川芎嗪对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药性的逆转及P-糖蛋白表达的影响

[目的]探讨川芎嗪(TMP)对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞的耐药逆转及其对该细胞P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.[方法]MTT法测定细胞的药敏性和抗药性逆转,流式细胞术检测耐药细胞P-糖蛋白的表达.[结果]非细胞毒性剂量(320μg/m l)和低毒剂量(1 250μg/m l)的川芎嗪均能显著降低MCF-7/ADM细胞的IC50(P<0.01),逆转倍数分别为2.14和2.80倍;并使该细胞P-gp的表达率由(90.60±0.40)%分别降低至(69.10±1.65)%和(60.30±1.25)%.[结论]川芎嗪可部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性,其逆转机制与抑制该细胞P-gp的表达有关.     

砷剂对肿瘤多药耐药细胞株作用机理的研究

三氧化二砷（As2O3）是人们观念中的剧毒物砒霜中的有效成分．它既是一种致癌剂又有一定有益的生物学作用．本实验研究证实，砷剂在非细胞毒性剂量下能降低化疗药物阿霉素（ADM）对多耐药（multi drug resistance，MDR）肿瘤细胞株K562/ADM细胞的IC50（细胞抑制率达50％时化疗药物的浓度），表明三氧化二砷具有逆转人红白血病细胞株K562/ADM细胞MDR作用．     

816株临床分离细菌及其耐药性分析

目的为临床治疗细菌感染、合理使用抗菌药物及院内感染管理工作提供参考依据。方法细菌培养鉴定采用常规方法和API系列鉴定;用微量稀释监测15种属816株菌对20种抗菌药物的耐药百分率。结果病原菌共816株,其中革兰氏阴性杆菌592株(72.55％),革兰氏阳性球菌224株(27.45％),除天然耐药外,革兰氏的性菌对舒普深的耐药率最低(0.00～10.87％),对氨苄西林的耐药率最高(11.11～100.0％);除MRSA外,革兰氏阳性球菌对去甲万古霉素的耐药药率低(0.00～3.85％),对红霉素的耐药率最高(53.33～92.50％)。结论分离菌株的分布越来越广,院内感染的常见菌在各种菌中所占比例高且耐药最严重,经验治疗细菌感染应根据耐药率监测结果优选药物。     

人肺癌H1299阿霉素耐药性细胞株的建立及鉴定

耐药性是导致肺癌患者化疗效果差的一个重要原因.本研究采用阿霉素浓度递增法建立人肺癌阿霉素耐药细胞株H1299 R,并采用多种实验验证其耐药特性.结果发现,H1299 R相对比于野生型细胞H1299 W形态和大小发生变化,但细胞增殖速度没有显著的差异;当使用浓度为5μg/mL阿霉素处理H1299 R和H1299 W细胞时,H1299 W细胞的增殖率明显低于H1299 R细胞;实时荧光定量PCR显示耐药性细胞株H1299 R中耐药相关基因的mRNA表达量明显高于H1299 W组.人肺癌H1299阿霉素耐药细胞株的成功建立,为进一步研究肺癌细胞产生耐药性的机制奠定了基础.     

糖皮质激素诱导鸡外周血淋巴细胞凋亡的研究

以糖皮质激素(GC)制剂－地塞米松（Ｄex)体外孵育鸡外周血淋巴细胞（ＰＢＬ），通过AO－EB染色，基因组DNA琼脂糖凝胶电泳和细胞超微细胞观察研究外源性GC对PBL发生凋亡的影响。结果显示鸡PBL于1μmol/L和10μmol/L Dex孵育6h和12h后，其基因组DNA均发生180bp及其整数倍的“阶梯状”断裂，细胞凋亡指数从孵育0h的1．4％增加到6h的14．0％和19．1％，12h的21．1％的21．1％和29．5％，坏死指数从0h的5．8％增加到6h的11．7％和24．7％，12h的25．3％和36．5％。超微结构观察，Dex处理后PBL核染色质浓缩呈“新月体”状及凋亡小体的形成等变化。     

