一种安全快速提取植物RNA的方法

本文介绍了一种安全高效的植物RNA提取方法.利用改良的Trizol法从番茄中提取RNA,所需实验器具灭菌后即可使用,操作简便安全.经实验提取得到的RNA经核酸蛋白测定仪检测,OD260/OD280在2.0左右,琼脂糖凝胶电泳清晰可见28S和18S,且28S的亮度约为18S的2倍.所提取的RNA可直接用于后续的反转录、cDNA文库构建等分子生物学实验.     

不同破壁方法对节旋藻DNA提取效果的影响

采用液氮研磨法、反复冻融法、反复冻融-溶菌酶法、溶菌酶法、超声波法、超声波-溶菌酶法对节旋藻TJCU-7的藻细胞进行破碎,用改进的CTAB法提取基因组DNA,通过凝胶电泳检测,核酸浓度、纯度测定及PCR扩增效果来评价各破壁方法的优劣。结果发现,6种方法对节旋藻均有较好的破壁效果:经反复冻融法、溶菌酶法及反复冻融-溶菌酶法破壁后所获得的DNA浓度(2 000 ng/μL)显著高于其他方法,其中液氮研磨法所得的DNA浓度最低(40 ng/μL)。除超声波法所得DNA的OD260/OD280值大于2.00,说明有部分RNA污染外,其余方法所得DNA的OD260/OD280的值均在1.90~2.05,纯度较高。经PCR扩增后均得到了2 kb的目的片段,可以满足基本的生物学实验要求。综合考虑,反复冻融法,溶菌酶法简单、快速,破壁效果好,是节旋藻DNA提取时的优先考虑方法。     

南方红豆杉枝叶总RNA的提取

文章采用改良的异硫氰酸胍法提取南方红豆杉枝叶总RNA,通过甲醛变性凝胶电泳,可见3条比较明显的rRNA条带,其中28SRNA条带的亮度大约为18SRNA的2倍,说明总RNA样品的完整性良好。紫外吸收值测定,A260/A280比值介于1.7到2.0之间,A260/A230比值大于2.0,得到较为典型的RNA吸收值,说明酚类、蛋白质和无机盐等杂质已排除。此方法简便易行,能得到纯度高、质量好的RNA。     

pCR-HBc-X6-βhCG CTP37 DNA疫苗的大规模提取和纯化

本文研究了DEAE-Cellulose阴离子交换树脂纯化pCR-HBc-X6-βhCG CTP37质粒DNA的方法。经研究发现纯化的质粒不含RNA和蛋白质污染;其OD260/OD280高于1.8;每2500ml发酵液可得到4.95mg的质粒DNA。     

脱油油樟叶栽培茶树菇及品质分析

为进一步扩大油樟叶渣栽培食用菌的利用范围,以菌丝长势、菌袋污染率、日均长速、产量、转化率为评价指标开展脱油油樟叶栽培茶树菇的研究,并对茶树菇品质进行分析.结果显示:脱油油樟叶72%、玉米芯10%、麸皮10%、玉米粉5%、过磷酸钙1%、碳酸钙1%、石膏粉1%为栽培茶树菇的最佳配方,其生物转化率达54.49%,菌袋污染率低于2%,菌丝生长速度为2.96 mm/d,所得茶树菇主要营养物质与市售茶树菇无显著性差异.表明脱油油樟叶用于茶树菇的栽培是可行的,且与传统配方相比,具有生产成本低、菌丝生长快、污染低的优点.     

骆驼刺叶片总RNA提取方法比较

骆驼刺具有抗寒、抗旱、耐盐和抗风沙的特性,是一种非常好的生物性抗逆研究材料.通过比较CTAB法、热硼酸法和Trizol法来提取骆驼刺叶片总RNA的效果,结果表明,Trizol试剂盒法提取的RNA纯度较高,电泳条带清晰完整,OD360/OD280比值为1.91,并将其确定为骆驼刺叶片总RNA提取的方法,反转录合成cDNA第一链,利用设计的NHX1引物,PCR扩增得到一条600～800bp的DNA条带,与报道的NHX1基因的核心序列大小基本相符,验证了提取的RNA可用于RT-PCR,为骆驼刺的抗逆性研究奠定基础.     

RNA的结构、功能及应用

RNA是广泛存在于生物体内的核糖核酸分子,中学生物学教材讲述的RNA包括3类,mRNA、tRNA和rRNA,它们均是直接参与蛋白质合成的重要角色.近年研究发现,细胞内还存在miRNA、siRNA、lncRNA和circRNA等,这些新型RNA主要通过调节基因表达参与特定的细胞生命活动.为帮助中学师生更全面地了解RNA组...     

宜宾市油樟资源空间分布特征及地形对油樟栽植的影响

为了查清宜宾市油樟资源的空间分布、分析影响油樟发展的地形因素、提供油樟种植的基础资料,采用遥感影像判读与实地调查相结合的方法,对宜宾市境内面积大于350 m2且以油樟为优势树种的林地进行了调查和统计.结果表明:截止2012年底宜宾市共有油樟林26 059.85 hm2,其中宜宾县的占66.4%,翠屏区的占33.6%,主要分布在46个乡镇,形成了以隆兴-古柏和宗场-思坡为中心的两个核心区;现有油樟以幼龄林为主,主要分布在坡度较小、光照较充足的山坡上,斑块面积普遍偏小,破碎化较严重,难以形成完整的油樟林生态系统.各个林龄段的比重和空间分布特征,显示油樟近几年由传统种植区快速向外扩张,说明油樟产业正受到越来越多的重视.     

太湖流域中华鳖不同群体线粒体基因序列比较分析

通过PCR扩增和测序技术对太湖流域的中华鳖太湖花鳖群体和太湖鳖群体的部分线粒体基因序列,包括16S rRNA、12S rRNA、细胞色素b(Cytb)和D-loop区进行比对分析研究.结果显示:中华鳖太湖花鳖群体和太湖鳖群体的16S rRNA、12S rRNA、Cytb和D-loop区部分基因序列比对相似度和遗传距离分别为97.33%,98.19%,97.34%,98.83%和0.023,0.026,0.026,0.022.结果表明:中华鳖太湖花鳖群体和太湖鳖群体亲缘关系较近,没有达到种间差异,但两者已经出现了一定程度的遗传分化,达到亚种分化水平.     

利用CTAB法提取蝴蝶兰的基因组DNA

利用CTAB法对蝴蝶兰的根、叶、花等不同部位进行基因组DNA的提取，然后分别用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的质量，结果表明，3个部位都可以获得较完整的基因组DNA，电泳条带清晰，无拖尾现象．其中根部提取的DNA纯度最高，OD260／OD280为1．6545；其次为叶，OD260／OD280为1．5351；花的DNA纯度最低，仅为1．3820．