南阳牛血液基因组DNA提取与ANGPTL4基因的PCR扩增

采集20例南阳牛的血液,采用酚/氯仿法分离白细胞提取基因组DNA,并且对ANGPTL4基因部分序列(677～998 bp)PCR扩增条件进行了优化。结果表明,获得的牛基因组DNA经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,主条带清晰,表明获得的南阳牛基因组DNA可以用于后续实验;以所提取的基因组DNA为模板,优化ANGPTL4基因片段扩增的条件,结果表明,最理想的PCR扩增条件是模板量为2μL(50 mg/L),Taq聚合酶(5 u/μL)的量为0.8μL,退火温度为56℃,循环次数为35次。     

小麦叶绿体DNA的提取与psb基因的扩增

利用高离子强度，低pH值缓冲液匀浆细胞的方法，提取小麦叶绿体DNA，并以此为模板，通过聚合酶链反应（PCR）对小麦叶绿体psbA基因进行了特异性扩增。     

PCR 是如何扩增特定 DNA 片段的

1提出问题在PCR过程中,有时需要扩增DNA中特定的片段(图1),如目的基因的扩增等。那么,如何控制扩增特定的DNA片段呢?人教版高中《生物》选修1教材中指出:"DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列,使这段固定长度的序列呈指数扩增。"对这句话,该如何理解?     

应用PCR技术扩增SRY基因检测性别

本文介绍了一种从基因水平快速、简捷地鉴定性别的方法及该方法的实际应用价值.PCR(polymerase chain reaction)技术是目前最常用的体外扩增DNA片段的技术,SRY(sex determining regionof the Y)基因是男性特有的基因,位于Y染色体上.在SRY基因区域设计特异的引物,利用PCR技术,以管家基因GAPDH为内参照,若能扩增出SRY基因片段,即可判断为男性,否则为女性.该法可对一滴血、一根毛发、多年的尸块、胎儿、有争议的性别进行性别鉴定.广泛应用于法医鉴定、无创孕期胎儿性别鉴定以预防X连锁隐性遗传病患儿的出生以及对有性别争议的运动员体检等.目前赤峰市的各大医院还未开展此技术,值得推广.     

拟南芥总RNA的提取及RT-PCR扩增CBF1基因

CBF1基因的扩增是研究植物抗旱基因的前期工作。本研究用Trizol试剂法提取模式植物拟南芥叶片的总RNA,经过反转录进行PCR扩增,将产物DNA回收后,连接PCR片段与T载体,电击转化入E.coli大肠杆菌感受态细胞;涂平板长出菌落,挑取半个白斑菌落电泳鉴定转化子;鉴定完成后提取质粒,用双酶切法进行鉴定,结果表明获得CBF1基因。     

“PCR技术扩增目的基因”教学感悟

<正>高中《生物·选修3·现代生物科技专题》中"利用PCR技术扩增目的基因",是体外扩增目的基因的常用方法之一。下面就笔者在本节课教学中的成功之处与大家分享。1合理引入由于选修内容学生不容易学习和理解,笔者把本节内容放在学生学习了"从基因文库中获得目的基因"的方法之后。因为在学生学习了该部分知识以后,教师再紧接着提出"怎样获得更多的目的基因"这一问题,水到渠成,符合学生的认知规律。     

PCR扩增目的基因相关计算的教学思考

针对PCR扩增目的基因的相关计算,提出有关引物的计算,围绕DNA聚合酶的特点展开;有关PCR过程中DNA分子数目的计算,围绕PCR技术的原理“DNA半保留复制”展开。引导学生从PCR技术的原理入手,实现深度学习。     

皖南花猪ESR基因PCR扩增影响因素初探

采用PCR扩增皖南花猪ESR基因140bp的特异片段,对ESR基因PCR扩增的相关因素进行研究,以提高扩增的效率,通过多次实验确定皖南花猪ESR基因的PCR反应条件.     

一道PCR技术扩增目的基因试题的解题方法归纳

<正>在许多高考教辅资料上都有这样一道与PCR技术扩增目的基因有关的试题,大部分学生解答这道试题会感觉比较困难。鉴于此,笔者从不同角度归纳出解答此题的3种方法,希望能给各位同仁以启示。例题"X基因"是DNA分子上一个有遗传效应的片段,若要用PCR技术特异性地拷贝"X基因",需     

DNA片段体外扩增技术——聚合酶链式反应(PCR)的原理与应用

随着分子生物学的发展,对特定核甘酸片段进行分离。纯化及扩增已成为基因分子生物学研究的中心问题。过去,人们为了从生物材料中获得某一段特定的DNA(基因)顺序或者进行其顺序分析或鉴定,需要经过非     

