有18S、5.8S、28S和5S四种RNA及80S等蛋白质组成,细胞中约有50%的RNA是核糖体RNA,这些RNA直接或间接地参与形成数百万的核糖体,因此,核糖体RNA基因的转录调控机制一直是细胞生长和细胞周期调控研究的热点,细胞通过进化已经形成一套完整的配合RNA聚合酶共同完成的核糖体RNA转录调控机制。本文从核糖体RNA基因结构出发,就染色质重塑、组蛋白乙酰化及细胞周期三个方面探讨核糖体RNA转录调控机制。     

几种提取热带假丝酵母总RNA方法比较

选择Trizol法、热酚法、酵母RNA提取试剂盒法3种方法提取热带假丝酵母总RNA,通过对总RNA进行质量浓度和纯度分析,比较不同方法对热带假丝酵母总RNA提取的影响.结果表明:使用酵母RNA提取试剂盒法提取热带假丝酵母总RNA是较为有效且简便的方法.