药用植物虎杖毛状根DNA提取方法研究

采用高盐低pH法、改良SDS法、CTAB法、改良CTAB法提取发根农杆菌ATCC11325感染蓼科多年生药用植物虎杖（Polygonum cuspidatum Sieb．et Zucc．）叶片产生毛状根的基因组DNA,并进行了电泳分析、含量检测及特异PCR扩增．结果表明：改良CTAB法解决了虎杖富合多酚、多糖等类物质难以提取高质量DNA的问题,提取的DNA质量较好,纯度较高,能满足进一步的实验要求．     

两种提取三色堇DNA方法的比较

以三色堇叶片为材料,分别采用SDS方法和植物基因组DNA提取试剂盒法对三色堇叶片DNA进行提取,采用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的质量浓度和质量.结果表明:采用SDS方法提取的DNA质量浓度高,但纯度低,耗时长;试剂盒法获得的DNA纯度高,且该方法操作方便,耗时短,但费用较高.PCR扩增结果显示两种方法所提取的DNA均能满足基因扩增和分子标记检测的需要.     

珙桐干种子总DNA提取方法的比较

以珙桐干种子为材料,采用简易CTAB法、SDS法、高盐沉淀法与高盐低pH值法分别对珙桐干种子进行了总DNA提取效果的比较分析。结果表明,四种方法均能有效地提取较高质量的珙桐种子DNA,其中SDS法效果最好,获得的DNA纯度最高,产量最大,CTAB法次之,高盐沉淀与高盐低pH值法获得DNA质量相对较低,低于其它两种方法。获得最佳的DNA提取方法,可为PCR扩增,引物设计,筛选珙桐种子中的相关基因奠定基础。     

四种药用蕨类DNA提取的比较研究

以四种药用蕨类的叶片为材料,采用改进的CTAB法、SDS法分别对四种蕨类进行了总DNA提取效果的比较分析,结果表明,通过实验获得最佳的DNA提取方法,为PCR扩增,引物设计,为筛选四种药用蕨类中的活性成份的相关基因奠定理论和实践基础。两种方法均能有效的提取较高质量的DNA,其中CTAB法效果最好,获得的DNA纯度较高、产量较大;SDS法提取的量次之且多糖等杂质含量更多。     

重组质粒pRSET DNA提取方法的探究

通过两种从大肠杆菌中提取重组质粒pRSETDNA不同方法的比较,寻找提取重组质粒pRSET DNA的切实可行的方法.将含有目的质粒的菌株分别采用SDS碱裂解法和煮沸法进行质粒DNA小量提取,采用DU800核酸蛋白分析仪测定质粒DNA的产量及纯度.结果SDS碱裂解法获得质粒DNA产量为5.61 μg/ml菌液,A260/280=1.95;煮沸法获得质粒DNA产量为4.36μg/ml菌液,A260/280=1.78.与煮沸法相比,SDS碱裂解法获得质粒产量更多,纯度更高,更适合分子生物学常规实验的要求.     

几种药用植物基因组DNA提取方法研究

采用改良2×CTAB法和改良SDS法提取富含多糖和次生代谢物质的几种药用植物不同器官基因组DNA,并用紫外分光光度计分析,凝胶电泳和PCR扩增进行鉴定。结果表明:改良2×CTAB法和改良SDS法均能有效去除不同药用植物材料中的蛋白质、多糖、酚类及其他次生代谢物质,获得较高质量基因组DNA。但与改良SDS法相比,改良2×CTAB法提取的基因组DNA质量更好。     

三叶木通RAPD最佳反应体系的研究

RAPD技术是一种新的分子标记技术,DNA质量是保证RAPD分析成功的关键。为获得高质量的木通属植物基因组DNA,本文采用SDS法、改良CTAB法、高盐低pH值法提取三叶木通总DNA。结果表明,高盐低pH值法不适用于木通属植物DNA的提取;改良CTAB法是合适的DNA提取方法,它们获得DNA模板纯度高、质量好,可直接用于RAPD分析。同时,对RAPD反应条件中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立适合木通属植物RAPD分析应用的体系,其组成为:反应液总体积为25μL,2.5μL 10×PCR缓冲液、0.16 mmol/L dNTPs2、.0 mmol/L Mg2 、0.64μmol/L引物、1 U/μL Taq酶4、0 ng/25μLDNA模板。PCR循环体系为:94℃,4 min-[-94℃,30 s-37℃,90 s-72℃,60 s-]-72℃,5 min,40个循环。     

