与核酸有关的几种酶的比较

<正>一、限制性核酸内切酶(限制酶)1.限制酶的来源:在基因工程中,用来切割DNA的工具是限制性核酸内切酶,又称限制酶。迄今为止,基因工程中所用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中分离纯化而来的,它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。微生物中限制酶之所以不切断自身DNA,是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完整的防御机制,可以将外源入侵的DNA降解掉。生物在长期演化过程中,含有     

对现代生物科技专题中一些常见疑问的分析

1限制酶为什么只切割外源DNA而对自身DNA不起作用?限制酶存在于原核生物体内,而原核生物体内限制酶与甲基化酶往往同时存在。甲基化酶同限制性内切酶具有完全相同的识别序列,甲基化酶使识别序列中的某个碱基发生甲基化,从而保护DNA不被限制性内切酶切开。     

关于“重组 DNA 构建”的分析

本文结合实例,对重组DNA构建过程中如何选择限制酶、重组DNA中限制酶识别位点的变化和重组DNA长度的变化三个问题进行了分析。     

高中生物学教学中涉及的一些重要酶及其作用

1基因工程中的重要酶 1.1限制性核酸内切酶（简称＂限制酶＂）是可以识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA,使DNA链中磷酸二酯键断开的一类内切酶,被誉为＂分子手术刀＂。     

“基因工程”考点突破

考点突破考点一基因工程的基本操作工具(一)重点归纳1.与DNA分子相关的酶(1)几种酶的比较(2)限制酶与DNA连接酶的关系1限制酶不切割自身DNA的原因是:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。2DNA连接酶起作用时不需要模板。2.载体(1)作用1作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内。2利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。     

基因工程专题辅导提纲

基因工程是指将某特定的基因(DNA片段),通过载体或其他手段送入受体细胞,使它在受体细胞中增殖并表达的一种遗传学操作。采用基因工程的方法,能够将一种生物DNA片段(外源基因)导入另一种生物体内,使两者的遗传物质结合起来,以改变其遗传结构,从而创造出新物种或新品种。1 基因工程操作的主要步骤1.1 获取目的基因(外源基因) 利用基因“剪刀”——DNA限制性内切酶,将外源DNA切成许多片段,从中获取所需要的目的基因。1.2 目的基因和载体连接载体是基因的“运输工     

与限制酶有关的例题及解析

本文就限制酶切割后获得的DNA片段种类数、识别序列具有方向性、切割后产生的末端、相同的限制酶切割目的基因与质粒、目的基因与质粒的连接五个方面对学生在解题中易错的疑难知识进行归类分析。     

有关限制性内切酶应用的习题简析

特别提示： 我们知道限制性内切酶（限制酶）是指能识别DNA中特定破基顺序,并在特定位点切割双链DNA的核酸内切酶它在生物学中应用相当广泛,是基因工程中的工具酶,用来构连重组DNA分子,对于遗传性疾病的基因定位和基因诊断的研究也具有重要的应用价值。下面我们以问题的形式简要地了解它在这些方面的应用     

农业分子育种中外源DNA导入技术的研究与发展

本文概述了外源DNA导入技术的产生、发展及其理论基础 ,介绍了外源DNA导入的具体方法 ,探讨了外源DNA导入技术中有关的机理问题     

“限制性核酸内切酶”考点直击

限制性核酸内切酶主要是微生物体内的一类酶,能将外来的DNA切断.由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶,又称限制酶,是基因工程的"分子     

对“基因工程”专题中一些问题的分析

1从原核生物中分离纯化出来的限制酶是否会切割自身的DNA？构建好的重组质粒若以大肠杆菌等原核生物为受体细胞,是否会被其中的限制酶切开而不能起作用呢？     

浅谈运载体和限制酶在基因工程中搭配应用

人教版高中生物学全一册教材基因工程一节,介绍了限制性内切核酸酶和运载体,阐明了重组DNA的构建过程：先用限制酶切割运载体（质粒）,产生黏性末端,再用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同黏性末端,加入DNA连接酶,即可形成重组DNA分子（也叫重组质粒）。学生学习完这部分内容之后,由于对限制酶和运载体搭配使用及基因检测知识认识不够深入,易产生错误。     