铜绿假单胞菌随机扩增DNA多态性基因分型研究

目的:调查铜绿假单胞菌在临床各科中的流行情况,以期建立稳定的临床检测系统,在控制院内感染的流行病研究中发挥更大的作用.方法:用微量液体稀释法进行药敏检测,用RAPD技术进行基因分型.结果:耐药谱分6型,Ⅰ型占44.5%,Ⅱ型占18.5%,Ⅲ型占7.4%,Ⅳ型占7.4%,V型占11.1%,Ⅵ型(不定型)占1.1%;RAPD分9型,A型占51.9%,B型占7.4%,C型占7.4%,D型占7.4%,E型占7.4%,F型占3.7%,G型占3.7%,H型占7.4%,Ⅰ型占3.7%.结论:基因型A型、耐药谱Ⅰ型的铜绿假单胞菌是此次ICU医院感染暴发流行的菌株,其它型别为非流行相关菌株.RAPD基因分型的灵敏性、特异性及可靠性优于耐药谱分型,在医院感染流行病学调查中具有较大的应用价值.铜绿假单胞菌对哌拉西林、头孢唑啉、头孢呋肟耐药率高;对喹诺酮类抗生素较敏感;对氨基糖甙类抗生素有一定的耐药性;亚胺培南的耐药率最低.     

利用模型建构法解决PCR扩增目的基因的有关计算

通过将物理模型与数学模型相结合,巧妙解决PCR扩增目的基因的有关计算问题。旨在提高学生运用模型与模型建构的能力,发展学生的生物学学科核心素养。教师在教学中应善于发掘、利用、积累模型建构的素材。     

关于“利用PCR技术扩增目的基因”的教学建议

正PCR技术是生物学研究上一项非常重要的技术,它是体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,只需在eppendorf离心管中建立反应,经数小时后,就能将极其微量的目的基因或某一特定DNA片段扩增数十万倍,甚至千百万倍.这项技术不仅可以用于获取和扩增目的基因,而且在癌症治疗的监控、临床医疗诊断以及法医学等众多领域都有着重要的用途,如此一项有重要作用的技术,笔者认为高中生必要理解和掌握这项技术.但是实际情况是学生对于PCR技术的掌握情况并不是很理想,对PCR技术原理和过程的掌握不够到位.究其原因,一方面由于PCR扩增DNA技术所需设备昂贵,一般中学很少具备动手操作的条件,另一方面PCR技术在高中教材中仅有少     

“利用PCR技术来扩增目的基因”教学的思考

人教版高中《生物（选修3）现代生物科学技术专题》中“利用PCR技术来扩增目的基因”,是基因工程操作步骤中获取目的基因的常用方法之一。本文结合教学实践谈几点思考。     

几种药用植物基因组DNA提取方法研究

采用改良2×CTAB法和改良SDS法提取富含多糖和次生代谢物质的几种药用植物不同器官基因组DNA,并用紫外分光光度计分析,凝胶电泳和PCR扩增进行鉴定。结果表明:改良2×CTAB法和改良SDS法均能有效去除不同药用植物材料中的蛋白质、多糖、酚类及其他次生代谢物质,获得较高质量基因组DNA。但与改良SDS法相比,改良2×CTAB法提取的基因组DNA质量更好。     

类比思维下“PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定”的实验教学组织

运用"类比思维"的逻辑思维方法对DNA复制过程和PCR扩增过程、光合色素分离与琼脂糖凝胶电泳实验进行类比,提升学生的生物学核心素养。     

DNA粗提取与鉴定实验

1　改进原因按新教材安排,该实验每班需130ｍＬ鸡血细胞液,每班需390ｍＬ鸡血,而每只2ｋｇ左右的鸡可取100～120ｍＬ鲜血,每班需买4只这样的活鸡。且每个实验组需用50ｍＬ95%酒精,每班约1500ｍＬ,10个班约需15Ｌ,用量巨大。我们在实验时经试验,用量减少到原来的1/5,效果仍明显,却可以大大节约实验成本。另外,教材上将ＤＮＡ鉴定安排在提取含杂质较少的ＤＮＡ之后,因该实验步骤繁多,时间紧,多数学生未能做完该实验,难以看到结果。我们在实验中作了3个小调整。将ＤＮＡ的鉴定安排在析出含ＤＮＡ的黏稠物及提取之后。将析出的丝状物取一半用于…     

DNA的粗提取与鉴定

复习目标 初步理解DNA的粗提取与鉴定的实验原理，掌握DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质。     

植物基因组DNA提取——本科分子生物学实验方法改进

介绍在教学实验中分别采用SDS法和CTAB法对辣椒基因DNA进行提取的过程,结果表明,改进的CTAB法提取的DNA含量较高且纯度较好;同时发现在电泳检测过程中,恒定电流检测图像结果中呈现的基因组DNA条带要比恒定电压检测结果平整。     

DNA粗提取与鉴定实验解析

一、实验原理解析 1．粗提取原理：在NaCl溶液浓度低于0．14mol／L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0．14mol／L时,DNA溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又增大。