Cre基因拼接及转基因细胞的构建

由于具有时间、组织和位点特异性,Cre重组酶介导的DNA重组己成为基因靶位操作的一个重要工具。本实验人工合成Cre基因片段,并将其准确拼接．然后在动物（猪）的成纤维细胞中表达,为接下来构建含Cre基因的转基因猪奠定基础。     

基因治疗中基因导入的病毒载体

DNA或 RNA瘤病毒能将其遗传物质转入宿主细胞而引起细胞转化 ,这种能力使有关研究者们想到以它们作为基因治疗的基因载体。虽然确定其安全性难度很大 ,但重组病毒法在实验室里行之有效。转基因效能较高 ,只要解决了其安全性问题 ,将在基因治疗中起到重要作用。本文概述了几种主要病毒载体及其特点。1　逆转录病毒载体逆转录病毒包括一大类基因组 ,长约 1 0 Kb的单链 RNA的有被病毒 ,病毒生活史中 ,其 RNA逆转录成双链 DNA整合到宿主细胞基因组内长期表达。病毒基因组有 gag,pol,env三个结构基因和长末端重复序列 ( LTR) ,包装信号 (…     

“基因魔剪”或增患癌风险

正两个研究团队的最新成果给现在热门的被称为"基因魔剪"的CRISPR技术泼了冷水:CRISPR编辑成功或增加患癌风险。两个团队认为,CRISPR/Cas9基因编辑过程中造成的DNA双链断裂,会激活p53蛋白通路,引起人多能干细胞的凋亡。也就是说,经基因编辑后还能存活下来的细胞,通常存在p53功能缺陷。p53缺陷是至今已知的与癌症相关的最普遍的基因突变。p53基因被称为"抑癌基     

日本研究发现基因疫苗是增强免疫的关键

日本大阪大学研究人员近期报告,基因疫苗增强免疫系统的关键是能够激活白细胞的双链脱氧核糖核酸（DNA）,而与之前认为的碱基序列无关。 基因疫苗指将编码某种蛋白质抗原的重组真核表达载体直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体免疫系统,从而诱导特异性的体液免疫和细胞免疫应答。     

用PCR技术筛选小分子DNA重组菌落的研究

为解决小分子DNA与质粒载体连接，转化入大肠杆菌后，蓝白斑不能很好鉴别非重组菌落与重组菌落的问题，本实验拟建立用PCR技术快速筛选小分子DNA重组菌落的方法，并对比研究特异引物扩增和通用引物扩增的可靠性。     

胸腺素α_1基因的化学合成

用固相亚磷酰胺法(solid-phase phosphoramidite method)成功地合成了胸腺素α_1的全基因(下简称Tα_1基因)。合成的Tα_1基因全长为96bp(碱基对),包括胸腺素α_1结构基因和两端的接头。α_1基因先分成七个片段在DNA合成仪上合成,再经T_4DNA连接酶连接成为完整的Tα_1双链基因。Tα_1基因已克隆到质粒pBR322上,并经抗菌素抗性试验和酶切鉴定筛选出重组pBR322质粒。已进行α_1基因的顺序测定,目前正在进行表达工作。Tα_1由一种由28个氨基酸组成的活性多肽,由胸腺上皮细胞产生,对人体免疫功能的调整起重要作用。如调节T淋巴细胞的分化与成熟,增强移动抑制因子和干扰素的合成     

重组链球菌溶血素(SLO)的原核表达、纯化

目的构建SLO原核表达质粒,重组蛋白的诱导表达并纯化。方法提取链霉菌溶血素O模板DNA,PCR法扩增slo基因。构建融合表达重组质粒p GEX-6p-1-slo和pet32a-tev-slo,将正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21和大肠杆菌BL21-DE3,使用异丙基硫代βD半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组融合蛋白。采用亲和层析纯化重组蛋白,切除标签后,再通过亲和层析纯化,获取SLO重组蛋白。结果 PCR扩增出slo基因,基因片段(1700 bp)与理论一致。经SDSPAGE,蛋白质印迹显示重组蛋白相对分子质量为55 k Da,与数据库中的相对分子质量结果相符。结论成功构建了slo原核表达质粒,表达并纯化了SLO重组蛋白。     

基因组的监察者

在显微镜下观察,活细胞显得很平静,但在平静的外表下,生化反应却在活跃地进行着.动植物细胞的DNA基因组包含了数以千计的基因,如果不加干涉,细胞的转录机制将同时转录基因组中全部基因:解开DNA双螺旋,将每个基因转录成单链的信使RNA,最后将信使RNA翻译成蛋白质.奇怪的是,很少量的双链RNA分子能够使蠕虫甚至其后代不自主地扭曲.     

基于基因组方法的虚拟企业组织优化研究

在与一般的组织优化方法比较分析的基础上引入了基因组方法的思想,并给出了具体的实现方法和研究框架.继而初步形成了基于基因组方法的虚拟企业组织优化理论,并对其中的基因重组问题进行了重点研究,由此得出基因重组是实现虚拟企业组织优化有效途径的论断.最后指出:由于可以借助于生物学中的基因重组技术,通过持续地提高"基因"能力要素的竞争能力来实现虚拟企业的组织优化,因而能够较好地解决企业快速响应市场需求变化的问题.     

