化合物2,2-二甲基环戊酮合成工艺研究

以己二酸二甲酯为原料,在甲醇钠作用下关环,然后经过硫酸二甲酯甲基化作用,再经过脱脂反应得到中间体2-甲基环戊酮,最后在硫酸二甲酯甲基化作用下得到2,2-二甲基环戊酮。在2,2-二甲基环戊酮合成过程中考察了溶剂种类、反应温度、甲基化试剂种类及用量对甲基化作用的影响,得到以甲苯为溶剂、反应温度为35℃、硫酸二甲酯为甲基化试剂、2-甲基环戊酮与硫酸二甲酯比例为1∶1的最优甲基化工艺条件。     

关于DNA甲基化对肿瘤影响的研究进展

表观遗传是指DNA序列不发生变化但基因表达却发生了可遗传的改变[1]。表观遗传学研究染色质重塑、DNA甲基化、X染色体失活、非编码IKRNA调控4个方面,其中的任何一方面异常都能引起疾病甚至癌症。各研究表明DNA甲基化和组蛋白修饰异常在多种肿瘤的发生中起着重要作用。本文以胃癌形成原因为例对DNA甲基化在肿瘤行程中的重要作用进行概述。     

DNA甲基化与肿瘤

最近的研究资料提示DNA序列的改变和Epigenetics(表遗传学或拟遗传学)的机制都参与了肿瘤的发生。DNA甲基化后核苷酸顺序未变,而基因表达受影响,异常甲基化是肿瘤发生的重要原因。笔者综合近年的有关文献对肿瘤细胞DNA甲基化形成的原因及机制作一综述。     

基于MSRF的黄海漂浮浒苔与定生浒苔的甲基化差异分析

应用甲基化敏感限制性指纹技术(MSRF),利用对DNA甲基化敏感与不敏感的限制性内切酶组合产生基因组的酶切多态性差异图谱.发现漂浮浒苔可能在BstUI位点发生了甲基化增强的现象,推测表观遗传水平上的改变可能推动了漂浮浒苔对黄海自由漂浮生活的快速适应.     

我国科学家在表观遗传研究领域取得重要进展

为什么同一个受精卵能够发育出成体的各种组织、器官,其中的细胞形态各异,功能千差万别?为什么同卵双胞胎也会有各种形态行为的差别?表观遗传学机制在其中发挥着重要的作用。表观遗传是指在没有细胞核DNA序列改变的情况时,基因功能的可逆的、可遗传的改变。表观遗传现象主要包括DNA甲基化、RNA干扰、组蛋白修饰等,表观遗传学主要研究表观遗传现象的建     

东南大学目家科技园——用于肿瘤早期诊断的DNA甲基化检测芯片

肿瘤中相关基因的甲基化状态和水平的高通量检测，以及把DNA甲基化检测应用于肿瘤早期诊断，是肿瘤DNA甲基化研究中两个十分重要的问题，目前国际上尚无很好的办法。本成果运用成熟的PCR及基因芯片技术实现对大量重要肿瘤相关基因的甲基化检测。检测内容分为两部分：1、运用基因芯片技术分析肿瘤相关基因的甲基化模式：2、运用基凼芯片技术可同时检测多个与肿瘤相关摹凼的甲基化状态。该研究成果将大大加快与肿瘤发生发展密切相关基因的甲基化研究进程，对于肿瘤的早期分子诊断技术的开发也有重要的临床意义。     

细菌先天免疫—DNA限制系统的研究进展

为抵御入侵的外源DNA,细菌进化出先天免疫机制和适应性免疫机制,前者主要由DNA限制修饰系统介导,后者由CRISPR系统介导。通常,细菌DNA限制修饰系统(I～III型)识别和降解未经修饰的DNA,同时通过甲基化修饰的方式保护其自身DNA免受降解。细菌中还存在一类IV型限制修饰系统,它仅由限制性核酸酶组成,可识别和降解外源经甲基化修饰的DNA。近年来,人们在细菌中发现一种新的DNA修饰模式——磷硫酰化,并表明IV型限制修饰系统可识别和降解经磷硫酰化修饰的DNA。在简要介绍细菌限制修饰系统的基础上,本文将重点阐述IV型限制修饰系统的特点和作用机制,结合笔者自身的研究提出开展IV型限制修饰系统研究的建议,为今后探索细菌先天免疫机制提供参考。     

