甲胎蛋白(AFP)胶体金检测试纸条的研制

目的:研制一种简便、快速、灵敏的检测血清中甲胎蛋白(AFP)的试剂.方法:采用胶体金免疫层析法,用胶体金标记AFP单克隆抗体,用另一株AFP单抗包被硝酸纤维素膜,制成AFP胶体金检测试纸条.结果:用国家标准品进行检测,该试剂灵敏度达到20ng/ml;对157份血清样本进行检测,结果与ELISA法相比总符合率达99%.结论:AFP胶体金检测试纸条简便快速、结果准确,能满足临床检测需要.     

一种快速检测水稻条纹病毒的胶体金免疫层析试纸条的研制（英文）

目的:制备一种检测水稻植物和传毒介体灰飞虱中水稻条纹病毒(RSV)的胶体金免疫层析试纸条,为水稻条纹叶枯病的田间调查和检测以及预测预警提供快速、实用的检测试剂。创新点:利用制备的RSV单克隆抗体,首次制备了能在5～10 min内快速、准确、灵敏、特异地检测水稻植物和灰飞虱体内RSV的胶体金免疫层析试纸条。方法:以差速离心方法提纯的RSV病毒粒子作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了高度特异和灵敏的RSV单克隆抗体。采用柠檬酸钠还原氯金酸的方法制备胶体金并标记一个RSV单克隆抗体,另一个RSV单克隆抗体和羊抗鼠抗体分别包被到硝酸纤维素膜的检测线和质控线,将吸水滤纸制成的样品垫、RSV免疫胶体金垫、结合有RSV单抗和羊抗鼠抗体的硝酸纤维素膜和吸水纸依次粘贴到聚氯乙烯(PVC)胶板上研制检测水稻植物和传毒介体灰飞虱中RSV的胶体金免疫层析试纸条。对田间样品进行RSV检测,分析试纸条检测RSV的有效性。结论:利用杂交瘤技术获得了2株RSV单克隆抗体(16E6和11C1),胶体金标记16E6单克隆抗体包被在聚酯膜制成的结合垫上,以11C1单克隆抗体和羊抗鼠抗体分别包被到硝酸纤维素膜的检测线和质控线,制成能在5～10 min内快速、特异、灵敏、准确地检测田间水稻及单头灰飞虱样品中RSV的胶体金免疫层析试纸条。试纸条检测感染RSV的水稻植株和灰飞虱呈阳性反应,而检测健康水稻和感染其它5种常见水稻病毒的植株及其传毒介体呈阴性反应,且试纸条检测RSV感染水稻植物组织的灵敏度达到1:20 480倍稀释(w/v, g/mL),检测携带RSV单头灰飞虱的灵敏度达到1:2560倍稀释(单头灰飞虱/μL)。田间样品检测结果发现,试纸条检测结果与反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的检测结果一致,表明制备的试纸条可有效地用于田间RSV的检测,从而为水稻条纹叶枯病的诊断、监测预警、抗病育种、流行病学研究及科学防治提供技术和物质支撑。     

胶体金免疫层析法检测高含量尿HCG呈假阴性1例分析

胶体金标记免疫层析法测定尿绒毛膜促性腺激素(ＨＣＧ)已广泛应用于检查早孕及其它引起ＨＣＧ增高的疾病 ,具有简便、快速、准确性高、试剂稳定等优点 ,但在某些情况下 ,如葡萄胎、恶性葡萄胎等 ,尿中ＨＣＧ含量过高 ,则有时会产生假阴性结果。本文用博赛牌胶体金免疫层析试条测试一例葡萄胎患者尿液ＨＣＧ ,结果呈假阴性 ,报告如下。1　材料与方法1.1　尿标本来源于张家口医学院一附院一位葡萄胎患者 ,第一次尿标本为晨尿 ,ＨＣＧ用胶体金免疫层析法试纸条半定量为 2 5 0 ,0 0 0～ 5 0 0 ,0 0 0ＩＵ/Ｌ ,第二次尿标本为饮水后的随机尿 ,Ｈ…     

赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮二联定量胶体金免疫层析试纸条的制备及应用（英文）

目的:优化建立二联胶体金免疫层析试纸条,实现对玉米、面粉和饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的同时快速定量检测。创新点:采用纳米金颗粒标记真菌毒素单克隆抗体,基于竞争反应模式,通过对金颗粒尺寸、免疫层析相关组成材料及缓冲液配方的系列优化,同时借助手持式信号读取装备,实现对谷物和饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的同时定量检测。该方法简单、快速且成本低,与液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)一致性良好,便于基层单位的推广使用。方法:采用柠檬酸钠还原法制备纳米金颗粒并标记获得金标抗体。通过在基于竞争反应的免疫层析检测体系中,同时设置两条检测线(T1、T2)以实现两种毒素的同时检测,最终采用金标信号读数仪实现定量检测。结论:制备的二联定量胶体金试纸条对赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的检测限分别为0.32和0.58 ng/ml(图5),在玉米、小麦和饲料样本中的加标回收率为77.3%～106.3%,且变异系数均小于15%(表2)。制备的二联定量胶体金免疫层析试纸条和LC-MS/MS对玉米、小麦和饲料等天然样本中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的定量检测结果相关性较好(表3和图7),具有较好的应用价值。     

鸡白痢沙门氏菌胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制及初步应用

为了建立一种适合基层现场的鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)抗体检测方法,以S.pullorum的基因组为模板,利用PCR方法扩增inv A基因并进行原核表达后,用Ni-NTA纯化inv A融合蛋白,Western-blot和ELISA进行分析;采用30 nm的胶体金溶液标记山羊抗鸡Ig Y,并对金标抗体的质量浓度和p H值进行优化;在NC膜上分别包被inv A融合蛋白和鸡Ig Y作为检测线和质控线,评估其特异性、灵敏性和稳定性.用该方法对临床的195份血清进行检测,平板凝集试验验证其准确性.结果表明:构建的inv A重组蛋白质粒在大肠杆菌BL21中成功高效表达,获得的蛋白纯度较高,经Western-blot和ELISA方法证实具有良好的反应原性.该试纸条最佳胶体金标记的p H值为7.6,抗体质量浓度为1.3 mg/m L,方法的灵敏性与平板凝集试验的灵敏性一致,与其他病原菌无交叉反应.对195份临床样本进行检测,其结果与平板凝集试验的符合率为96.43%.研究建立的S.pullorum胶体金免疫层析检测试纸条具有方便、快捷、安全和灵敏度高等优势,可用于S.pullorum抗体的早期检测和流行病学筛查.     

162例恶性肿瘤病人AFP、CEA、CA-50、AIF检测结果分析

<正> 恶性肿瘤是一直危害人类健康的主要疾病之一,随着杂交瘤单克隆抗体技术的迅速发展,肿瘤标志物实验诊断方法越来越多,我院近期主要用放射免疫方法检测三种肿瘤标志物AFP(甲胎蛋白)CEA(癌胚抗原)CA-50(糖链蛋白-50)和AIF(酸性铁蛋白),通过检测、临床观察,大大提高了对恶性肿瘤的诊断率,现将162例恶性肿瘤病人的测定结果分析报告如下:     

电化学发光免疫传感器检测癌胚抗原

以鲁米诺还原纳米银作为信号分子标记癌胚抗原（CEA）,结合具有良好生物相容性的纳米金,固定癌胚抗原抗体于金电极上,成功建立了用于检测人血清中CEA含量的电化学发光（ECL）免疫分析方法.利用该方法可在浓度为0.1-50ng· mL-1的线性范围内稳定监测人血清中CEA的含量,检测限为0.05ng·mL-1.将该电化学发光传感器应用于健康志愿者的血清中进行CEA的检测,结果令人满意.相对标准偏差小于7.2％,平均回收率为97.2-102.9％,具有良好的稳定性和重现性.     

