拟南芥衰老相关突变体lsm3的鉴定和基因克隆

本研究采用叶绿素荧光成像技术,对叶衰老相关突变体进行筛选,研究使用材料为南芥T-DNA插入突变体库.表型重复后提取突变体的DNA,利用PCR技术和DNA琼脂糖凝胶电泳技术对突变体进行T-DNA插入验证.然后采用TAIL-PCR技术扩增T-DNA两翼序列,对目的条带回收测序,最后分析测序结果确定叶衰老突变体的候选基因.     

水杨酸对青稞离体叶片叶绿体色素和电导率的影响

以青稞叶片为试材,对其进行黑暗诱导衰老,检测了水杨酸处理对青稞离体叶片叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素和相对电导率的影响.结果显示,在青稞离体叶片衰老过程中,叶绿索a、叶绿素b和类胡萝卜素含量均不断下降,相对电导率升高.用800mg/L的水杨酸处理抑制了叶绿索a、叶绿素b、类胡萝卜素含量的降低,但却促使相对电导率的进一步上升.表明水杨酸对青稞离体叶片衰老可能有一定的延缓作用.     

不同叶位对植物叶片延迟发光的实验研究

利用BPCL型微弱发光测量仪测量了袋鼠花同一枝条上不同叶位的叶片超弱发光的变化;利用紫外可见分光光度计测定了与生理状态相关的过氧化物岐化酶(SOD)、叶绿素含量随叶位的变化规律.结果发现:随叶龄的增加,叶片的自身超弱发光强度和延迟发光衰减参数先增加,然后达到一个相对稳定阶段,随后又开始减弱;SOD、叶绿素的活性改变与超弱发光之间有一定的联系,叶片在生长过程中叶绿素含量逐渐降低,SOD活性随叶龄的增加是下降的.认为衰老是生物体系生理状态变化的体现,超弱发光可以作为一个整体性指标从体系内部各组成之间的相互关系上研究叶片的衰老过程及衰老机理.     

拟南芥NADPH氧化酶RBOHD羧基端倒数第三位氨基酸在其介导活性氧迸发中的重要作用（英文）

目的:解析呼吸爆发氧化酶同系物蛋白D(RBOHD)介导活性氧迸发的分子机制。创新点:首次研究RBOHD蛋白羧基端在植物体内活性氧迸发中的作用,并对其机制进行初步探究。方法:本文利用正向遗传学方法筛选得到在多种病原物相关分子模式(PAMP)处理后活性氧不迸发的突变体delt。然后结合图位克隆和全基因测序技术,发现DELT1编码了RBOHD蛋白。DELT1-2在RBOHD羧基端倒数第三位谷氨酸位置发生了突变。深入分析发现,谷氨酸的突变不影响DELT1-2表达、蛋白定位和互作等功能,但会导致植物不响应PAMP诱导的气孔关闭。结论:RBOHD羧基端倒数第三位谷氨酸对其功能发挥起着决定作用。     

SlYABBY2b基因对番茄果实心室数和内源赤霉素含量的影响（英文）

目的:探讨赤霉素对SlYABBY2b基因调控番茄心室形成过程中的作用,为进一步研究番茄畸形果发生机理提供了理论基础。创新点:首次明确了SlYABBY2b基因与赤霉素的关系,且筛选出SlYABBY2b调控赤霉素合成的关键基因方法:利用Gateway技术法构建SlYABBY2b基因超表达和沉默载体,并通过农杆菌介导转化法获得转基因植株。用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测转基因植株中赤霉素的含量,用实时荧光定量分析(qRT-PCR)赤霉素突变体中SlYABBY2b基因表达水平和SlYABBY2b转基因植株中赤霉素相关基因的转录水平。结论:本实验中赤霉素突变体中SlYABBY2b基因表达量显示,赤霉素短缺导致番茄植株体内SlYABBY2b基因的升高。ELISA实验结果显示,SlYABBY2b基因也能够反馈调控赤霉素的合成。qRT-PCR结果显示,SlYABBY2b基因抑制GA20ox1和GA3ox2基因的表达,促进GA2ox1和GA2ox5基因的表达。综上所述,研究结果明确了SlYABBY2b基因位于赤霉素信号转导的途径上,反馈调节赤霉素的合成,感受外源赤霉素的信号,从而进一步调控番茄心室的形成。     