资讯

正饮酒致癌的分子机制酒精位列世界卫生组织国际癌症研究中心(IARC)的1类致癌物清单上,但饮酒究竟为何会致癌,此前并没有从分子机制上证明两者间的关联。一项新研究首次发现,酒精可以损伤干细胞的DNA,从而提高饮酒者罹患癌症的风险。酒精的初级代谢产物乙醛会导致小鼠造血干细胞DNA双链断裂。虽然部分DNA断裂后被修复,但是残留损害仍影响     

DNA 4mC甲基化修饰位点预测的研究进展

DNA N4-methylacytosine (4mC)在DNA表达、修复和复制方面起着重要作用。准确地预测DNA 4mC位点是了解其功能行为的迫切需要,这将有助于药物发现和生物医学研究。相比于传统湿实验方法而言,基于机器学习的4mC位点识别方法不仅能节省大量的经费,而且能快速大批量地获取4mC修饰位点。本研究对现有预测器进行了汇总分析,并对未来相关研究工作进行展望。     

人甲胎蛋白基因的克隆和表达

目的 构建表达人甲胎蛋白(AFP)的重组质粒，并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白。方法 用PCR方法从人胎肝组织中扩增AFP基因片断，将其转入原核载体质粒pCEMEX-1，在大肠杆菌DH5α中克隆，并在BL21DE3中表达。结果 重组质粒pCEMEX-AFP的AFP基因序列经分析与GenRank公布序列相符，各表达的蛋白经Western Blot检测有抗原性。结论 基因重组菌表达的融合蛋白有可能作为有效的肿瘤抗原。     

遗传工程是如何施工的

遗传工程又称基因工程或重组DNA技术。简单地说，遗传工程就是用“外科手术”的方法将甲生物的某个基因从其染色体上切下来，并转移给乙生物，通过该基因的表达，从而使后者具备了前者的某个性状或某项功能。     

利用酵母单杂交研究AtbHLH112上游调控基因

酵母单杂交技术是研究DNA与蛋白质相互作用的经典方法,能够有效地分离鉴定与特异DNA序列识别结合的蛋白质。本研究利用酵母单杂交系统构建了AtWRKYs基因cDNA文库,筛选获得了与拟南芥抗逆境胁迫基因AtbHLH112启动子区域中W-box元件特异性识别互作的WRKY蛋白。结果为进一步研究AtbHLH112上游表达调控基因网络奠定了基础。     

大肠杆菌——现代遗传学的关键

十九世纪中叶孟德尔(Mendel)对植物杂交和巴斯德(Pasteur)对发酵所进行的研究,很快通过细菌遗传学产生了当代分子生物学。在遗传学研究方面,大肠杆菌占据着关键的地位,它开始了从早期证明基因是脱氧核糖核酸(DNA)到现在的使用重组DNA技术的遗传工程。     

生物工程与农业生产

基因工程(又称DNA重组技术)是生物工程的核心。80年代以来,基因工程的发展趋势有显著的三个方面: 1.从操纵和转移异体DNA(或基因)发展为瞄准表达产物蛋白质的性能,从而设计并定制出自然界尚不存在的蛋白质的基因工程称为蛋白质工程。被公认为是第二代基因工程技术。 2.从遗传物质性质方面说,已经由DNA重组技术产生了所谓RNA重组技术。RNA在基因工程中使用时,比DNA更好:如作分子杂交的探针时易于标记;用于印迹法转     

新兴产业创业投资引导基金绩效评价研究

为研究新兴产业创业投资引导基金绩效,本文结合我国现实情况,构建新兴产业创业投资引导基金评价指标体系,在样本指标数据的基础上运用因子分析和DEA相结合的方法对引导基金绩效进行了较为直观、客观的评价。研究结果表明,目前我国新兴产业创业投资引导基金已取得了一定成效,新兴产业整体处在快速发展成长的阶段,但大部分企业都存在着规模效率较低的问题,需要引导基金加大投资力度的同时企业自身也亟待提高技术水平、优化生产结构。     

双链区块链赋能突发公共卫生事件信息共享研究

【目的/意义】将双链区块链技术纳入突发公共卫生事件信息共享研究范畴对推进我国突发公共卫生管理体系和能力现代化建设具有重要价值。【方法/过程】通过深入分析双链区块链融入突发公共卫生事件信息共享的赋能机理,从数据存储层、网络共识层、智能合约层和服务应用层四方面构建了基于双链区块链赋能的突发公共卫生事件信息共享模型,并以疫情下某医疗机构信息共享为例分析其运行机理,最后分析了其面临的挑战风险。【结果/结论】本研究为解决突发公共卫生事件信息共享难题、提升我国疫情防控应急管理水平提供了一定的理论基础支撑和科学决策支持。【创新/局限】本研究结合双链区块链和突发公共卫生事件信息共享之间的天然耦合性,提供了双链区块链赋能突发公共卫生事件信息共享的全新视角,但缺乏具体的实际案例进行分析。     

肺炎衣原体膜表面蛋白重组质粒的构建

目的 构建表达肺炎衣原体膜表面蛋白(OMP)的重组质粒，并在火肠杆菌中表达获得基因重组蛋白．方法用高保真PCR方法从肺炎衣原体扩增OMP片段．双酶切后插入原核表达质粒pQE-30，在大肠杆菌M15中表达，结果重组质粒经双酶切鉴定与目的基因长度相符；各表达蛋白经SDS-PAGE分析，相对分子量与文献相符．结论该重组质粒可用于核酸疫苗的备选质粒，基因重组菌表达的融合蛋白有可能作为有效抗原用于肺炎衣原体检测试剂盒的制备。     

细胞遗传工程:植物育种的一项新技术吗?

有一项道传工程的新技术,它不象重组DNA技术那样被广为宣传,那就是通过无性细胞融合来转移遗传物质。采用这一有前途的方法交换整块基因,不必象在重组DNA技术中那样需事先进行鉴定和分离。今后几年内,这类方法可使基因块(geneblock)从一物种转侈到另一物种成为可能,例如可以把杂草的抗除草剂抗性赋予农作物。