脑脊液中单纯疱疹病毒抗原检测和临床评价

本文采用ELISA双单克隆抗体夹心法检测14份拟诊为中枢神经系统病毒感染患者脑脊液(CSF)标本中单纯疱疹病毒(HSV)抗原。结果表明:有8份标本出现阳性,即约57％可测出HSV抗原。其中7份标本结果与间接ELISA检测CSF和血清HSV-Ⅰ～Ⅱ型抗体结果比较,两者有较好的一致性。提示ELISA双单克隆抗体夹心法检测临床标本中HSV抗原,具有简便、特异、敏感等优点,4h内即能获得检测结果,适用于HSV性脑炎(HSE)的早期诊断。     

食品中毒性成分快速检测试纸的研究进展

食品安全目前已经成为我国主要的社会热点问题之一,迫切需要准确和快速的食品内毒性成分的检测技术.检测试纸具有价格低廉、操作简便、灵敏快速等特点,适用于现场和基层化验室对食品内毒性成分的快速检测.本论文简介和评述了近些年国内报道的食品内毒性成分快速检测试纸的研究和应用进展.     

消化道恶性肿瘤雌孕激素受体与癌胚抗原的相关性研究

利用酶联素和组化法和ABC免疫组化法进行88例消化道恶性肿瘤的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和癌胚抗原(CEA)的相关性研究。结果表明:(1)ER、PR水平与组织学分级呈负相关性。(2)低分化腺癌CEA阳性率最高,且淋巴结转移者CEA均为阳性,提示CEA与肿瘤的恶性度呈正相关。因此性激素受体和CEA提供了肿瘤组织不同的生物学信息,同时检测ER、PR及CEA水平对分泌治疗,手术范围及判断预后更有价值。     

相邻试剂之间污染对检验结果的影响

目的:为了发现项目间试剂污染造成检验结果的影响.方法:通过血糖和血清磷同时检测为一组,血清磷单独测定为一组,连续测定20次,结果进行比较.结论:两组结果具有显著性差异,既上一检测项目的试剂对下一检测项目的测定有影响.     

梅毒螺旋体抗体诊断试剂的临床应用

目的:同时用评价试剂和参比试剂检测436例血清样本,探讨评价试剂与参比试剂检测结果的符合率.方法:评价试剂采用化学发光法,参比试剂采用双抗原夹心酶联免疫吸附试验;并通过卡方检验来判断两试剂盒间有无显著差异.结果:评价试剂和参比试剂阳性符合率为98.25%,阴性符合率为99.47%.两种试剂通过卡方检验比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:评价试剂与参比试剂的检测结果具有很好的一致性,评价试剂可以用于梅毒感染的辅助诊断.     

酚酞遇氢氧化钠溶液变色的教学案例

正一、背景本节内容是九年级科学(上)第一章探索物质的变化中碱与盐的性质学生实验的内容。初步学习了第一章中碱的化学特性,并结合已学习的用实验现象确定物质性质的检测方法(如用试剂、试纸检测颜色变化,化学反应中产生的气体等),在实验室中进行碱的     

优化多重PCR检测Duchenne muscular dystrophy基因外显

目的:介绍一种快速简便地优化多重PCR检测DMD基因外显子缺失的方法及详细步骤.方法:采2ml外周血,用0.2%氯化钠处理收集白细胞,再用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA,用优化的多重PCR法直接检测DMD基因外显子的缺失.结果:用该方法检测DMD基因外显子缺失结果准确清晰.结论:用优化的多重PCR技术可以直接检测DMD基因外显子缺失,跟通常使用的9对引物一步法相比,具有经济、快速、简便等特点.     

磁微粒化学发光法与胶体金法在临床SARS-CoV-2抗体检测中的性能比较

目的:探讨磁微粒化学发光法(CLIA)与胶体金法检测新型冠状病毒抗体IgM、IgG的差异。方法:分别用CLIA与胶体金法对新型冠状病毒IgM、IgG抗体进行测定,分析两种检测方法检测新型冠状病毒抗体的敏感性以及最低检测限值。结果:CLIA检测新型冠状病毒IgM、IgG的S/CO值小于1时,胶体金法检测均为阴性;S/CO值大于10时,胶体金法检测IgM的阳性率为100%、检测IgG的阳性率为99.14%;S/CO值大于1小于10时,胶体金法检测新型冠状病毒IgM与IgG的阳性率分别为0.87%与1.56%。结论:CLIA法检测新型冠状病毒IgM、IgG的检出率高于胶体金法;CLIA检测新型冠状病毒IgM与IgG最低检测的S/CO值≥1判定为阳性,而S/CO值大于10时,胶体金法显示阳性,CLIA的阳性阈值更低。     