培养时间对药敏试验结果的影响

为比较鸡源大肠杆菌培养时间对药敏试验结果的影响,采用12×8型微孔反应板进行2倍稀释法测定鸡源大肠杆菌X1(临床分离敏感菌)、鸡源大肠杆菌C2(临床分离的产β-内酰胺耐药菌株)和大肠埃希氏菌ATCC25922菌株对恩诺沙星、阿莫西林/克拉维酸(4/1)、多西环素和阿米卡星的敏感性。微孔板置于37℃恒温箱中培养,并分别在培养2～22 h各记录一次最小抑菌浓度(MIC)值。结果显示:阿莫西林/克拉维酸、恩诺沙星、阿米卡星和多西环素的MIC值在14～22 h均无变化。当培养时间在4～14 h时,不同药物的MIC值增大幅度不一样,其中阿莫西林/克拉维酸(4/1)和恩诺沙星的MIC值变化不明显,而阿米卡星、多西环素的MIC值变化较大;同时,相同药物对不同菌株的MIC值变化幅度也不一样,其中标准菌株MIC值变化最小,最多不超过8倍,产酶菌株(C2)结果变化较大,最大达到1 024倍,最小8倍。综上所述,临床中进行药敏试验过程中,药物的MIC值随细菌的培养时间延长而增大,当培养时间超过14 h时,其MIC值随细菌的培养时间延长而不再出现明显变化,即在时间有限的情况下,药敏试验至少应培养14 h才能得出较合理的、能正确指导临床用药的MIC值。     

七筋姑不同倍型的克隆构型研究

七筋姑隶属百合科七筋姑属,多年生草本,具有二倍体和四倍体两种细胞型,可通过根芽的方式进行无性繁殖.本文采用SSR分子标记对其克隆结构进行研究,结果表明:二倍体种群与四倍体种群全为多克隆种群,没有发现单克隆种群,克隆构型均为混合型.两种倍型152个七筋姑个体中出现了117个基因型,其中二倍体包含29.5个基因型,四倍体包含29个基因型,平均每个种群有29.25个克隆.物种水平上Simpson多样性指数(D)为0.992,基因型比率(PD)为0.700,表现出克隆多样性.二倍体克隆多样性(D=0.978,PD=0.846)略高于四倍体(D=0.974,PD=0.805).相关性表明环境因子与克隆多样性无显著相关.多基因型起源、兼性有性生殖和实生幼苗的更新可能是七筋姑不同倍型基因型丰富的来源.     

共表达人μ阿片受体与Gq蛋白的稳定细胞株的建立及功能鉴定

建立共表达人μ阿片受体（humanμ-opiatereceptor,hMOR,OPRM）与Gq蛋白的CHO-Flp In稳定细胞模型,并鉴定其药理学功能,可为体外高通量筛选靶向OPRM的药物奠定基础。该研究首先构建重组表达质粒OPRM-pcDNA5/FRT,并进行鉴定;然后通过脂质体转染法将OPRM-pcDNA5/FRT、GqG66Di5-pIRES/puro3和FLP重组酶质粒POG44共转染CHO-Flp In细胞,经抗性加压和有限稀释法挑取耐药单克隆,采用FLIPR钙信号检测方法筛选阳性克隆株;最后,通过RT-q PCR对细胞中的OPRM和GqG66Di5m RNA表达水平进行检测,并选用OPRM激动剂DAMGO和抑制剂Naloxone对稳定细胞株的药理学功能进行鉴定。结果显示：经酶切确定了重组质粒的正确构建;通过重组质粒转染、抗生素加压筛选以及钙信号测定获得22个具有活性的克隆细胞株,其中15号细胞株的荧光信号值最高,命名为Gq-OPRM1-CHO;与对照组相比,Gq-OPRM1-CHO细胞组中OPRM与GqG66Di5基因m RNA水平分别升高约400倍和120倍;在Gq-O...     

硫氧还蛋白还原酶抑制剂乙烷硒啉逆转顺铂耐药及其机制研究（英文）

目的:研究凋亡调控相关蛋白来了解顺铂耐药成因,同时考察乙烷硒啉(Ethaselen)在K562耐药细胞中逆转顺铂耐药的作用,并初步探讨其作用机制。创新点:首次研究乙烷硒啉在逆转顺铂耐药中的作用,且此作用与乙烷硒啉诱导细胞凋亡相关。方法:通过长时间脉冲诱导得到顺铂耐药K562细胞,并观察耐药细胞形态及倍增时间。采用MTT法考察乙烷硒啉、顺铂及其联用组在不同细胞株间的生长抑制作用。流式细胞术分析细胞凋亡情况以及细胞内活性氧(ROS)水平。最后,通过蛋白质免疫印迹(Western blot)考察凋亡调控相关蛋白水平的变化。结论:脉冲诱导得到的K562耐药细胞对顺铂的耐受性是原K562细胞的5.34倍。形态学观察发现,耐药细胞体积增大,粘附性进一步降低。乙烷硒啉与顺铂联用表现出协同效应。当加入少量的乙烷硒啉(顺铂与乙烷硒啉的摩尔比率为10:1),顺铂作用K562耐药细胞的半抑制浓度(IC50)值可以减少21倍。流式细胞术及Western blot表明,乙烷硒啉能够诱导耐药细胞凋亡。其逆转顺铂耐药主要是通过调控Bcl-2及Bax蛋白比例以及通过提高细胞内活性氧水平引起线粒体通透转运孔道(PTP)蛋白孔道的形成来促使释放细胞色素c,进而引起Caspase凋亡途径。     

