优化葡萄膜色素性肿瘤标本脱色素及免疫组化处理方法的探索

结合1例色素浓重的脉络膜恶性黑色素瘤合并黑色素细胞瘤样本,对优化葡萄膜色素性肿瘤样本脱色素及免疫组化染色处理的方法进行探索。临床获得的脉络膜恶性黑色素瘤合并黑色素细胞瘤石蜡组织标本,分别使用不同浓度的高锰酸钾/草酸溶液进行脱色素处理,并进行Ki67免疫组化检测。结果表明:标本切片脱蜡后使用多聚甲醛或福尔马林后固定,再以质量分数为1%高锰酸钾/质量分数为2%草酸溶液进行脱色素处理能得到满意的HE(苏木素-伊红)染色结果;在脱色素之前进行抗原修复,继而经后固定后进行脱色素处理的组织切片,脱色素结果较好且保持了组织的抗原性。对于色素沉重牢固的葡萄膜色素性肿瘤,在脱色素处理前或者抗原修复后,增加后固定步骤,并使用较高浓度的高锰酸钾/草酸溶液,能得到较好的脱色素效果,且可保持组织的抗原性和切片的完整。     

微波辐射技术在组织切片制作中的应用体会

欲观察细胞和组织器官的微细结构 ,必须制作普通切片及超薄切片 ,以便在光学显微镜或电镜下进行观察 ,因此切片制作是教学与科研中必不可少的技术方法。目前为了加快组织切片制作速度 ,并保证切片的质量 ,使切片染色达到色泽鲜艳、纯正 (红、兰对比鲜明 )和清晰[1、2 ] 。我们使用了微波技术 ,并取得了良好效果 ,现在扼要总结一下我们使用微波技术的体会和注意事项。1　微波辐射技术在切片制作中的应用及效果1.1　组织固定及染色　为了加快组织的固定速度 ,将小快组织 (如活检组织 )投入 10 %中性甲醛液中或 2 .5 %戊二醛液中 ,将玻璃杯 (或…     

乙醇和微波提取苦瓜叶中黄酮类物质的工艺研究

以苦瓜叶为原料,采用正交试验的方法对苦瓜叶中黄酮类物质用乙醇和微波法进行提取,试验结果表明,影响乙醇提取因素由强到弱顺序为:乙醇浓度>料液比>提取温度>提取时间,得到比较优势的组合为乙醇浓度为80%,料液比1:30,提取温度为70℃,提取时间4h.在微波法中影响苦瓜叶中总黄酮的提取效果各因素顺序为乙醇浓度>料液比>提取温度>提取时间,而得出比较优势组合为乙醇浓度为70%,液料比50:1,提取时间为3min,提取次数为3次.从时间及成本等方面考虑微波法值得推广采用.     

半仿生-微波组合技术提取金线莲多糖的研究

本文采用半仿生-微波组合技术研究了金线莲中多糖的提取方法.工作中,用蒽酮-硫酸光度法测定多糖的含量,以提取多糖的量为评价指标,单因素实验分别探讨了pH、温度、时间、微波功率、固液比等对提取金线莲多糖的影响.在单因素实验基础上,用四因素三水平正交实验优化提取条件.结果表明,半仿生-微波组合技术提取金线莲多糖的最佳条件为:pH 6.0,温度80℃,时间9 min,微波功率400 W,固液比为1:100(g:mL).在最优条件下,金线莲多糖的提取量为212.9 mg/g.     

两种不同方法提取枸杞多糖的比较研究

以枸杞多糖为研究对象,比较两种不同提取方法对枸杞多糖的提取效果.采用单因素和正交试验对枸杞多糖提取工艺（热水法和微波法）进行了初步探讨,比较了料液比、浸提温度、提取时间、提取次数等因素对多糖提取率的影响.结果表明：传统热水法提取的最佳条件为提取温度90℃,提取时间3.5 h,料液比1∶10（mL/g）,提取次数3次;微波提取的最佳条件为微波功率480 W,微波时间20 min,料液比1∶30（mL/g）,提取次数2次.通过两种方法的比较,微波法提取多糖提取率提高近40%,微波法提取枸杞多糖优于热水浸提法.     

不同提取方式对山楂叶多糖提取率和抗氧化活性的影响

研究不同提取方法对山楂叶多糖提取率和抗氧化活性的影响,为进一步开发利用山楂叶多糖提供技术依据.分别采用热水浸提法、超声波辅助水提法、微波辅助水提法提取山楂叶多糖.试验结果表明:热水浸提法提取山楂叶多糖的最适条件为料液比1∶30(m∶V)、提取温度90℃,多糖提取率为5.45%;超声波辅助水提法提取山楂叶多糖最适条件为料液比1∶30(m∶V)、超声波功率100 W,多糖提取率为6.82%;微波辅助水提法提取山楂叶多糖的最适条件为料液比1∶30(m∶V)、微波功率300 W,多糖提取率为7.68%.微波辅助水提法提取山楂叶多糖的效果最好,明显优于超声波辅助水提法和热水浸提法.同时以DPPH自由基清除能力,·OH自由基清除能力,Fe~(3+)还原力为评价指标,研究不同提取方法对山楂叶多糖体外抗氧化活性的影响.结果表明:3种方法提取的粗多糖均具有一定的抗氧化能力,超声波辅助法提取的山楂叶多糖的体外抗氧化活性最高,明显优于微波辅助水提法和热水浸提法.     

离子液体微波辅助提取臭牡丹中黄酮类化合物的研究

采用微波辅助提取技术,以臭牡丹黄酮类化合物的提取率为考察目标,利用溴化1-丁基-3-甲基咪唑溴([bmim]Br)离子液体水溶液为提取剂,提取臭牡丹中黄酮类化合物.分别考察了离子液体浓度、料液比、微波功率、p H值、提取温度和时间对臭牡丹黄酮类化合物提取率的影响.结果显示,臭牡丹黄酮类化合物的最佳提取工艺条件为:离子液体浓度为1.0 mol/L,料液比为1∶30,微波功率为500 W,p H值为8.0,提取温度为70℃,提取时间为6.0 min,在此条件下提取率可达4.318%.与传统乙醇提取法相比,该方法具有快速高效、溶剂使用量少、绿色环保、提取率高等优点.     

微波萃取穿地龙薯蓣皂苷元工艺探究

利用微波辐射提取穿地龙根茎中的薯蓣皂苷元,研究了料液比,微波辐射的温度,时间,功率对提取率的影响,采用单因素和正交试验法对微波法提取穿地龙中薯蓣皂苷元的工艺条件进行优化。结果表明:穿地龙中薯蓣皂苷元微波提取的最佳条件为料液比1∶25,提取时间5 min,提取温度90℃,提取功率500 W,提取率0.766%。优选的得到的微波提取工艺快速,环保,高效,稳定性好。     

薄层色谱法分离糖类的改进

该实验改进了一种用薄层色谱分析糖类混合物的方法,即试用一种“展层─显色”液,使展开与显色同步完成。显色液用二苯胺──苯胺──磷酸溶液。实验操作简便,效果明显,且对环境无污染。     

薄层色变法分离糖类的改进

该实验改进了一种用薄层色谱分析糖类混合物的方法,即试用一种“展层－显色”液,使展开与显色同步完成。显色液用二苯胺－－苯胺－－磷酸溶液。实验操作简便,效果明显,且对环境无污染。