植物基因组DNA提取——本科分子生物学实验方法改进

介绍在教学实验中分别采用SDS法和CTAB法对辣椒基因DNA进行提取的过程,结果表明,改进的CTAB法提取的DNA含量较高且纯度较好;同时发现在电泳检测过程中,恒定电流检测图像结果中呈现的基因组DNA条带要比恒定电压检测结果平整。     

萤火虫萤光素酶基因转化花叶芋及表达的研究

将萤火虫萤光素酶基因重组到质粒pBR325中,通过“三亲交配”和同源重组,将萤光素酶基因整合到Ti质粒pGV3850:1103。通过改良的叶盘转化法,用萤光素酶基因转化单子叶植物花叶芋,获得转基因植株。对再生植株的胭脂碱测定、新霉素磷酸转移酶分析、DNA点杂交、萤光素酶基因活性测定,证明萤光素酶基因已转化到花叶芋中并进行了表达。     

简便快捷提取大蒜总DNA的方法

目的:探讨简便快速而高效的提取大蒜总DNA的方法。方法:采用十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)法、简化CTAB法、改良十二烷基硫酸钠(SDS)法分别以大蒜的根、茎、叶为材料提取细胞总DNA,并进行紫外分光检测和琼脂糖凝胶电泳分析。结果:三种方法的提取率和纯度明显不同:CTAB法>SDS法>简化CTAB法,三种材料组织中以茎的提取效果最佳。结论:采用CTAB法或SDS法从茎中提取大蒜总DNA可获得产率与纯度符合要求的DNA样品。     

针禾属植物羽毛针禾基因组DNA提取方法的研究

传统的CTAB DNA提取法步骤多.较烦琐,DNA产率低,而且由于酚、单宁、色素、多糖很难完全去除,容易影响随机扩增多态、微卫星等标记工作的效率.采用SDS裂解法提取了针禾属植物幼嫩叶片的基因组DNA,所获得的DNA可用于PCR反应.并且在针禾属植物的研究中得到了较好的结果.     

盐土中微生物总DNA的提取方法的探究

文章初步探讨了用不同DNA提取方法,对盐土中微生物总DNA的提取效果.实验结果表明,由于盐土中微生物数量较少,溶菌酶-SDS-冻融裂解法、溶菌酶-SDS-蛋白酶K-冻融裂解法均无法提取到盐土中微生物的总DNA;变性剂-SDS-高盐法和试剂盒提取法能获得DNA,但效果不佳;只有用变性剂-SDS-高盐修改法能快速、有效地提取盐土中微生物的基因组DNA.     

太白红杉DNA的提取与鉴定

文章用2XCTAB法、SDS法、一步法三种方法从含有大量多糖、酚类、醌类、萜等次生代谢产物的松科植物太白红杉中提取和纯化了基因组总DNA,并经0.6%琼脂糖凝胶电泳,紫外吸收值比值对所提DNA的产率、质量和纯度作了鉴定,为太白红杉的分子生物学研究、鉴定提供了可靠的基础。     

赤胫散中总黄酮含量的测定

以80％乙醇为提取溶剂，芦丁为标准品，用分光光度法于510nm处测定赤胫教中总黄酮含量为3．33％。     

几种苎麻园土壤微生物总DNA提取方法比较

实验设计对比了苎麻园土壤微生物总DNA6种提取方法。方法Ⅰ采用裂解酶、蛋白酶K、SDS与CTAB处理;方法Ⅱ结合利用CTAB、SDS、LDS和BME;方法Ⅲ综合采用玻璃珠、CTAB和SDS法;方法IV结合利用SDS-GITC-PEG;方法V利用尿素、SDS、LDS和BME综合处理;方法VI则利用试剂盒处理土壤。6种方法都可以提取到23kb左右的DNA片段,经过TENP和PVPP方法预处理的土壤样品,能有效去除腐殖酸等污染物,且提取得到的土壤总DNA完整性好、纯度高,不需要纯化就可用于PCR扩增。但不同方法取得的DNA的片段长度、产量和纯度存在明显差异。通过比较,改进并建立了可用于宏基因组构建的高纯度、大片段DNA的方法。