人生长激素基因转化花叶芋及PEG在转化中的作用

将人生长激素基因插入pBR322衍生质粒载体pLGV1103 DNA中,通过三亲交配,将重组原粒pLB-9引入携带Ti质粒pGV3850的农杆菌,经同源重组,获得共整合重组体pGL198(hgh)Ti质粒。用叶盘共培养法,将pGL198(hgh)转化单子叶植物花叶芋,获得转基因再生植株。经胭脂碱测定、新霉素磷酸转移酶分析和DNA分子杂交,证明人生长素基因已整合到花叶芋DNA中。还探讨了聚乙二醇(PEG)在植物转化中的作用。     

将农杆菌Ti质粒携带的外源基因转入水稻细胞

未经特殊处理的农杆菌C58C1Rif~r菌株,与籼稻悬浮培养细胞共培养时,很少见有细菌的附着,也观察不到纤维丝的形成。但经复合酚类化合物预处理的菌株,与籼稻培养细胞在普通培养液,特别是在复合诱导培养液(培养过的番茄下胚轴切段、胡萝卜细胞及农杆菌的培养滤液)中共培养时,均可发现有较多的细菌附着于水稻细胞表面,并且菌体周围有纤维丝的形成。在复合处理组中,位于pGV3850:1103neo嵌合质粒T-DNA上的NPTⅡ基因及NOS基因在籼稻培养细胞中获得了转移与表达。     

豆球蛋白基因转化花叶芋的研究

利用重组DNA技术,构建具有Ap~rCm~r的遗传标记并带有豆球蛋白的基因重组质粒,通过“三亲支配”,将豆球蛋白基因插入到植物基因工程载体pGV3850:1103neo DNA中。用改良的共培养法进行单子叶植物花叶芋的叶盘(叶柄)转化,在Km的选择压力下得到转化的再生植株。利用Southern吸印杂交,证明豆球蛋白基因整合到花叶芋的基因组中;通过胭脂碱分析,表明pGV3850:1103neo中的胭脂碱合成酶基因在再生植株中进行了表达。     

萤火虫萤光素酶基因转化花叶芋及表达的研究

将萤火虫萤光素酶基因重组到质粒pBR325中,通过“三亲交配”和同源重组,将萤光素酶基因整合到Ti质粒pGV3850:1103。通过改良的叶盘转化法,用萤光素酶基因转化单子叶植物花叶芋,获得转基因植株。对再生植株的胭脂碱测定、新霉素磷酸转移酶分析、DNA点杂交、萤光素酶基因活性测定,证明萤光素酶基因已转化到花叶芋中并进行了表达。     

叶盘共培养法介导的基因转移与两种转基因植物的鉴定

本文以共整合型Ti质粒载体pGV3850:1103neo中pNOS-NPTⅡ(Km~R)嵌合基因为遗传标志,应用改良的叶盘共培养法对烟草和番茄进行了遗传转化。通过施加选择压力,筛选出具有Km~R表型的愈伤组织,并由此获得转基因烟草和番茄植株。通过胭脂碱的高压电泳检测和生物素探针的尼龙膜印迹杂交,分别从侧面(间接)和正面(直接)证实了Km~R基因在上述两种转化细胞中的整合和表达。还探讨了转化、培养和筛选过程中的一些细节,并对改进技术的原理及其效果进行了讨论。     