对“基因工程”重要考点的解读

基因工程相关内容操作性强,但是在中学生物学教学中难以进行实际的实验操作。为此,本文对近年来基因工程的重要考点进行了解读。1限制酶限制酶中的"限制"的含义是它比普通酶具有更强的专一性,这种专一性表现在三个层次:识别DNA(不识别RNA)、识别特定序列(两条链正反读序列一样)、只能切割特定序列内特定位点的磷酸二酯键。1.1限制酶的特异性例1(2010浙江高考)用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸是否可行?解析烟草花叶病毒是RNA病毒,限制酶不能识别RNA,所以不可行。     

一种地衣芽孢杆菌表达载体的构建

用PCR方法从地衣芽孢杆菌WH-08基因组DNA中分别扩增α-淀粉酶基因amyL启动子PamyL和终止子TT,用重叠PCR技术将两者连接,重叠PCR产物用Hind III和EcoR I双酶切后,与经相同酶切的载体PHY300 PLK连接,构建重组质粒PHY-PamyL-TT。该重组载体的构建为外源蛋白在地衣芽孢杆菌中的高效表达奠定了基础。     

重组DNA分子纸质模型的创新设计、制作与应用

研究小组创新应用重组DNA分子纸质模型,将抽象繁杂的过程转变为简易操作,有效帮助学生理解基因工程中采用两种限制酶能有效减少意外重组。具体做法包括:研究小组将教材中的硬纸板改为更易得到、剪贴的红白纸条,并将白纸条连接成纸环代表质粒;在DNA片段上增加箭头,显示遗传信息转录的方向;采用不同颜色的字母表示被限制酶识别的核苷酸序列,并在纸条上标注被剪切掉的废片段、有效片段及目的基因。实践表明,重组DNA分子纸质模型的可行性强,成本低,效果好,适合推广。     

《中学生物学》杂志电子版征订启事

基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。DNA重组技术是体外的微显微操作技术，切割DNA的工具是限制性核酸内切酶（简称限制酶）。新课标生物选修3教材“DNA重组技术的基本工具”对限制性核酸内切酶作了一定简介，     

用字母代替数字分析确定酶切位点及图谱

<正>例1为了解基因结构,通常会选取某一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小,然后再用另一种限制酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小,表1是某小组进行的相关实验所得结果。表1     

基因工程中限制酶切割的几个问题

限制酶全称限制性核酸内切酶,能识别并切割具有特异序列的双链DNA分子,主要从原核细胞中分离纯化而来,迄今为止,已分离出来的限制酶约有4000余种.作为基因工程中非常重要的一种工具,它应用广泛,是历年高考中能力题的命题着力点,但由于书本相关内容介绍简单,而考试命题时常有所拓展,很多师生在解答此类题目时常发生认知冲突,产生很大的困惑,为此,笔者总结了教学过程中的一些问题,供大家参考.     

用高速微弹法将外源基因导入水稻愈伤组织

高速微弹法是在1987年发展起来的引人注目的外源基因导入技术。它是用粒子枪把被覆盖目的基因DNA分子的微钨弹加速到高速,直接穿过植物的细胞壁、细胞膜,将DNA带进细胞内部。与其他转化技术相比,既不受植物种类的限制,也不存在原生质体培养成株方面的困难。用高速微弹法,T.M.Klein(1987年)把TMV RNA     

对基因工程相关知识点的一些拓展和延伸

<正>高中《生物·选修3·现代生物科技专题》(浙教版)比较系统地介绍了基因工程的基本工具、操作步骤和应用,但是对有些内容只是一笔带过,在一定程度上给学生的自学和应试带来困惑。本文就基因工程中的一些相关知识点进行扩展,帮助学生更全面地了解基因工程。1是用单酶切还是双酶切?根据浙教版教材的介绍,基因工程处理目的基因和质粒载体的时候应使用同一种限制酶(单酶切)得到相同的黏性末端,再用DNA连接酶就可以得到重