浅议pH值相同的强酸与弱酸的鉴别

1990年高考化学试卷第38题:有两瓶 pH=2的酸溶液,一瓶是强酸,一瓶是弱酸。现只有石蕊试液、酚酞试液、pH 试纸和蒸馏水,而没有其它试剂。简述如何用最简便的实验方法来判别哪瓶是强酸:本题意在考查考生对强、弱酸在水中电离程度不同和弱酸的电离度随浓度变化改变的理解,以及运用指示剂去检测溶液酸、碱性强弱的能力。     

荧光定量PCR对微小RNA的检测及应用

目的:建立一种定量、简单、快速、敏感的微小RNA(miRNA,miR)检测方法,并用其观察一些病理状态下有关miRNA的变化.方法:通过特殊设计的茎环结构的反转录引物,对miRNA进行反转录,然后用相应miRNA的正反向引物对该miRNA进行定量检测,观察重复性和特异性.用此法检测了人巨细胞病毒(HCMV)对滋养细胞(HPT-8)细胞内miR-513表达水平的影响,也检测了结直肠癌组织miR-145水平.结果:用该法扩增miRNA特异性强,结果重复性好,该法检测到HCMV感染对miR-513表达的梯度效应.也发现癌组织和正常组织间miR-145的表达有明显的差异.结论:用荧光定量PCR可以对微小RNA快速有效的检测,在临床工作中可得到很好的应用.     

56例进展期胃癌患者SIMA、CEA、CA50、CA19－9联合检测评价

目的对56例进展期胃癌患者进行4种血清肿瘤标记物联合检测评价,探索优选检测项目,提高诊断的灵敏度、准确性.方法应用酶免双抗夹心法测定SIMA和应用放射免疫方法测定CEA、CA50、CA19-9,共测定正常对照组33例健康成人和进展期胃癌56例.结果胃癌组4种血清肿瘤标记物均与正常对照组差异有显著性意义(p＜0.05),其中正常对照组SIMA为(8.09±1.94)×103u/L,胃癌组SIMA为(90.47±28.51)×103u/L.SIMA的灵敏度和准确性高于其它3种,与CEA灵敏度相比,差异无显著意义(p＞0.05),SIMA与CEA组合灵敏度升高至81.76%,高于单项灵敏度,高于其它组合灵敏度,差异有显著意义(p＜0.05).结论SIMA是一种敏感的新型血清肿瘤标记物,SIMA和CEA可以作为联合检测胃癌的首选标志.     

反应时间对BCG法血清白蛋白测定结果的影响

关于血清白蛋白测定,WHO/86.3文献和全国临床检验操作规程(卫生部医政司,1991)皆推荐溴甲酚绿(BCG)法。但二者对BCG试剂与血清的反应时间要求不同。前者强调加试剂后立即比色测定,而后者则指出加试剂后室温下放置10min比色。我们用该法经不同反应时间比色测定20例健康青年(19～22岁)的血清和白蛋白溶液的白蛋白含量,结果如下: 1、白蛋白溶液,加BCG试剂后立即比色与室温(18℃～23℃)下反应10～60min(分6个时间组)比色的测定结果一致(P>0.05)。     

癌胚抗原和核仁组成区蛋白在胃活检良、恶性病变中表达

为探讨癌胚抗原(CEA)和核仁组成区蛋白(AgNOR)在胃粘膜活检中对良、恶性病变的诊断意义,我们取105例标本进行观察。结果表明:CEA和AgNOR计数在单纯性胃炎、肠上皮化生、异型增生和胃癌中表达有关系,其阳性率和计数依次增高。CEA、AgNOR表达有显著性差异。因此,CEA、AgNOR对癌和癌前病变的诊断和治疗具有一定参考意义。