稻纵卷叶螟nAChRs的分子特征及对杀虫剂的响应

烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)是脊椎动物和无脊椎动物中的主要兴奋性神经递质受体.在昆虫中,nAChRs是杀虫剂的重要分子靶点,如新烟碱类和多杀菌素.在此研究中,根据稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)转录组数据库和生物信息学方法鉴定两个稻纵卷叶螟nAChRs基因(Cmα8和Cmα9).Cmα8和Cmα9的开放阅读框(ORF)分别由1,650和999个核苷酸组成,这两种基因都具有nAChR家族成员的典型特征.系统发育树分析显示,Cmα8与丽蝇蛹集金小蜂(Nasonia vitripennis)的Nvα8同源性最高,Cmα9与家蚕Bombyx moriα9(Bmα9)的同源性最高.组织表达模式分析表明两个基因在中肠和脂肪体中高度表达,在蛹和成虫阶段,Cmα8和Cmα9的表达量最高,最低的表达量则位于幼虫阶段.此外,吡虫啉在中肠中显著诱导Cmα8和Cmα9的表达,而在脂肪体中则没有明显变化.综上所述,本文将为理解稻纵卷叶螟(C.medinalis)中nAChRs的功能提供有用的信息.     

农杆菌介导的vbp基因遗传转化调控机理研究

该文就农杆菌介导的vbp基因遗传转化调控机理进行研究。方法一:分析vpb1基因启动子序列;方法二:对探测载体中vpb1基因启动子的转录活性进行验证;方法三:设计vbpl基因启动子序列突变位点。结果:(1)基于荧光蛋白表达情况来看,在pRSET-A质粒中的vbpl基因启动子能够将荧光基因的表达予以正常启动。(2)能够正确构建pRSET-m1突变质粒,vbp1基因启动子的转录活性会随着SigmaA结合位点的去除而降低。(3)能够正确构建p RSET-m2突变质粒,vbp1基因启动子的转录活性会随着转录因子Fnr结合位点中-65位碱基的突变而增强。(4)能够正确构建pRSET-m3突变质粒,vbp1基因启动子的转录活性会随着转录因子Fnr结合位点中-66位和-68位碱基的突变而消失。结论:深入研究农杆菌介导的vbp基因遗传转化调控机理,能够找出影响农杆菌的VBP蛋白表达的相关因素,有可能使所获得的农杆菌菌株具有较高的转化效率,以便能够有效提高植物转基因效率。     

Ti质粒上T-DNA怎样从农杆菌转移到植物细胞内——对人教版高中《生物·选修3·现代生物科技专题》的讨论

<正>1问题人教版高中《生物.选修3·现代生物科技专题》P.12介绍了农杆菌转化法:农杆菌将携带的Ti质粒上的T-DNA导人到植物细胞并整合到植物细胞中染色体的DNA上。农杆菌是否侵入植物细胞内,是整个Ti质粒进人植物细胞还是只有T-DNA进人植物细胞?     

重组质粒pRSET DNA提取方法的探究

通过两种从大肠杆菌中提取重组质粒pRSETDNA不同方法的比较,寻找提取重组质粒pRSET DNA的切实可行的方法.将含有目的质粒的菌株分别采用SDS碱裂解法和煮沸法进行质粒DNA小量提取,采用DU800核酸蛋白分析仪测定质粒DNA的产量及纯度.结果SDS碱裂解法获得质粒DNA产量为5.61 μg/ml菌液,A260/280=1.95;煮沸法获得质粒DNA产量为4.36μg/ml菌液,A260/280=1.78.与煮沸法相比,SDS碱裂解法获得质粒产量更多,纯度更高,更适合分子生物学常规实验的要求.     

氨茶碱的药动学变化及其配伍应用时剂量调整

氨茶碱是临床上常用的平喘药,在急慢性阻塞性肺部疾病的治疗中占有重要地位。血浆茶碱浓度压5μg/ml开始有一定治疗作用,治疗上较适宜的血药浓度为10～20μg/ml,超过20μg/ml,毒性反应逐渐增多。如果不注意茶碱药动学变化及时调整剂量,则不是达不到治疗效果就是出现毒性作用,本文就茶碱药动学、影响因素以及药物伍用时茶碱剂量局整等作一概述。供临床参考。茶碱(氨茶碱含茶碱77～85％)能直接松弛支气管平滑肌,并有兴奋作用于支气管     

加州大学的治理变革及启示

从控制走向协调,以治理代替管理,既是世界高等教育改革的趋势,也是美国公立大学一直努力的方向,而加州大学则是将这种努力践行得较为彻底的一个成功典范.这种努力具体表现为加州大学一方面通过与政府签订协约、引入市场机制、寻求校外群体的支持等形式来弱化政府的管制色彩,另一方面又充分发挥董事会、学术委员会等治理机构的协调作用,为大学自治提供一系列的缓冲与保护.     

