线粒体与细胞凋亡

细胞编程性死亡即细胞凋亡是健康个体中的一个正常过程．近年来发现细胞凋亡与线粒体的结构与功能有着密切的关系．线粒体氧化磷酸化过程中生成活性氧，使线粒体上PT孔道开放，削弱了线粒体膜两侧的质子梯度，导致ATP合成下降；同时向细胞液释放了与凋亡有关的活性物质，激活Caspases，引起细胞凋亡．     

乌药醚内酯超声提取工艺研究

目的：建立超声法制备乌药供试品的方法。方法：以乌药醚内酯作为含量控制指标,对甲醇-乙醚的比例、超声提取时间、超声提取温度进行了筛选。结果：甲醇-乙醚比例为15：85,常温超声提取30min。结论：该工艺可用于制备乌药供试品,用于测定乌药醚内酯的含量。     

线粒体相关物质与细胞凋亡

“凋亡”一词源于希腊文,意为“花瓣或树叶的枯落”,是1972年由病理学家Kerr等首先提出的一个不同于坏死的死亡概念,指由体内外因素触发细胞内预存的死亡程序而导致的程序性细胞死亡（programmed cell death,PCD）。凋亡细胞中可出现各种生化改变如内源性核酸内切酶激活、     

细胞凋亡的调控因素

细胞凋亡是细胞与生俱来的一种机制 ,是最常见的细胞生理性死亡形式。高浓度的活性氧是启动细胞凋亡的信号 ,它是在电子传给末端氧化酶之前漏出呼吸链与氧反应生成的。活性氧水平的升高使线粒体上非特异性的通透性转运孔道开放 ,于是原来位于线粒体膜间隙的某些与凋亡有关的活性物质释放到细胞液中 ,激活胱天蛋白酶 ,引起细胞凋亡。位于凋亡后期的效应因子也可被不同的凋亡前期信使分子所激活 ,而IAP蛋白则能通过直接抑制胱天蛋白酶家族蛋白的活化过程而抑制凋亡的发生。     

线粒体与细胞凋亡及临床疾病

线粒体是哺乳动物细胞内唯一含有核外遗传物质的细胞器,由于其自身的特征及其所处的环境,使线粒体DNA(mtDNA)较核DNA(nDNA)更易损伤或突变;通过线粒体外膜释放凋亡活性物质和通透性转换孔开放,可促进细胞凋亡;mtDNA的损伤和突变与人类衰老、神经退行性疾病、糖尿病及肿瘤等疾病的发生均有关系.     

细胞凋亡的调控因素

细胞凋亡是细胞与生俱来的一种机制，是最常见的细胞生理性死亡形式。高浓度的活性氧是启动细胞凋亡的信号。它是在电子传给末端氧化酶之前漏出呼吸链与氧反应生成的。活性氧水平的升高使线粒体上非特异性的通透性转运孔道开放，于是原来位于线粒体膜间隙的某些与凋亡有关的活性物质释放到细胞液中，激活胱天蛋白酶，引起细胞凋亡。位于凋亡后期的效应因子也可被不同的凋亡前期信使分子所激活，而IAP蛋白则能通过直接抑制胱天蛋白酶家族蛋白的活化过程而抑制凋亡的发生。     

AAZ2可通过靶向PDK1介导线粒体依赖的凋亡（英文）

大部分化疗药物可以促进活性氧（ROS）产生,同时ROS可以诱导细胞凋亡。本研究构建了一种有机砷化合物N-(4-(1,3,2-dithiarsinan-2-yl)phenyl)acrylamide(AAZ2),其可通过促进ROS产生诱导胃癌线粒体依赖的细胞凋亡。具体机制为AAZ2通过靶向丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)导致葡萄糖代谢改变和氧化应激,继而抑制PI3K/AKT/m TOR通路,最终激活半胱天冬酶（caspase）依赖的细胞凋亡。此外,体内实验也证实了AAZ2可以抑制胃癌移植瘤的生长。综上,在胃癌中,AAZ2可以通过靶向PDK1影响葡萄糖代谢及随后的氧化应激反应,抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路,最终诱发线粒体依赖的细胞凋亡。     

线粒体功能异常与亨廷顿舞蹈病的病理发生机制

亨廷顿舞蹈病（Huntington’s disease,HD）是一种致命的遗传性神经退行性疾病,它是由亨廷顿蛋白N-端的多聚谷氨酰胺延长造成的。该病表现为纹状体中的中型棘神经元（medium spiny neurons,MSN）逐渐丢失。HD的致病机理还不完全清楚,目前越来越多的研究结果显示线粒体在HD中发挥着重要作用。已有证据充分表明了HD细胞中线粒体的形态和结构发生了明显改变。此外,HD细胞中线粒体某些电子传递链复合物蛋白活性或蛋白表达水平的降低,以及突变亨廷顿蛋白对细胞核基因转录的影响进一步引起了线粒体功能障碍。除了线粒体形态和功能的改变,HD细胞线粒体的Ca2＋稳态也发生了紊乱,且线粒体的氧化压力水平显著升高,进而导致HD细胞线粒体基因组DNA损伤。由于线粒体在细胞凋亡过程发挥着重要作用,因此HD细胞中线粒体的这些变化揭示了线粒体异常参与了HD细胞特别是HD神经细胞的凋亡过程。本综述将集中探讨HD中线粒体的一系列异常变化,为阐明HD的发病机理和HD治疗提供一些启发。     

