大蒜提取液抑菌活性的探究活动

本文介绍了一种探究大蒜提取液抑制蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus)生长的实验方法,旨在引导学生对相关公共卫生问题的讨论。     

对虾的致病性蜡状芽孢杆菌的分离及其特性

从感染“黑鳃病”的对虾中,分离出一珠对虾的致病菌,经鉴定为蜡伏芽孢杆菌。通过鳃部吸附及肌注感染,受感染的对虾迅速死亡,注射该菌株的培养上清液,对虾也迅速死亡,显示蜡状芽孢杆菌的胞外代谢物,在对虾致病过程中起着重要作用。     

地衣芽胞杆菌α-淀粉酶基因的克隆及其表达

以噬菌体λEMBL3为载体,大肠杆菌Q358,Q359为宿主构建了地衣芽胞杆菌的基因文库,用I_2-KI染色法从该文库中分离出α-淀粉酶基因,并将含该基因的2.5kb片段亚克隆至pBR322。限制图谱分析显示克隆的基因与国外克隆的地衣芽胞杆菌基因有所不同。将2.5kb的基因片段与质粒pUB18的BamHI片段连接、组建重组质粒pUA44,并将其转入枯草杆菌的感受态细胞及短小芽胞杆菌的原生质体,实验结果证明,克隆基因可在枯草杆菌及短小芽胞杆菌中表达。     

不同杀菌剂对蜡状芽孢杆菌的抑菌效果研究

采用抑菌圈法测定了4种杀菌剂对蜡状芽孢杆菌的毒力。结果表明,随着药剂浓度的增加,4种药剂对蜡状芽孢杆菌的抑菌率逐渐升高,其中800.0mg/L福美双、160.0mg/L农用链霉素和640.0mg/L申嗪霉素3种药剂在72 h的抑菌率分别达到94.3%、88.1%和82.0%,160.0mg/L中生菌素的抑菌率在48 h达到最高为78.0%。4种药剂对蜡状芽孢杆菌的毒力依次为农用链霉素中生菌素福美双申嗪霉素,其中农用链霉素和中生菌素的毒力较高,EC50分别为29.92 mg/L和50.69 mg/L。室内毒力测定表明农用链霉素和中生菌素是蜡状芽孢杆菌防控较为理想的杀菌剂。     

土壤分离苏云金芽胞杆菌的方法比较

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)是世界上应用最广的微生物农药,通过比较三种经典的从土壤样品中分离Bt的方法,发现NaAC—抗生素法的分离效果最好,最高分离率5.06%,平均达到2.82%,为大规模从土样中分离Bt奠定了基础。     

牛奶中苏云金芽胞杆菌的分离与鉴定

采用醋酸钠-抗生素分离法对超市牛奶样品进行苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)的分离,获得2株Bt菌株,分别命名为BtBRC-LJ1和BtBRC-LJ2。利用PCR方法对BtBRC-LJ1和BtBRC-LJ2菌株hblD和nheC肠毒素基因的分布进行检测。结果显示,这2个菌株均含有这两种肠毒素基因。     

含铀土壤中苏云金芽胞杆菌的分离与鉴定

从新疆某铀矿厂采集土样,通过光学显微镜观察其伴胞晶体,并经生理生化特征和cry基因的鉴定确认为苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt),将其命名为BRC-ZYR4。利用PCR-RFLP方法和SDS-PAGE方法对该菌株进行了cry基因型和杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins,简称ICPs)的鉴定。结果表明,BRC-ZYR4可能含有cry1Ad、cry1Cb和cry1Ea基因,含有约130、75、50、30和25kDaICPs。     

一株毒死蜱降解菌的固定化条件优化研究

采用在50 m L三角瓶中定量添加毒死蜱药液和固定化菌的方法研究了不同包埋条件对固定化蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)降解毒死蜱的影响,最后将固定化条件进行了正交试验的优化。结果表明,游离化菌体的菌龄为20 h对初始浓度为50mg/L毒死蜱的降解率达最高。从降解曲线得出,海藻酸钠固定化菌降解毒死蜱的反应时间为24h时降解率达75.4%;菌体和海藻酸钠溶胶的包埋比为1∶20对毒死蜱的降解率达最高为76.8%;随着成型剂Ca Cl2浓度的增大,固定化菌对毒死蜱的降解率先上升后下降,Ca Cl2浓度为2%对毒死蜱的降解率达最大为82.6%,海藻酸钠溶胶浓度为3%对初始浓度为50 mg/L毒死蜱的降解率达最大为85.7%。通过正交试验得出,海藻酸钠浓度(A)、Ca Cl2浓度(B)和固定化时间(C)三者对固定化菌降解毒死蜱的影响都达到显著水平(P0.05),影响次序依次为CAB,最优水平分别为海藻酸钠浓度3.0%、Ca Cl2浓度1.5%和固定化时间32 h。因此,固定化蜡状芽孢杆菌对毒死蜱的降解率较高,在毒死蜱水体污染的降解去毒方面具有的应用价值较大。     

一株高产PHB蜡状芽孢杆菌的分离筛选与鉴定

通过尼罗蓝平板筛选、苏丹黑染色法及摇瓶复筛,从土壤中分离筛选到一株高产PHB的菌株FQB6,经形态观察、生理生化实验及16S r DNA遗传分析,鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。进一步研究菌株的生长规律,发现菌株的延迟期为0-36h,对数生长期为36h-60h,稳定期为60h-96h,当培养时间为84h时,PHB产量和生物量均达到最大,分别为1.926g/L和1.05g/L。     