大学校园“边缘区现象”引发的思考

随着时代的发展,大学校园和城市之间逐渐产生了一个特殊的区域,即所谓的大学校园“边缘区”。以系统分析法对由边缘区地段的特殊性引发的“边缘区现象”的成因,特点及发展方向进行深入的思考．     

复合淀粉粘合剂的研制

介绍了两种新的淀粉粘合剂的制备方法，该产品制法简单、稳定性好、粘度高、渗透性强、成膜性较好，有较好的使用前景。     

预测农村劳动力流动趋势的一种方法

马尔可夫预测法是应用概率论中马尔可夫链的理论和方法来研究各种状态的变化规律,并由此预测状态未来变化趋势的一种方法。农村劳动力的流动受到多种因素影响,可以看作是一个随机的状态过程。马尔可夫链是对农村劳动力的流动预测的一个较好的方法,本文利用马尔可夫链对永兴傣族乡农村劳动力流动趋势进行了预测分析。     

孔子言语得体观述要

孔子作为中国历史上伟大的教育家、思想家和哲学家,他的言语观以仁为核心,以中庸之道为方法论,零珠碎玉般地散见于《论语》和其他论说中。孔子言语论中的得体观可概括为以下几个主要方面:一、强调言语的功用与价值;二、言语必合仁、礼规范;三、言语要知人、言中;四、言语要适合语境;五、言行一致,诚实守信;六、名正言顺则事成;七、既提倡尚文,又主张辞达。     

枞阳县东部地区方言声母的普通话辨正——声母Ф、η、n与1

枞阳县东部地区方言零声母包括普通话里的部分零声母、r声母和个别l声母;方言η声母是普通话的部分零声母;声母n、l在方言里有混淆不分的现象,但有些音节则区分得很清楚。本文主要就方言声母Ф、η、n和l与普通话相对应的声母进行比较,阐明方音辨正的方法。     

提高"中国近现代史纲要"课程教学实效的探索

在高校开设"中国近现代史纲要"课程,体现了党和国家对于高校思想政治理论教育的重视。但是,"纲要"课程开设之后的教学现状却并未令人满意。针对教学中存在的问题,我们就增强"纲要"课的理论性和学术性,活跃课堂气氛,进行开放式教学,加强师资队伍的建设,发挥教师的主导作用和挖掘历史资源,加强学生的社会实践等方面进行了以提高教学实效为目的的探索。     

教育全球化发展的新动向概述

20世纪中后期以来,教育全球化发展的新动向主要表现在:教育的国际交流与合作日益增加;教育的国际交流朝着教育贸易方向发展;教育国际交流的主体改变了;世界留学生的规模急剧扩大;教育的国际化使各国教育课程发生了显著变化;教育规模的迅速扩大;教育超越学校教育的范畴;教育向社会的全方位渗透等。     

违约赔偿责任研究

违约赔偿责任是债务人不履行债务的后果。各国立法对违约赔偿范围规定不尽相同。违约赔偿原则的适用有利于最大限度地保护非违约方的利益,保障交易安全。根据公平原则,我国的合同法对于完全赔偿权责的适用也作了若干损害赔偿限制性规定。     

腺嘌呤电氧化吸附量的研究

提出一种通过常规扫速测试对吸附量进行初步估计的新方法.通过循环伏安技术对腺嘌呤在玻碳电极上的吸附现象进行了研究,对电活性质粒吸附量进行了定性判断.结果表明,弱吸附吸附量的数量级一般在10-10molcm-2.