细胞凋亡的信号传导通路及相关因子研究进展

细胞凋亡是细胞在各种死亡信号刺激后发生的一系列大量激活的主动性细胞死亡过程.细胞凋亡的信号传导主要有两条途径:受体依赖途径(外部途径)和线粒体途径(内部途径),两条途径互相交叉;死亡受体、死亡配体和半胱氨酸蛋白酶等细胞凋亡因子在两条途径中起核心作用.     

运动诱导线粒体生物合成的分子机制研究

耐力训练不但能增加线粒体数量,也能提高线粒体池或线立体网络的功能或效率。线粒体容易损害,与核DNA相比,线粒体DNA受氧化应激和年龄的影响,易于缺失。骨骼肌细胞产生新的线粒体,维持健康,清除受损的线粒体,非常重要。骨骼肌一个最重要的适应是增强代谢的能力,提高运动成绩和健康。主要的基本机制涉及线粒体网络结构的调节,通过PGC-1α调节,生成和增加新的线粒体;通过线粒体自噬,清除受损或失调的线粒体。重构线粒体网络结构是运动诱导一个重要的适应。通过这一动力性过程,生成新的、健康的线粒体,替代老的、不健康的线粒体,增强运动后骨骼肌线粒体的数量和质量。     

细胞凋亡的研究

本文介绍了细胞凋亡的概念及生物学特征,讨论了bcl-2、c-myc、P_(53)、Fas等相关基因在细胞凋亡中的作用,细胞凋亡在医学生物学中的意义,及细胞凋亡的研究方法。     

羟基喜树碱诱导细胞凋亡的实验设计及分析

使用羟基喜树碱处理Jurkat细胞,FITC-annexin V和PI双标后利用流式细胞仪检测实验结果。结果表明:羟基喜树碱处理后,部分细胞检测到有绿色荧光标记,表明羟基喜树碱能够诱导细胞发生凋亡。     

新城疫病毒体外诱导S180细胞凋亡的实验研究

目的:探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)体外对S180肉瘤细胞(简称S180)生长有无抑制和诱导细胞凋亡作用。方法:取培养至对数生长期的S180细胞浓度为5×104/mL和1×106/mL分别接种于96孔板和50mL培养瓶中,加入不同浓度的NDV(1∶20、1∶10、1∶5)作用24h,分别用MTT法检测NDV对S180瘤细胞的生长抑制作用,荧光显微镜和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:经上述不同浓度的NDV作用24h,对S180细胞生长的抑制率依次为10%、26%、39%,各实验组吸光度值(A490)与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。荧光显微镜观察实验组培养的S180瘤细胞,出现细胞核固缩及凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳见DNA梯形条带。结论:NDV对体外培养S180细胞增殖有明显抑制作用,可诱导S180细胞凋亡。     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠胰腺β细胞凋亡的影响

目的:探讨α-硫辛酸对1型糖尿病大鼠胰腺β细胞凋亡的作用机制。方法:20只雄性Wistar大鼠制作1型糖尿病模型后随机分为α-硫辛酸组和糖尿病组,α-硫辛酸组腹腔注射α-硫辛酸50 mg/kg,连续4周,糖尿病组大鼠腹腔注射同体积的生理盐水。每周检测各组大鼠空腹血糖和胰岛素水平,Western blot检测胰腺组织中Caspase-3和Bcl-2的含量。另取10只雄性Wistar大鼠作为正常对照。结果:4周后α-硫辛酸组大鼠空腹血糖显著低于糖尿病组(P&lt;0.05),但胰岛素值逐渐升高超过糖尿病组(P&lt;0.05)。胰腺β细胞中Caspase-3的表达显著低于糖尿病组(P&lt;0.05),Bcl-2的表达则显著高于糖尿病组(P&lt;0.05)。结论:α-硫辛酸可能通过线粒体途径减少β细胞凋亡而发挥保护作用。     