环境条件对sua41突变体表型的影响

突变体表型分析是基因功能研究的重要组成部分,通过对突变体的分析可以预见突变序列的未知功能。本文研究了sua41突变体的表型特征和可塑性变化。结果表明,与Col-0相对照,sua41的莲座叶和茎生叶片较小,植株的茎细小,花序轴顶端的花蕾较少,在果枝上有聚合果现象;sua41突变体的早花表型与光照强度和光质无关;不同光照条件下sua41根长与野生型相比有差异;不同光质条件下sua41下胚轴长度比野生型的稍长;低温条件下sua41突变体根长比野生型的短,下胚轴长度比野生型的稍微长些。说明,SUA41基因除了调节开花时间之外,还调节茎、叶、上胚轴和根的生长以及花芽的形成。SUA41基因是一个多功能的基因。     

核酸、基因与核酸疗法

核酸是基因的本体,又是基因的营养源。基因是贮存、传递遗传信息的DNA功能片段。基因受损,可导致细胞老化,疾病丛生,加速肌体衰老。科学补充外源核酸,有利于受损基因修复,维持细胞正常代谢水平,阻抑细胞老化,减少疾病发生,延缓衰老进程。     

细胞分裂素类物质对植物叶片衰老的延缓作用及其分子遗传研究

本文结合植物叶片衰老的激素理论,自由基学说和基因调控理论,综述了细胞分裂素类物质对植物叶片衰老的延缓作用及其抗衰老基因植物研究。     

亚精胺对小麦离体叶片衰老过程中叶绿素、核酸和核酸酶的影响

小麦离体叶片衰老过程中,叶绿素、核酸含量随衰老而降低,RNase活性随衰老而升高.亚精胺(Spd)能显著抑制叶绿素、核酸含量的降低,并阻止RNase活性的升高,其中Spd对RNA的作用早期十分明显,阻止了0～12小时的降低高峰的出现,但对DNA含量的降低在后期有一定的促进作用.用Spd、CHM、5—Fu、c_a~(2 )单独或配合处理表明,Spd可能对RNA含量和RNase活性不存在转录水平的调节,可能主要是通,过“电荷效应”而抑制RNA含量降低;而对RNase一方面可能抑制其合成,另一方面也可能由于其“电荷效应”抑制其活性的升高.     

猕猴桃果肉中叶绿素的提取与分离

基于猕猴桃果肉与植物叶片组织的差异,在参考国外有关文献的基础上,对高中教材中叶绿体色素提取方法作出改进,并通过薄层层析和纸层析的方法验证了猕猴桃中存在叶绿素。还结合国内外的研究文献,对猕猴桃果肉中叶绿素的合成进行了分析讨论。     

大气污染对城市绿化植物叶片叶绿素含量的影响

南阳市大气对该市5种常见城市绿化植物叶片叶绿素(a、b)含量比例(Ca/Cb)以及叶片叶绿素总含量(Ct)有影响。通过研究发现:污染严重的南阳卷烟厂区域植物叶绿素Ca/Cb值相对较高,叶绿素总含量(Ct)相对较低;无污染的对照区域(南阳师范学院院内绿化区)植物叶片叶绿素Ca/Cb值相对较低,叶片叶绿素总含量(Ct)相对较高。通过数据分析,进一步测出了女贞、大叶黄杨、月季具有显著抗大气污染能力,并比较了5种常见城市绿化植物之间抗大气污染能力的大小:女贞>大叶黄杨>月季>金叶女贞>三叶草。     

关于叶绿素提取实验方法的改进

作者对叶绿素提取实验进行了改进。分别用洋槐、观赏碧桃、菠菜和芹菜叶片作为实验材料,用丙酮、乙醇作为提取溶剂对叶绿素进行提取并做含量测定。结果表明,四种材料中,洋槐叶片叶绿素含量最高。丙酮和乙醇对提取叶绿素含量影响差异不大,所以可以用乙醇代替丙酮提取叶绿素,既经济又无刺激性。     