上海生科院合作揭示受精卵DNA去甲基化重要机制

<正>中科院上海生命科学院徐国良、李劲松研究组与其合作者研究发现,小鼠早期胚胎中母源和父源基因组在单细胞的受精卵阶段,均会发生大规模的DNA主动和被动去甲基化,并且DNA双加氧酶Tet3介导了主动去甲基化的发生,而糖苷酶TDG并不参与该过程。研究人员利用最近发展的单细胞简并代表性甲基化测序(scRRBS)、发夹DNA甲基化测序     

又一种遗传型式

DNA的甲基化也许是一种主要的“后生遗传”机制。在发育过程中，基因活性模式(相对于基因本身而言)正是借助于这个机制由上一代细胞传递给下一代细胞的。     

肥胖调控机制合作研究获重要进展

中科院北京基因组所杨运桂研究员与美国芝加哥大学何川教授合作,发现了肥胖相关基因FTO（Fatmass and obesity-associated protein）主要作用底物是RNA中的6甲基腺嘌呤（m6A）。该研究为揭示FTO调控肥胖发生机制提供了重要线索。他们通过体外模拟生理环境下的去甲基化反应条件,将FTO的野生型和突变型蛋白分别与甲基化底物共同孵育,利用质谱和高效液相技术,对多种甲基化形式进行探索,     

2-(2-氨基噻唑-4)-Z-2-甲氧亚胺乙酸乙酯的合成

以乙酰乙酸乙酯为原料,经亚硝化、甲基化、溴代、环合等四步反应合成了2-(2-氨基噻唑-4)-Z-2-甲氧亚胺乙酸乙酯,其顺式异构体的总收率为38.2%,经实验证明,此路线是一种快捷、方便而有效的合成方法.     

基因组印迹基因及其生物学意义

基因组印迹(genomic imprniting)是指在配子或合子发生期间，来自 亲本的等位基因或染色体在发育过程中产生专一性的加工修饰，导致后代体细胞中两个亲本 来源的等位基因有不同的表达活性，为一种后生论修饰。目前在人类和小鼠中鉴定的印迹基 因已超过25个，它们具有一些共同的特点，如印迹基因分布的群集性、复制的不同步性、表 达的时空特异性、遗传的保守性及编码RNAs等。基因组印迹的分子机理与印迹基因的甲基化 尤其是CpG岛甲基化密切相关，特异性甲基化区域在印迹基因的表达中具有重要作用。基因 组印迹基因与胎儿和胎盘的生长发育及细胞增殖有关，正常印迹的改变可引起包括肿瘤在内 的多种遗传性疾病。     

解偶联蛋白2与衰老

衰老是各系统生理性衰老和病理性衰老的总和表现,两者同时存在,相互影响和促进,从而加速了衰老的进程。衰老的学说有很多,其中自由基学说现已成为重要的衰老学说。衰老组织中活性氧（ROS）增多,能量减少,代谢降低。解偶联蛋白2（UCP2）是线粒体内膜上的阳离子载体蛋白,在啮齿类动物中分布广泛,可引起质子漏,减少ROS的产生,降低细胞氧化损伤,调节能量平衡,在衰老过程中起到一个调节的作用。     

宫颈鳞状上皮癌变过程中细胞周期调节通路p14ARE-MDM2-p53作用的研究

目的 探讨细胞周期调节p14ARF-MDM2-p53通路在宫颈上皮癌变过程中的作用.方法 采用免疫组化SP法检测18例正常宫颈上皮、48例宫颈上皮内瘤变(CIN)和23例宫颈鳞状细胞癌组织p14ARF、MDM2及p53蛋白的表达.结果 p14ARF蛋白表达阳性率在正常宫颈上皮、CIN和宫颈鳞癌组分别为28%、42%和78%,宫颈鳞癌组表达较正常上皮和CIN组升高(P＜0.05);MDM2蛋白表达阳性率在正常宫颈上皮、CIN和宫颈鳞癌组分别为0%、23%和43%,CIN和宫颈鳞癌组较正常宫颈上皮表达升高(P＜0.05);p53蛋白表达阳性率在正常宫颈上皮、CIN和宫颈鳞癌组分别为6%、31%和39%,CIN及宫颈鳞癌组表达水平较正常宫颈上皮升高(P＜0.05);统计分析未发现三种蛋白的表达存在显著相关性.结论 p14ARF-MDM2-p53细胞周期调节通路与宫颈癌发生发展有关并有望用于CIN及宫颈癌的诊断.     