外源性氧化应激诱导的线粒体超氧阴离子决定肿瘤细胞命运:一项基于单个细胞的研究（英文）

目的:通过细胞外过氧化氢(H_2O_2)的刺激建立单个人肺癌SPC-A-1细胞的氧化压力模型。创新点:氧自由基(ROS)涉及多种生物现象,包括有益和有害两个方面。ROS的定量检测和反应网络的评估结果令人期待。但ROS半衰期很短且反应过程很快,因此,我们通过多种手段克服了检测和评估的困难。方法:利用改进的微流控和成像技术测定ROS水平,构建氧反应网络。通过调控线粒体胞浆Ca²⁺水平、线粒体Ca²⁺摄取、细胞内ROS自扩增以及内在凋亡途径,确定线粒体在外源氧化压力模式中扮演的角色。结论:研究结果表明1 mmol/L H_2O_2引起细胞O_2^·-水平的快速增加,从而导致细胞氧化能力增加和还原能力降低。此外,研究还证实了内质网中储存的Ca²⁺是H_2O_2诱导的线粒体Ca²⁺爆发的主要来源。外源氧化压力反应涉及细胞器间Ca²⁺信号的传递、ROS自身扩增、线粒体功能紊乱和半胱天冬酶依赖性凋亡途径。线粒体在外源性氧化应激影响细胞命运方面发挥着关键作用。     

NDV感染体外诱导胃癌细胞BGC-823的凋亡

目的 :研究新城疫病毒在体外抗胃癌细胞活性及其与细胞凋亡的关系。方法 :应用倒置显微镜观察细胞形态、MTT法测NDV在体外对BGC - 82 3的抑制和杀伤作用 ,同时用流式细胞术检测胃癌细胞凋亡情况及细胞分裂周期各时象的变化。结果 :NDV在体外可使BGC - 82 3胃癌细胞形成明显的细胞病变效应、细胞生长抑制及细胞凋亡 ,且细胞凋亡率与感染时间呈正相关。G2、S期细胞减少 ,增殖指数 (PI)降低 ,与阴性对照组比较有显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 :NDV具有显著的抗BGC - 82 3胃癌细胞活性。     

糖皮质激素诱导鸡外周血淋巴细胞凋亡的研究

以糖皮质激素（GC）制剂——地塞米松（Dex）体外孵育鸡外周血淋巴细胞（PBL），通过AO-EB染色，基因组DNA琼脂糖凝胶电泳和细胞超微结构观察研究外源性GC对PBL发生凋亡的影响。结果显示鸡PBL于1μmol/L和10μmol/LDex孵育6h和12h后，其基因组DNA均发生180bp及其整数倍的“阶梯状”断裂，细胞凋亡指数从孵育0h的1.4%增加到6h的14.0%和19.1%，12h的21.1%和29.5%，坏死指数从0h的5.8%增加到6h的11.7%和24.7%，12h的25.3%和36.5%。超微结构观察，Dex处理后PBL核染色质浓缩呈“新月体”状及凋亡小体的形成等变化。     

肺康饮含药血清诱导肺癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨肺康饮含药血清对人肺癌细胞(NC-H446)的作用。方法:采用血清药理学方法,以细胞增殖抑制率及凋亡率为观察指标,对实验结果进行分析。结果:肺康饮含药血清培养24h、48h,均对NC-H446细胞株增殖具有抑制作用,且对NC-H446细胞株增殖的抑制作用具有一定的量效及时效关系,实验组与对照组间差异有统计学意义(P<0.01)。各实验组含药血清均可诱导NC-H446细胞株发生凋亡,且该作用具有一定的量效及时效关系,实验组与对照组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:肺康饮含药血清可明显抑制NC-H446细胞株的增殖,抑制作用具有一定的量效及时效关系。肺康饮含药血清也可诱导NC-H446细胞株发生凋亡,作用具有一定的量效及时效关系。     

大银鱼线粒体DNA细胞色素b序列的研究

以大银鱼的肌肉组织为材料,采用苯酚-氯仿法提取大银鱼 DNA,然后将大银鱼线粒体 DNA 细胞色素 b 进行了 PCR 扩增及其序列测定。结果表明,大银鱼线粒体细胞色素 b 全序列长度为1141bp,编码蛋白含380个氨基酸残基。其 T、C、A、G 分别为29.3%,32.3%,21.7%和16.7%。A ﹢ T 含量51.0%明显高于 G ﹢ C 含量49.0%。     

中药复肝春6号体外诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡实验研究

目的:探讨中药复肝春6号(Fuganchun 6,FGC-6)诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡的机理.方法:将FGC-6制成水煎剂,过滤,最后用微孔滤膜过滤除菌.药物浓度以生药计.采用MTT法计算FGC-6对H22细胞的半数致死量浓度和琼脂糖凝胶电泳对药物诱导的凋亡细胞进行DNA ladder分析,流式细胞术检测药物作用下的细胞凋亡率和细胞周期时相变化,透射电镜检测凋亡细胞超微结构的变化.结果:FGC-6对H22细胞的半数致死量浓度为240mg/mL.DNA ladder分析药物组可见明显的凋亡梯状条带.FGC-6作用下的小鼠H22肝癌细胞周期时相发生变化,随药物浓度的增加细胞凋亡率明显上升.透射电镜下FGC-Ⅰ组细胞具有明显的坏死特征.FGC-Ⅱ组肿瘤细胞可见明显的凋亡特征.结论:复肝春6号可以使体外培养的H22细胞染色体DNA断裂,阻滞在细胞周期的G1/G0 期,使H22细胞的超微结构改变等途径诱导细胞凋亡.