三唑酮对小麦离体叶片叶绿素和蛋白质含量及过氧化物酶活性的影响

用25mg·L-1的三唑酮溶液处理小麦离体叶片,可抑制叶绿素、蛋白质含量的下降,延缓过氧化物酶(POD)活性的升高,表明三唑酮可以延缓小麦离体叶片衰老。     

L-ficolin突变体原核表达载体的构建及表达产物的鉴定

目的构建L-ficolin突变体的原核表达载体，为研究L-ficolin的糖结合位点奠定基础。方法设计L-ficolin突变体基因上、下游引物，分别引入EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点。以插入L—ficolin M2（Val144Phe）和M6（Glu 307Asp）点突变的完整编码区基因的质粒pCDNA3-L-ficolin为模板，通过PCR扩增获得突变体的基因片段，将其克隆入原核表达载体pGEX—KG．然后通过酶切和序列测定对其进行鉴定；将此表达载体转化入表达菌BL21（DE3）pLvSs诱导表达。并采用SDS—PAGE对表达产物进行鉴定。结果经酶切及序列分析表明．成功地构建了重组原核表达载体pGEX-KG—L—ficolin—M2、pGEX-KG-L-ficolin—M6，SDS—PAGE显示目的蛋白大量表达。结论L—ficolin突变体融合蛋白可以在大肠杆菌中大量表达。为研究L-ficolin的糖结合位点打下基础。     

重金属铅对小麦叶绿素合成的影响

本文对完全营养液培养的小麦幼苗进行不同浓度的重金属铅处理,并研究了处理5d后小麦生长及叶片中叶绿素含量的变化。结果表明:小麦幼苗在高于500mg/L的铅胁迫下,出现叶片失绿症。随着铅处理浓度的增加,小麦叶绿素合成呈现先促进后抑制的趋势。在铅浓度较低(≤200mg/L)时,叶绿素含量随处理浓度的上升而递增,但当铅浓度高于300mg/L时,叶绿素含量随处理浓度的上升而递减。对叶绿素a/b值而言,随铅处理浓度的上升呈有规律的持续下降。     

三唑酮对蚕豆离体叶片中三种抗氧化酶活性的影响

以蚕豆叶片为试材,对其进行黑暗诱导衰老,研究了三唑酮处理对蚕豆离体叶片过氧化物酶（POD）、超氧化歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性的影响．结果显示,在蚕豆离体叶片衰老过程中,POD活性不断升高,特别是在48h之前十分明显,SOD,CAT活性在48h之前上升,然后有所下降;经三唑酮处理蚕豆离体叶片,三种抗氧化酶活性在处理的前期上升速率明显加快,而且维持上升的时间更长．在整过处理过程中三种抗氧化酶活性均远高于对照组．表明三唑酮处理蚕豆离体叶片后,可以通过提高并维持三种抗氧化酶的活性,增强蚕豆叶片抗氧化能力,进而延缓其衰老进程．     

AL落叶剂对悬铃木落叶生理的促进作用

在秋季用AL落叶剂处理悬铃木,十天以后开始测定。测定结果表明:叶片的含水率下降,叶绿素含量降低,电解质外渗率增加,叶片萎缩、衰老,集中在十几天内脱落。     

氧对植物的胁迫

氧对植物的胁迫作用是对活性氧而言.植物体内可通过各种途径产生活性氧,这些活性氧的相互转化和协同作用会对植物产生伤害,并启动和促进衰老进程.在正常情况下,植物对活性氧的毒害具有各种自生的保护措施,但在逆境或进入衰老阶段,植物的保护机能降低,而受到伤害.     

氧对植物的胁迫

氧对植物的胁迫作用是对活性氧而言。植物体内可通过各种途径产生活性氧，这些活性氧的相互转化和协同作用会对植物产生伤害，并启动和促进衰老进程。在正常情况下，植物对活性氧的毒害具有各种自生的保护措施，但在逆境或进入衰老阶段，植物的保护机能降低，而受到伤害。     

坛紫菜突变体的品质性状分析

以福建省的栽培坛紫菜6、0Co-γ射线辐照的突变体为材料,分析研究了它们的蛋白质、叶绿素、藻胆蛋白、游离氨基酸含量之间的差异。分析结果表明:在相同的海况条件下,突变品系NY3显著高于当地的栽培品系GL1和LPZ;所有的突变体的叶绿素含量低于栽培坛紫菜GL1;3个突变体的总藻胆蛋白含量高于栽培坛紫菜,2个突变体的游离氨基酸含量高于栽培坛紫菜。研究结果说明坛紫菜突变体之间种质的差异是很大的,这种种质之间的差异为坛紫菜优良品种选育提供了丰富的资源。