真核翻译起始因子eIF2在哺乳动物细胞中的磷酸化调节

真核翻译起始是一个复杂的过程,在这个过程中需要很多翻译起始因子蛋白的参与。在这些蛋白中,eIF2起着重要作用,它可以结合起始Met-tRNAi并带到核糖体上,但是eIF2需要一种鸟甘酸交换因子eIF2B的帮助,变为有活性的GTP结合状态才能结合起始Met-tRNAi。这一步是整个翻译起始的调控步,目前发现的主要的调节机制是不同途径导致的eIF2的磷酸化对eIF2B的抑制。本文主要介绍了eIF2的组成及其磷酸化调节机制。     

宫颈鳞状上皮癌变过程中细胞周期调节通路p14^ARF-MDM2-p53作用的研究

目的 探讨细胞周期调节p14ARF-MDM2-p53通路在宫颈上皮癌变过程中的作用.方法 采用免疫组化SP法检测18例正常宫颈上皮、48例宫颈上皮内瘤变(CIN)和23例宫颈鳞状细胞癌组织p14ARF、MDM2及p53蛋白的表达.结果 p14ARF蛋白表达阳性率在正常宫颈上皮、CIN和宫颈鳞癌组分别为28%、42%和78%,宫颈鳞癌组表达较正常上皮和CIN组升高(P＜0.05);MDM2蛋白表达阳性率在正常宫颈上皮、CIN和宫颈鳞癌组分别为0%、23%和43%,CIN和宫颈鳞癌组较正常宫颈上皮表达升高(P＜0.05);p53蛋白表达阳性率在正常宫颈上皮、CIN和宫颈鳞癌组分别为6%、31%和39%,CIN及宫颈鳞癌组表达水平较正常宫颈上皮升高(P＜0.05);统计分析未发现三种蛋白的表达存在显著相关性.结论 p14ARF-MDM2-p53细胞周期调节通路与宫颈癌发生发展有关并有望用于CIN及宫颈癌的诊断.     

癌症基因图谱计划甲基化数据及其分析工具

<正>随着测序技术的不断进步,为了更加深入的探究癌症产生和发展的分子机理,产生了一些针对癌症的研究计划,癌症基因图谱计划（The Cancer Genome Atlas,TCGA）便是其中之一。该计划包含了海量的数据,DNA甲基化数据是该计划中一种重要的表观遗传修饰数据。本文简要介绍了癌症基因图谱计划,阐述了癌症基因图谱计划的甲基化数据,对癌症基因图谱计划中甲基化数据的分析工具进行了说明,简述了450K甲基化数据的分析过程,以期对使用癌症基因图谱计划开展DNA甲基化的相关研究提供相应帮助和支持。     

不同提取条件对热研2号柱花草叶蛋白凝集的影响

提取热研2号柱花草叶蛋白,对叶蛋白凝集量和叶蛋白中粗蛋白含量进行测定。结果表明：提取热研2号柱花草叶蛋白的加热时间在7～9min较为适宜,提取时溶液pH值应当控制为3～4。     

N-羧甲基壳聚糖对铬离子的吸附研究

本文通过实验研究分析了N-羧甲基化壳聚糖对铬离子的吸附,并确定了吸附的最佳适宜条件。     

不同二价阳离子对T-载体生成的影响

目的载体加dT尾是基于非模板扩增特性而发展起来的,是TA克隆技术的关键步骤之一,但实际应用中加尾率不高,为此对不同二价阳离子对载体加dT尾的影响效果进行比较,以摸索高效加尾条件。方法用限制性内切酶SmaI将质粒pGEM7Zf( )消化成平末端的线性片段,借助二价阳离子和Taq DNA聚合酶的作用在线性片段3-′末端上添加dTTP,随后与Control Insert DNA连接成环状DNA,再转化进E.coli DH5α-FT。根据白色菌落所占比例来评价不同种类和浓度的二价阳离子对T-载体生成的影响。结果不同种类和浓度的二价阳离子加尾效果比较显示,含1 mmol/L Cd2 缓冲体系的加尾效果最佳;Co2 及高浓度的Cd2 容易导致DNA反应体系变得浑浊,甚至出现白色沉淀析出的现象。结论Cd2 最有助于加尾,Mn2 次之,Mg2 最差。