枯草芽胞杆菌基因文库的构建

以λEMBL3为载体,以大肠杆菌Q358及Q359为宿主成功地构建了枯草芽胞杆菌808的基因文库。采用Marmur的方法从供体菌中提取大于50Kb的染色体DNA,酶切后用5～25％NaCl梯度离心,分部收集15～20Kb的DNA片段作为供体,从甘油梯度纯化的噬菌体提取λEMBL3 DNA经BamHI,EcoRI双酶解,退火处理,纯化得左、右臂作为载体,供体与载体DNA以1:2浓度进行连接反应,连接产物用大肠杆菌SMR10单菌系统制备的包装抽提物进行体外包装,感染大肠杆菌Q358及Q359,测定重组噬菌体数目,实验结果表明:重组体滴定达7.5×10~4pfu/μgDNA,超过Clarke和Carbon公式的理论值的要求,并从该文库中钓出淀粉酶基因,证明所建文库是有效的。     

普尔泰诱发蚕豆根尖细胞微核的研究

在农药普尔泰的正常使用浓度范围内，用不同浓度的普尔泰分别处理蚕豆根尖细胞4h和8h，监测其细胞微核诱变情况。结果表明，普尔泰对蚕豆根尖细胞微核的诱变，随着处理液浓度的增加、处理时间自延长，具有良好的剂量效应关系。用蒸馏水作对照处理，经t检验，差异极显著，说明普尔泰对蚕豆根尖细胞有明显的诱变作用。     

脱毛蛋白酶生产菌株Bacillus cereus SZ-4的筛选及遗传稳定性检测

采用平皿菌落分离法、透明圈法及摇瓶发酵法从盐腌皮上分离、筛选得到脱毛蛋白酶生产菌株Bacillus cereus SZ-4,该菌株经发酵后得到的粗酶液酶活力为72/mL;对其遗传稳定性检测结果表明,Bacillus cereus SZ-4遗传稳定性较差,在1～4代菌种之间差异不是很显著,可用于发酵生产接种。     

FTA滤膜用于PCR检测豆制品中蜡样芽孢杆菌的研究

采用FTA滤膜从豆制品中直接提取模板DNA,根据蜡样芽孢杆菌的hblA基因设计一对特异性引物进行PcR,并对反应条件进行优化．结果表明该引物能特异性扩增出338bp的目的条带;不增菌的情况下,PCR检测蜡样芽孢杆菌的灵敏度是102CFU／mL,检测时间为4h．     

Bacillus cereus SZ-4产蛋白酶脱毛蓝湿革机械性能研究

将蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)SZ-4摇瓶发酵后所产脱毛蛋白酶粗酶液应用于猪皮、牛皮和绵羊皮的脱毛后,对经软化工序与未经软化工序制备成的蓝湿革进行比较。绵羊皮二者之间,在抗张强度、撕裂强度检测结果上未表现出明显的差别;而对于猪皮、牛皮而言,因为其皮张较羊皮厚且脱毛作用时间比较短,导致脱毛酶只能作用至毛囊附近而未能进一步对皮胶原纤维间质等进行水解,未能完全达到软化皮张的作用。     

瑞香狼毒根部不同极性黄酮组分的抑菌活性

采用柱层析法洗脱分离出了瑞香狼毒根部不同极性的黄酮组分,并采用抑菌圈法和连续稀释法研究了4种组分分别对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、变形杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、绿脓杆菌7种细菌以及黑霉、绿木霉、青霉、根霉4种真菌的抑菌活性.结果表明瑞香狼毒根部抑菌性活性大小为乙酸乙酯相>氯仿相>石油醚相>正丁醇相.其中乙酸乙酯相对所有供试菌种均表现出一定的抑制作用,对金黄色葡萄球菌和蜡状芽孢杆菌的最小抑菌浓度均为6.3mg/mL,最小杀菌浓度均为12.5mg/mL.     

泡菜抑菌性的初步研究

本文初步探讨了泡菜的抑菌性。利用打孔法测试了5种泡菜水样品对大肠杆菌、蜡状芽孢杆菌和酿酒酵母的抑菌活性,结果显示有4种泡菜水样品对大肠杆菌和蜡状芽孢杆菌具有抑菌活性,且对蜡状芽孢杆菌的抑制作用强于大肠杆菌,但5种泡菜水样品对酿酒酵母都不具有抑制作用。进一步的pH试验和乳酸的抑菌实验表明乳酸不是泡菜水中的主要活性物质,泡菜水中存在其他的抑菌活性物质,且这些抑菌物质具有pH依赖性。     

沙蚕美拉德反应产物的抑菌活性研究

采用琼脂打孔扩散法进行了沙蚕美拉德反应产物的水溶液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、蜡质芽孢杆菌、沙门氏菌、绿脓杆菌、黄瓜枯萎病菌、水稻纹枯菌、白菜丝核菌和黑曲霉等九种菌的体外抑菌活性实验,结果表明沙蚕与蔗糖的美拉德反应产物对蜡质芽孢杆菌、大肠杆菌有较强的抑菌效果,对黑曲霉、水稻纹枯菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌有一定的抑制效果,而沙蚕与葡萄糖的美拉德反应产物没有明显抑菌效果。     

球形芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌灭蚊毒素研究进展

球形芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌是目前研究较为深入的杀蚊微生物.球形芽孢杆菌产生二元毒素,苏云金芽孢杆菌产生Cry和Cyt两类杀蚊毒素.新菌株和新毒素的分离,以及毒素之间的相互作用的研究,有助于生物防治危害严重的蚊虫.