北部湾珊瑚来源构巢裸胞壳菌GXIMD 02509中具有细胞毒性的一个多硫代二酮哌嗪生物碱和结构多样的芳香聚酮类化合物（英文）

北部湾藴育着丰富且亟待研究的海洋（微）生物资源,是活性天然产物的重要来源。本研究从涠洲岛珊瑚共附生构巢裸胞壳菌GXIMD02509中分离获得一个多硫代二酮哌嗪生物碱和系列芳香聚酮类化合物,包含一个新化合物4a-O-methoxyarugosin H (1)。我们通过采用多种波、光谱学技术及对比文献方法鉴定了化合物的化学结构。化合物1～5、7和10对786-O、SW1990和SW480等3株肿瘤细胞增殖具抑制活性,半抑制浓度（IC50）值为4.3～33.4μmol/L。化合物emestrin J (10)具有一个二硫桥键,还能够显著抑制786-O细胞克隆及迁移,诱导786-O细胞凋亡并阻滞细胞分裂在G2/M期,是一个潜在具抗肿瘤活性的先导化合物。     

Traditional Chinese medicines and their active ingredients sensitize cancer cells to TRAIL-induced apoptosis

The rapidly developing resistance of cancers to chemotherapy agents and the severe cytotoxicity of such agents to normal cells are major stumbling blocks in current cancer treatments.Most current chemotherapy agents have significant cytotoxicity,which leads to devastating adverse effects and results in a substandard quality of life,including increased daily morbidity and premature mortality.The death receptor of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand(TRAIL)can sidestep p53-dependent pathways to induce tumor cell apoptosis without damaging most normal cells.However,various cancer cells can develop resistance to TRAIL-induced apoptosis via different pathways.Therefore,it is critical to find an efficient TRAIL sensitizer to reverse the resistance of tumor cells to TRAIL,and to reinforce TRAIL’s ability to induce tumor cell apoptosis.In recent years,traditional Chinese medicines and their active ingredients have shown great potential to trigger apoptotic cell death in TRAIL-resistant cancer cell lines.This review aims to collate information about Chinese medicines that can effectively reverse the resistance of tumor cells to TRAIL and enhance TRAIL’s ability to induce apoptosis.We explore the therapeutic potential of TRAIL and provide new ideas for the development of TRAIL therapy and the generation of new anticancer drugs for human cancer treatment.This study involved an extensive review of studies obtained from literature searches of electronic databases such as Google Scholar and PubMed."TRAIL sensitize"and"Chinese medicine"were the search keywords.We then isolated newly published studies on the mechanisms of TRAIL-induced apoptosis.The name of each plant was validated using certified databases such as The Plant List.This study indicates that TRAIL can be combined with different Chinese medicine components through intrinsic or extrinsic pathways to promote cancer cell apoptosis.It also demonstrates that the active ingredients of traditional Chinese medicines enhance the sensitivity of cancer cells to TRAIL-mediated apoptosis.This provides useful information regarding traditional Chinese medicine treatment,the development of TRAIL-based therapies,and the treatment of cancer.     

小菜蛾对阿维菌素和抑太保的抗性监测及治理对策研究

2002—2004年，以北京宣化品系作为敏感品系，采用叶片浸渍法测定了温州地区小菜蛾的抗药性，同时采用诊断剂量法监测其抗性个体频率的发展动态，两结果趋势一致．当小菜蛾对阿维菌素和抑太保处于敏感阶段，低等水平抗性和中等水平抗性时，抗性个体存活率分别为0％—10％、10%—20％和20％—63．5％．采用以田间抗性监测与治理有机结合为特点的小菜蛾抗药性治理对策，交替施用作用机理不同的杀虫剂，可有效地控制抗性小菜蛾种群的危害，并延缓对新型杀虫剂的抗性发展．将药剂的诊断剂量作为抗药性监测的区分浓度，可为抗药性治理的决策和效果评价提供重要依据．     

杂草抗药性与化学防除

抗除草剂杂草的出现和发展，对化学除草剂的推广使用提出新的挑战，使人们在除草剂作用机理以及抗药性机理的同时，筛选和分离抗性基因，最后获得抗除草剂的转基因植物。     

植物抗寒基因研究进展

低温是一种常见的非生物胁迫,是限制植物分布、降低作物产量及品质的重要原因之一,是农业生产中的一种严重的自然灾害。随着植物抗寒分子机理的不断深入研究,目前已经克隆了很多植物抗寒相关基因,可通过基因工程手段提高植物的抗寒性,对农业生产具有重要意义．本文综合概述了目前已克隆的重要植物抗寒基因的最新研究方向、进展及应用。     

抗甲霜灵烟草黑胫病菌突变株的交互抗药性研究

采用菌落生长速率法，测定了2种保护性杀菌剞和4种内吸性杀菌剂对烟草黑胫病菌敏感菌株和4个抗甲霜灵突变株的EC50值，测定了抗甲霜灵烟草黑胫病菌突变株对5种杀菌剂的交互抗性。结果表明：抗甲霜灵烟草黑胫病菌突变株对代森锰锌有负交互抗性现象，对百菌清、霜脲氰、乙磷铝和霜霉威无交互抗性。     

抗肿瘤阳离子肽：特征、作用机制及展望

恶性肿瘤（癌症）是尚未被攻克的重大疾病之一,主要原因之一是临床上抗肿瘤药物效用不大．具有抗肿瘤活性的阳离子肽（CAP）主要结合肿瘤细胞膜并破坏膜结构,这是通过肽的正电荷与肿瘤细胞膜的负电荷之静电吸引来实现的．与传统化疗药物相比,绕过肿瘤细胞的耐药机制是CAP最突出的优势．本文对抗肿瘤肽的主要结构特征、抗肿瘤效果和抗肿瘤机制（以鲎素为例）进行了综述．作者认为,寻找靶向肿瘤干细胞的CAP对于治愈肿瘤具有特别重要的意义．另外,通过化学改构和新剂型研制,CAP将具有高靶向性和低毒性,给抗肿瘤药物开发提供新的动力．     

WMV-2感染引起甜瓜植株苯丙氨酸解氨酶和叶绿素的变化

研究了西瓜花叶病毒-2新疆株（Watermelon mosaic virus-2-XJ,WMV-2-XJ）感染抗性不同的甜瓜品种后苯丙氨酸解氨酶和叶绿素含量的变化.与健康对照植株相比,受感染植株的酶活性均有所增高,但抗性品种“新玉”增高的幅度是感性品种“网纹香”的2倍,酶活性峰早出现12天,即抗性品种酶活性增高幅度大,酶活性峰出现早,叶绿素的变化则与抗性呈负相关,抗性品种“新玉”受WMV-2-XJ感染后的叶绿素含量与健康对照差异不大,而感性品种“网纹香”的叶绿素含量则比健康对照下降了62.9%.苯丙氨酸解氨酶和叶绿素含量的变化均与甜瓜品种对WMV-2-XJ的抗性呈现规律性的相关性,这种规律性可用于甜瓜品种对WMV-2-XJ 抗性鉴定的生物化学分析.     

Kinesin KIF4A is associated with chemotherapeutic drug resistance by regulating intracellular trafficking of lung resistance-related protein

Multidrug resistance (MDR) is the major impediment to cancer chemotherapy. The expression of lung resistance-related protein (LRP), a non-ATP-binding cassette (ABC) transporter, is high in tumor cells, resulting in their resistance to a variety of cytotoxic drugs. However, the function of LRP in tumor drug resistance is not yet explicit. Our previous studies had shown that Kinesin KIF4A was overexpressed in cisplatin (DDP)-resistant human lung adenocarcinoma cells (A549/DDP cells) compared with A549 cells. The expression of KIF4A in A549 or A549/DDP cells significantly affects cisplatin resistance but the detailed mechanisms remain unclear. Here, we performed co-immunoprecipitation experiments to show that the tail domain of KIF4A interacted with the N-terminal of LRP. Immunofluorescence images showed that both the ability of binding to LRP and the motility of KIF4A were essential for the dispersed cytoplasm distribution of LRP. Altogether, our results shed light on a potential mechanism in that motor protein KIF4A promotes drug resistance of lung adenocarcinoma cells through transporting LRP-based vaults along microtubules towards the cell membrane. Thus KIF4A might be a cisplatin resistance-associated protein and serves as a potential target for chemotherapeutic drug resistance in lung cancer.     

Resistant agency in German lessons in primary education in Germany

This paper aims to research practices of resistance as an important part of agency in primary school classrooms. By combining a post-structural theoretical frame with a critical ethnographic research approach, it understands children’s resistance as an ordinary practice, as a necessary response to structures and practices of the classroom setting. It argues that agency needs to be resistant to some extent, because otherwise it would be merely submission or adaptation. How agency can emerge depends on the social position of the student, which influences the way in which she or he is able to anticipate (more or less implicitly) spaces for resistant agency and also how he or she is addressed in the classroom and beyond. An ethnographic case study of German lessons in a third-grade primary class in a German school shows how resistant agency manifests and how it might be restricted when it comes to racialised subject-positions in the classroom.